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棉花Bt抗虫基因与bar抗除草剂基因的双价植物表达载体的构建及转化的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
第1章 绪论第9-25页
   ·国内外植物转基因的发展现状第9-10页
     ·世界植物转基因的发展现状第9页
     ·我国转基因的研究现状第9-10页
   ·棉花转基因的方法第10-13页
     ·农杆菌介导法第10-11页
     ·花粉管通道法第11-12页
     ·基因枪法第12-13页
     ·基因枪法和农杆菌结合的转化方法第13页
     ·真空渗透转化法第13页
   ·农杆菌介导棉花遗传转化的影响因素第13-17页
     ·外植体对遗传转化的影响第13-14页
     ·基因型对转化率的影响第14页
     ·外植体的来源和大小对转化率的影响第14-15页
     ·受体材料预培养和共培养的天数对转化率的影响第15-16页
     ·农杆菌的菌株及活力对遗传转化的影响第16页
     ·药物选择与筛选压力的选择第16-17页
     ·抑菌抗生素对再生率的影响第17页
     ·基因活化的诱导物第17页
   ·转基因抗虫棉的研究进展第17-21页
     ·苏云金芽孢杆菌基因第18页
     ·蛋白酶抑制剂基因第18-19页
     ·外源凝集素基因第19-20页
     ·几丁质酶基因第20页
     ·抗虫棉的应用现状第20-21页
   ·抗除草剂基因工程在棉花遗传转化中的研究概况第21-25页
     ·抗除草剂 bar 基因及其应用第21-22页
     ·抗除草剂基因 als 及其应用第22页
     ·抗草甘膦基因第22-23页
     ·2,4-D 单氧化酶(tfdA)基因第23页
     ·溴苯腈水解酶基因第23页
     ·研究意义第23-25页
第2章 抗除草剂 bar 基因与抗虫 Bt 基因双价植物表达载体的构建第25-41页
   ·材料与试剂第25-27页
     ·质粒与菌株第25-26页
     ·主要试剂与仪器设备(型号、产地)第26页
     ·引物第26-27页
     ·培养基及溶液配方第27页
   ·实验方法第27-36页
     ·bar 基因的 PCR 扩增,检测与回收纯化第27-30页
     ·中间克隆载体的构建第30-32页
     ·真核表达载体 pBI121-bar/Bt 的构建第32-34页
     ·真核表达载体 pBI121-bar/Bt 转化农杆菌 LBA4404第34-36页
   ·结果与分析第36-38页
     ·抗除草剂 bar 基因的 PCR 扩增、测序及 bar 基因的酶切鉴定第36-37页
     ·Bt-4AB 双酶切第37-38页
     ·pBI121-bar/Bt 重组质粒的酶切及 PCR 鉴定第38页
   ·讨论第38-41页
第3章 农杆菌介导的植物表达载体的遗传转化第41-54页
   ·实验材料与培养基第41-43页
     ·实验材料第41-42页
     ·培养基第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·农杆菌侵染液的制备第43页
     ·农杆菌对棉花胚性愈伤组织的侵染第43-44页
     ·影响海岛棉胚性愈伤组织遗传转化因子的研究第44-45页
   ·结果与分析第45-52页
     ·PPT 浓度的筛选第45-46页
     ·不同基因型对 PPT 的敏感性的差异第46-47页
     ·头孢霉素(Cef)抑菌浓度的确定第47-48页
     ·头孢霉素(Cef)对胚性愈伤组织生长的影响第48-49页
     ·转化不同外源基因的外植体在不同 Cef 浓度下的差异第49-50页
     ·农杆菌侵染后愈伤生长状态的差异第50-51页
     ·遗传转化中不同外源基因对不同基因型愈伤出愈率的影响第51-52页
   ·讨论第52-54页
全文结论第54-56页
参考文献第56-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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