中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
引言 | 第8-11页 |
第一部分 聚乙烯亚胺纳米颗粒(PEI NPS)的制备、表征及其与质粒DNA连接 | 第11-19页 |
1 材料 | 第11-13页 |
·主要试剂 | 第11页 |
·主要仪器 | 第11页 |
·主要溶液配制 | 第11-13页 |
2 主要实验方法 | 第13-14页 |
·PEI-TPP纳米颗粒的制备 | 第13页 |
·PEI-TPP纳米颗粒的表征 | 第13页 |
·高纯度质粒DNA的制备 | 第13-14页 |
·凝胶阻滞试验 | 第14页 |
·DNA保护试验 | 第14页 |
3 结果 | 第14-18页 |
·PEI-TPP纳米颗粒的制备和表征 | 第14-16页 |
·凝胶阻滞试验 | 第16-17页 |
·DNA酶保护试验 | 第17-18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
第二部分 PEI NPS基因载体体外转染效率及毒性分析 | 第19-29页 |
1. 材料与方法 | 第19-20页 |
·试剂和仪器 | 第19页 |
·细胞系 | 第19页 |
·菌种和质粒 | 第19-20页 |
2 方法 | 第20-21页 |
·感受态细胞的制备 | 第20页 |
·pEGFP-C1质粒转化 | 第20页 |
·pEGFP-C1质粒高纯度大量提取 | 第20页 |
·PEI-TPP纳米材料进入细胞观察 | 第20-21页 |
·体外转染效率 | 第21页 |
·细胞毒性分析 | 第21页 |
3 结果 | 第21-26页 |
·细胞摄入试验 | 第21-23页 |
·体外转染效率分析 | 第23-25页 |
·PEI-TPP体外转染的毒性分析 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-29页 |
第三部分 PEI NPS对细胞自噬的影响 | 第29-35页 |
1 材料 | 第29页 |
·实验材料 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-30页 |
·细胞的复苏、传代与培养 | 第29-30页 |
·EGFP-LC3质粒转染 | 第30页 |
·LC-3蛋白检测 | 第30页 |
3 结果 | 第30-34页 |
·GFP-LC3荧光点状聚集分析 | 第30-33页 |
·LC-3蛋白表达 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
结语 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-41页 |
附录 | 第41-55页 |
在校发表论文情况 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |