| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·棉花研究现状 | 第12-15页 |
| ·棉花概述 | 第12页 |
| ·棉花纤维的发育过程 | 第12-13页 |
| ·棉纤维细胞的分化和突起 | 第12-13页 |
| ·纤维细胞伸长和初生壁合成（伸长期） | 第13页 |
| ·纤维细胞的次生壁合成和增厚（增厚期） | 第13页 |
| ·脱水成熟（成熟期） | 第13页 |
| ·棉花发育相关基因的研究概况 | 第13-15页 |
| ·阿拉伯半乳聚糖蛋白研究进展 | 第15-18页 |
| ·AGPs 蛋白结构与分类 | 第15-16页 |
| ·阿拉伯半乳聚糖蛋白特性 | 第16页 |
| ·阿拉伯半乳聚糖蛋白的功能 | 第16-18页 |
| ·AGPs 参与生长调节 | 第16-17页 |
| ·参与细胞骨架相互作用 | 第17页 |
| ·植物与微生物的相互作用 | 第17页 |
| ·AGPs 参与细胞的程序性死亡 | 第17-18页 |
| ·AGPs 参与器官的脱落 | 第18页 |
| ·基因表达及功能研究相关技术原理及操作程序 | 第18-19页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第19-20页 |
| ·研究的意义与目的 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌种与载体 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·培养基（配方见附录）： | 第22页 |
| ·抗生素 | 第22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-35页 |
| ·GhFLA1 和 GhFLA4 基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·棉花 RNA 的提取及质量检测 (CTAB/酸酚法)（蒋建雄和张天真，2003）12 | 第23-24页 |
| ·cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·GhFLA1 和 GhFLA4 基因的 PCR 扩增 | 第24页 |
| ·目的片段的回收及连接 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌 Top10 感受态细胞的制备与热击转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第25-26页 |
| ·qPCR 分析 | 第26页 |
| ·实验材料的处理 | 第26页 |
| ·qPCR | 第26页 |
| ·载体构建 | 第26-31页 |
| ·超表达载体的构建及鉴定 | 第27-28页 |
| ·GhFLA1 和 GhFLA4 亚细胞定位载体的构建及定位分析 | 第28页 |
| ·原核表达载体的构建及诱导表达 | 第28-29页 |
| ·酵母表达载体的构建及转基因酵母的表型观察 | 第29-31页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第31-35页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
| ·农杆菌电击转化法 | 第31-32页 |
| ·超表达载体转化烟草悬浮细胞及转化系形态观察 | 第32页 |
| ·烟草的转化及鉴定 | 第32-33页 |
| ·陆地棉 YZ-1 遗传转化 | 第33-35页 |
| 第三章 GhFLA1 基因的克隆和功能分析 | 第35-52页 |
| ·棉花总 RNA 的提取 | 第35页 |
| ·GhFLA1 基因克隆 | 第35-37页 |
| ·生物信息学分析 | 第37页 |
| ·多重序列比对及进化树分析 | 第37-39页 |
| ·GhFLA1 基因的表达分析 | 第39-40页 |
| ·GhFLA1 载体构建及亚细胞定位分析 | 第40-41页 |
| ·原核表达质粒的构建及重组子的鉴定 | 第41-42页 |
| ·表达分析 | 第42-43页 |
| ·酵母细胞的转化及观察 | 第43-45页 |
| ·酵母表达载体 pREP5N-GhFLA1 的构建与鉴定 | 第43页 |
| ·酵母 RNA 提取及 RT-PCR 分析 | 第43-44页 |
| ·GhFLA1 在酵母细胞中的过量表达对细胞形态的影响 | 第44-45页 |
| ·GhFLA1 超表达载体的构建及烟草悬浮细胞的转化 | 第45-49页 |
| ·超表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·烟草悬浮细胞 BY-2 的转化 | 第46-49页 |
| ·烟草的遗传转化、鉴定及表型分析 | 第49-51页 |
| ·烟草的遗传转化及鉴定 | 第49-50页 |
| ·转基因烟草表型分析 | 第50-51页 |
| ·棉花 YZ-1 的遗传转化 | 第51-52页 |
| 第四章 GhFLA4 基因的克隆及功能分析 | 第52-67页 |
| ·GhFLA4 基因克隆和序列分析 | 第52-53页 |
| ·生物信息学的分析 | 第53页 |
| ·多重序列比对及进化树分析 | 第53-55页 |
| ·GhFLA4 基因的表达分析 | 第55-56页 |
| ·GhFLA4 载体构建及亚细胞定位分析 | 第56-57页 |
| ·原核表达质粒的构建及重组子的鉴定 | 第57-58页 |
| ·表达分析 | 第58页 |
| ·酵母细胞的转化及观察 | 第58-61页 |
| ·GhFLA4 基因转化裂殖酵母的结果与分析 | 第58-59页 |
| ·酵母 RNA 提取及 RT-PCR 分析 | 第59-60页 |
| ·转基因酵母细胞形态观察 | 第60-61页 |
| ·GhFLA4 超表达载体的构建及烟草悬浮细胞的转化 | 第61-64页 |
| ·植物过量表达载体的构建 | 第61页 |
| ·GhFLA4 基因转化烟草悬浮细胞 BY-2 | 第61-64页 |
| ·烟草的遗传转化、鉴定及表性分析 | 第64-65页 |
| ·烟草的遗传转化及鉴定 | 第64-65页 |
| ·转基因烟草表型分析 | 第65页 |
| ·棉花 YZ-1 的遗传转化 | 第65-67页 |
| 第五章 讨论 | 第67-71页 |
| ·AGPs 功能研究 | 第67-68页 |
| ·GhFLA1 和 GhFLA4 的功能分析 | 第68-69页 |
| ·利用 Gateway 技术构建载体 | 第69-71页 |
| 第六章 总结与展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85-86页 |
| 导师评阅表 | 第86页 |
