| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 第一篇 文献综述 | 第19-51页 |
| 第一章 细菌生物被膜研究进展 | 第19-41页 |
| 1 细菌生物被膜的定义 | 第19-20页 |
| 2 生物被膜的结构及特性 | 第20-21页 |
| ·生物被膜的结构 | 第20页 |
| ·生物被膜的特性 | 第20-21页 |
| 3 生物被膜的形成 | 第21-24页 |
| ·生物被膜的形成过程 | 第21-22页 |
| ·生物被膜的形成原因 | 第22-24页 |
| 4 生物被膜的检测方法 | 第24-26页 |
| ·试管法 | 第24-25页 |
| ·96孔微量板定量检测法 | 第25页 |
| ·荧光法 | 第25页 |
| ·扫描电子显微镜 | 第25页 |
| ·激光共聚焦显微镜 | 第25-26页 |
| 5 生物被膜的基因表达及蛋白表达 | 第26-28页 |
| ·生物被膜的基因表达 | 第26-27页 |
| ·生物被膜的蛋白表达 | 第27-28页 |
| 6 生物被膜的致病机制及耐药性 | 第28-30页 |
| ·生物被膜的致病机制 | 第28-29页 |
| ·生物被膜的耐药性 | 第29-30页 |
| 7 生物被膜的防治方法 | 第30-33页 |
| ·酶 | 第31页 |
| ·噬菌体 | 第31-32页 |
| ·植物次级代谢的化学物质 | 第32页 |
| ·微生物相互作用及代谢产物 | 第32-33页 |
| ·其它方法 | 第33页 |
| 8 生物被膜在嗜水气单胞菌中的研究 | 第33-34页 |
| 9 结束语 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 第二章 嗜水气单胞菌外膜蛋白研究进展 | 第41-51页 |
| 1 组成、结构和功能 | 第41-43页 |
| ·外膜蛋白A | 第42页 |
| ·微孔蛋白 | 第42页 |
| ·脂蛋白 | 第42-43页 |
| 2 致病机理 | 第43页 |
| 3 免疫特性 | 第43-44页 |
| 4 受体功能 | 第44-45页 |
| 5 OMP与血清型 | 第45页 |
| 6 OMP与LPS的相互作用 | 第45页 |
| 7 其他功能 | 第45-46页 |
| 8 结束语 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 第二篇 试验研究 | 第51-183页 |
| 第三章 嗜水气单胞菌生物被膜形成能力分析及其与毒力关系 | 第51-69页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-56页 |
| ·菌株和质粒 | 第52页 |
| ·试剂与仪器 | 第52页 |
| ·菌悬液的制备 | 第52-53页 |
| ·体外生物被膜检测 | 第53-54页 |
| ·GFP标记嗜水气单胞菌 | 第54-55页 |
| ·气单胞菌分离株生物被膜形成能力检测 | 第55-56页 |
| ·斑马鱼致病试验 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-63页 |
| ·扫描电镜观察 | 第56-57页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第57-58页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 | 第58-59页 |
| ·GFP在嗜水气单胞菌的表达鉴定 | 第59-60页 |
| ·嗜水气单胞菌J-1和J-1~(GFP)生物被膜形成能力比较 | 第60页 |
| ·嗜水气单胞菌J-1~(GFP)和JH17~(GFP)生物被膜观察 | 第60-61页 |
| ·气单胞菌分离株生物被膜形成能力分析 | 第61-62页 |
| ·斑马鱼攻毒试验 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| Abstract | 第68-69页 |
| 第四章 嗜水气单胞菌浮游态和生物被膜状态比较蛋白质组学研究 | 第69-93页 |
| 摘要 | 第69-70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-75页 |
| ·菌株及培养条件 | 第70页 |
| ·试剂与仪器 | 第70-71页 |
| ·引物设计 | 第71页 |
| ·细菌全菌蛋白样品的制备 | 第71页 |
| ·外膜蛋白样品的制备 | 第71-72页 |
| ·感染血清的制备 | 第72页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第72-73页 |
| ·Western blot分析 | 第73页 |
| ·质谱测定及生物信息学分析 | 第73页 |
| ·荧光定量PCR | 第73-75页 |
| 2 结果 | 第75-78页 |
| ·全菌蛋白比较蛋白质组学分析 | 第75-76页 |
| ·外膜蛋白比较蛋白质组学分析 | 第76页 |
| ·外膜蛋白免疫蛋白质组学分析 | 第76-78页 |
| ·荧光定量PCR | 第78页 |
| 3 讨论 | 第78-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 附表 | 第88-92页 |
| Abstract | 第92-93页 |
| 第五章 嗜水气单胞菌生物被膜形成相关基因检测、克隆表达及序列分析 | 第93-111页 |
| 摘要 | 第93-94页 |
| 1 材料与方法 | 第94-98页 |
| ·菌株和质粒 | 第94页 |
| ·试剂与仪器 | 第94页 |
| ·引物设计 | 第94-95页 |
| ·基因组的提取 | 第95页 |
| ·ompAII、flaA、omp38在气单胞菌中的分布 | 第95-96页 |
| ·序列分析 | 第96-97页 |
| ·ompAII、flaA、omp38基因的克隆表达 | 第97-98页 |
| ·免疫血清的制备 | 第98页 |
| ·Western blot分析 | 第98页 |
| 2 结果 | 第98-106页 |
| ·ompAII、flaA、omp38在气单胞菌中的分布 | 第98-99页 |
| ·序列分析 | 第99-102页 |
| ·融合蛋白的表达及纯化 | 第102-103页 |
| ·Western blot分析 | 第103-105页 |
| ·重组蛋白免疫血清的制备 | 第105-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-110页 |
| Abstract | 第110-111页 |
| 第六章 嗜水气单胞菌Omp38重组蛋白的动物免疫效果评价 | 第111-135页 |
| 摘要 | 第111-112页 |
| 1 材料与方法 | 第112-119页 |
| ·菌株 | 第112页 |
| ·试剂与仪器 | 第112-113页 |
| ·实验动物 | 第113页 |
| ·外膜蛋白样品的制备 | 第113页 |
| ·Western blot分析 | 第113页 |
| ·疫苗的制备 | 第113-114页 |
| ·小鼠免疫效果评价 | 第114-117页 |
| ·鳊鱼免疫效果评价 | 第117-119页 |
| ·统计分析 | 第119页 |
| 2 结果 | 第119-128页 |
| ·Omp38的保守性分析 | 第119-120页 |
| ·小鼠免疫效果评价 | 第120-125页 |
| ·鳊鱼免疫效果评价 | 第125-128页 |
| 3 讨论 | 第128-131页 |
| 参考文献 | 第131-134页 |
| Abstract | 第134-135页 |
| 第七章 嗜水气单胞菌生物被膜形成相关基因缺失株的构建 | 第135-157页 |
| 摘要 | 第135-136页 |
| 1 材料与方法 | 第136-143页 |
| ·菌株和质粒 | 第136-137页 |
| ·试剂与仪器 | 第137页 |
| ·引物设计 | 第137-139页 |
| ·ompAII基因缺失株的构建 | 第139-140页 |
| ·flaA基因缺失株的构建 | 第140-141页 |
| ·omp38基因缺失株的构建 | 第141页 |
| ·ompAII-omp38双基因缺失株的构建 | 第141-142页 |
| ·ompAII基因互补株的构建 | 第142页 |
| ·flaA基因互补株的构建 | 第142页 |
| ·omp38基因互补株的构建 | 第142页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第142-143页 |
| ·Western blot分析 | 第143页 |
| ·质粒稳定性分析 | 第143页 |
| ·生长曲线的测定和生长形态的比较 | 第143页 |
| ·体外竞争试验 | 第143页 |
| 2 结果 | 第143-152页 |
| ·ompAII基因缺失株的构建和鉴定 | 第143-145页 |
| ·flaA基因缺失株的构建和鉴定 | 第145-146页 |
| ·omp38基因缺失株的构建和鉴定 | 第146-148页 |
| ·ompAII-omp38双基因缺失株的构建和鉴定 | 第148页 |
| ·互补株的构建和鉴定 | 第148-150页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第150-151页 |
| ·Western blot分析 | 第151页 |
| ·遗传稳定性分析 | 第151页 |
| ·生长曲线的测定 | 第151-152页 |
| ·体外竞争试验 | 第152页 |
| 3 讨论 | 第152-154页 |
| 参考文献 | 第154-156页 |
| Abstract | 第156-157页 |
| 第八章 嗜水气单胞菌生物被膜形成相关基因缺失株的生物学特性分析 | 第157-183页 |
| 摘要 | 第157-159页 |
| 1 材料与方法 | 第159-163页 |
| ·菌株及引物 | 第159-160页 |
| ·试剂与仪器 | 第160页 |
| ·生物被膜的测定 | 第160页 |
| ·噬菌体敏感性试验 | 第160-161页 |
| ·鲫鱼血清杀菌试验 | 第161页 |
| ·细胞试验 | 第161-162页 |
| ·胞外产物的活性 | 第162-163页 |
| ·毒力基因的表达 | 第163页 |
| ·动物试验 | 第163页 |
| 2 结果 | 第163-172页 |
| ·生物被膜的检测 | 第163-165页 |
| ·噬菌体敏感性分析 | 第165-166页 |
| ·血清杀菌能力 | 第166页 |
| ·细胞试验 | 第166-169页 |
| ·胞外产物的活性 | 第169-170页 |
| ·毒力基因的表达 | 第170-171页 |
| ·动物试验 | 第171-172页 |
| 3 讨论 | 第172-176页 |
| 参考文献 | 第176-181页 |
| Abstract | 第181-183页 |
| 全文总结 | 第183-185页 |
| 致谢 | 第185-187页 |
| 博士期间发表及待发表论文 | 第187页 |
