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转基因番茄外源基因检测方法研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略词第12-13页
目录第13-16页
第一章 绪论第16-28页
 1 转基因技术发展及其转基因作物研究现状第16-28页
   ·转基因技术的发展第16-18页
   ·转基因作物研究现状第18-21页
     ·农作物抗虫害性状研究第19-20页
     ·农作物抗除草剂品质研究第20页
     ·农作物抗病毒性状研究第20页
     ·农作物抗逆性和品质改良研究第20-21页
   ·转基因作物的安全性评价第21-22页
   ·转基因植物的外源基因检测方法研究第22-25页
     ·传统定性 PCR 检测技术第22页
     ·荧光定量 PCR 检测技术第22页
     ·多重 PCR 检测技术第22-23页
     ·核酸杂交技术检测第23-24页
     ·基因芯片检测技术第24页
     ·蛋白质检测技术及新型检测手段第24-25页
   ·转基因番茄研究现状及其检测方法第25-27页
     ·转基因番茄研究现状第25页
     ·转基因番茄外源基因种类和品种第25-26页
     ·转基因番茄外源基因检测方法研究进展第26-27页
   ·本研究的主要内容和意义第27-28页
第二章 定性 PCR 技术和核酸斑点杂交检测转基因番茄研究第28-40页
 1 材料与方法第28-33页
   ·材料第28-29页
     ·实验材料第28页
     ·主要仪器第28-29页
     ·试剂第29页
   ·方法第29-33页
     ·番茄样品 DNA 的提取及检测第29-30页
     ·引物设计第30-31页
     ·定性 PCR 技术检测第31页
     ·杂交膜的制备第31-32页
     ·生物素探针的制备第32页
     ·核酸斑点杂交与显色第32-33页
 2 结果与分析第33-37页
   ·样品 DNA 提取结果第33-34页
   ·引物筛选结果第34-35页
   ·定性 PCR 检测结果第35-36页
   ·核酸斑点杂交检测结果第36-37页
 3 讨论与结论第37-40页
   ·PCR 扩增引物的筛选第37-38页
   ·用 Hot-star DNA 聚合酶的影响第38页
   ·核酸斑点杂交的注意事项第38页
   ·结论第38-39页
   ·展望第39-40页
第三章 用微流体芯片技术检测番茄外源基因成分研究第40-76页
 1 材料与方法第40-48页
   ·材料第40-41页
     ·实验材料第40页
     ·主要仪器和耗材第40-41页
     ·试剂第41页
   ·方法第41-48页
     ·番茄样品基因组 DNA 提取第41-42页
     ·特异性引物设计第42页
     ·微流体芯片的探针设计和合成第42页
     ·三种不同的芯片杂交 CY3 标记样品的制备第42-45页
       ·用普通 PCR-CY3 标记体系标记芯片杂交样品(渗入荧光)第42-43页
       ·用(二次扩增)多重 PCR-CY3 标记番茄 DNA第43-44页
       ·番茄基因组的随机引物 CY3 标记体系第44-45页
     ·PCR 产物清洁第45-46页
     ·检测 PCR 产物荧光掺入第46-47页
     ·芯片杂交第47-48页
 2 结果分析第48-74页
   ·样品 DNA 的提取结果第48-49页
   ·用于芯片杂交样品制备的引物设计结果第49页
   ·原位合成芯片探针及和芯片合成第49-50页
   ·样品中的荧光渗入情况第50页
   ·芯片杂交结果分析第50-74页
     ·华番一号番茄三种不同的 CY3 标记方案芯片杂交结果比较第50-51页
     ·华番一号番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片各目的基因检测情况第51-52页
     ·华番一号(普通 PCR-CY3 标记)芯片检测信号值第52-54页
     ·华番一号番茄(多重 PCR-CY3 标记)芯片各目的基因检测情况第54-55页
     ·华番一号(二次扩增多重 PCR-CY3 标记)芯片检测信号值第55-57页
     ·华番一号番茄(随机引物 CY3 标记)芯片 8 个目的基因检测情况第57-58页
     ·华番一号番茄(随机引物 CY3 标记)芯片检测信号值第58-60页
     ·丽春番茄的芯片检测结果第60-61页
     ·丽春番茄(二次扩增多重 PCR-CY3 标记)芯片 8 个目的基因检测情况第61-62页
     ·丽春番茄(二次扩增多重 PCR-CY3 标记)芯片检测信号值第62-64页
     ·丽春番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片检测 8 个目的基因检测情况第64-65页
     ·丽春番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片检测信号值第65-67页
     ·合作 903 番茄和黄色圣女果番茄芯片检测结果第67-69页
     ·合作 903 番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片各目的基因检测情况第69页
     ·合作 903 番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片检测出的内参基因信号值第69-71页
     ·黄色圣女果番茄(普通 PCR-CY3)标记芯片各个目的基因检测情况第71页
     ·黄色圣女果番茄(普通 PCR-CY3 标记)芯片检测信号值第71-73页
     ·华番一号、丽春、黄色圣女果(普通 PCR-CY3 标记)芯片的探针稳定性比较第73-74页
 3 讨论第74-76页
总结第76-78页
参考文献第78-82页
附录:重要溶液配制第82-84页
致谢第84-86页
攻读硕士研究生期间的研究成果第86页

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