摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第9-25页 |
·国内外植物转基因的发展现状 | 第9-10页 |
·世界植物转基因的发展现状 | 第9页 |
·我国转基因的研究现状 | 第9-10页 |
·棉花转基因的方法 | 第10-13页 |
·农杆菌介导法 | 第10-11页 |
·花粉管通道法 | 第11-12页 |
·基因枪法 | 第12-13页 |
·基因枪法和农杆菌结合的转化方法 | 第13页 |
·真空渗透转化法 | 第13页 |
·农杆菌介导棉花遗传转化的影响因素 | 第13-17页 |
·外植体对遗传转化的影响 | 第13-14页 |
·基因型对转化率的影响 | 第14页 |
·外植体的来源和大小对转化率的影响 | 第14-15页 |
·受体材料预培养和共培养的天数对转化率的影响 | 第15-16页 |
·农杆菌的菌株及活力对遗传转化的影响 | 第16页 |
·药物选择与筛选压力的选择 | 第16-17页 |
·抑菌抗生素对再生率的影响 | 第17页 |
·基因活化的诱导物 | 第17页 |
·转基因抗虫棉的研究进展 | 第17-21页 |
·苏云金芽孢杆菌基因 | 第18页 |
·蛋白酶抑制剂基因 | 第18-19页 |
·外源凝集素基因 | 第19-20页 |
·几丁质酶基因 | 第20页 |
·抗虫棉的应用现状 | 第20-21页 |
·抗除草剂基因工程在棉花遗传转化中的研究概况 | 第21-25页 |
·抗除草剂 bar 基因及其应用 | 第21-22页 |
·抗除草剂基因 als 及其应用 | 第22页 |
·抗草甘膦基因 | 第22-23页 |
·2,4-D 单氧化酶(tfdA)基因 | 第23页 |
·溴苯腈水解酶基因 | 第23页 |
·研究意义 | 第23-25页 |
第2章 抗除草剂 bar 基因与抗虫 Bt 基因双价植物表达载体的构建 | 第25-41页 |
·材料与试剂 | 第25-27页 |
·质粒与菌株 | 第25-26页 |
·主要试剂与仪器设备(型号、产地) | 第26页 |
·引物 | 第26-27页 |
·培养基及溶液配方 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
·bar 基因的 PCR 扩增,检测与回收纯化 | 第27-30页 |
·中间克隆载体的构建 | 第30-32页 |
·真核表达载体 pBI121-bar/Bt 的构建 | 第32-34页 |
·真核表达载体 pBI121-bar/Bt 转化农杆菌 LBA4404 | 第34-36页 |
·结果与分析 | 第36-38页 |
·抗除草剂 bar 基因的 PCR 扩增、测序及 bar 基因的酶切鉴定 | 第36-37页 |
·Bt-4AB 双酶切 | 第37-38页 |
·pBI121-bar/Bt 重组质粒的酶切及 PCR 鉴定 | 第38页 |
·讨论 | 第38-41页 |
第3章 农杆菌介导的植物表达载体的遗传转化 | 第41-54页 |
·实验材料与培养基 | 第41-43页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·培养基 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
·农杆菌侵染液的制备 | 第43页 |
·农杆菌对棉花胚性愈伤组织的侵染 | 第43-44页 |
·影响海岛棉胚性愈伤组织遗传转化因子的研究 | 第44-45页 |
·结果与分析 | 第45-52页 |
·PPT 浓度的筛选 | 第45-46页 |
·不同基因型对 PPT 的敏感性的差异 | 第46-47页 |
·头孢霉素(Cef)抑菌浓度的确定 | 第47-48页 |
·头孢霉素(Cef)对胚性愈伤组织生长的影响 | 第48-49页 |
·转化不同外源基因的外植体在不同 Cef 浓度下的差异 | 第49-50页 |
·农杆菌侵染后愈伤生长状态的差异 | 第50-51页 |
·遗传转化中不同外源基因对不同基因型愈伤出愈率的影响 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
全文结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |