| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·肝癌的研究概况 | 第11-12页 |
| ·癌症的靶向基因-病毒治疗概述 | 第12-15页 |
| ·癌症的病毒治疗 | 第12-13页 |
| ·癌症的基因治疗 | 第13-14页 |
| ·癌症的靶向基因-病毒治疗 | 第14-15页 |
| ·掌叶半夏凝集素概述及在肿瘤医学研究中的应用 | 第15-18页 |
| ·植物凝集素概述 | 第15页 |
| ·植物凝集素在肿瘤医学研究中的应用 | 第15-17页 |
| ·掌叶半夏凝集素研究概述 | 第17-18页 |
| ·掌叶半夏凝集素在肿瘤医学研究中的应用 | 第18页 |
| ·实验方案设计 | 第18-19页 |
| ·实验的目的和意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·腺病毒 | 第19页 |
| ·生化试剂 | 第19-20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| 3 实验方法 | 第22-34页 |
| ·分子克隆部分：质粒 pZD55-PPA 的构建 | 第22-25页 |
| ·病毒构建部分：病毒的包装、扩增、纯化以及滴度测定 | 第25-30页 |
| ·HEK293 细胞的培养 | 第25-26页 |
| ·病毒的包装和鉴定 | 第26-28页 |
| ·病毒的扩增和纯化 | 第28-29页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第29-30页 |
| ·细胞实验部分：体外实验检测病毒对恶性肿瘤的杀伤效果 | 第30-32页 |
| ·MTT 检测细胞存活率 | 第30页 |
| ·细胞形态学观察实验 | 第30页 |
| ·细胞病变效应（CPE）实验 | 第30页 |
| ·荧光定量 PCR 检测外源基因 mRNA 表达水平 | 第30-32页 |
| ·Annexin V/PI 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第32页 |
| ·动物实验部分：体内实验检测病毒对肝癌的杀伤效果 | 第32-34页 |
| ·荷瘤裸鼠模型（肝癌 Bel-7404 细胞）的建立以及瘤内注射 | 第32页 |
| ·绘制荷瘤裸鼠存活曲线和肿瘤抑制曲线 | 第32-33页 |
| ·HE 染色 | 第33页 |
| ·透射电镜观察实验 | 第33-34页 |
| ·统计学分析 | 第34页 |
| 4 实验结果 | 第34-50页 |
| ·质粒 pZD55-PPA 的鉴定 | 第34-37页 |
| ·pSD55-PPA 的构建 | 第34-35页 |
| ·pSD55-PPA 酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒 pZD55-PPA 的鉴定 | 第36-37页 |
| ·病毒的包装、扩增、纯化以及滴度测定 | 第37-38页 |
| ·ZD55-PPA 溶瘤腺病毒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·ZD55-PPA 溶瘤腺病毒的纯化以及滴度测定 | 第38页 |
| ·体外实验检测病毒对恶性肿瘤的杀伤效果 | 第38-45页 |
| ·MTT 法检测病毒对恶性肿瘤的杀伤能力与靶向性 | 第38-41页 |
| ·细胞形态学观察 | 第41-43页 |
| ·结晶紫实验检测细胞病变效应 | 第43页 |
| ·RT-PCR 从 mRNA 上检测 PPA 外源基因的表达水平 | 第43-44页 |
| ·Annexin V/PI 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| ·体内实验检测病毒对肝癌的杀伤效果 | 第45-50页 |
| ·重组病毒 ZD55-PPA 在一定程度上能有效抑制荷瘤裸鼠的肿瘤生长 | 第45-47页 |
| ·病理学相关实验检测病毒体内抗肿瘤效果 | 第47-48页 |
| ·透射电镜观察 PPA 基因诱导裸鼠肿瘤组织死亡的原因 | 第48-50页 |
| 5 讨论 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
