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DPP-Ⅳ抑制剂—异槲皮苷促进2型糖尿病模型小鼠胰岛素分泌及降糖作用的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-17页
第一章 文献综述第17-39页
   ·概述第17-28页
     ·糖尿病的定义第17页
     ·糖尿病的类型第17-18页
     ·糖尿病的流行病学第18-19页
     ·糖尿病的并发症第19-22页
     ·糖尿病的病因及发病机制第22-25页
     ·糖尿病治疗与预防策略第25-28页
   ·二肽基肽酶Ⅳ第28-36页
     ·DPP-IV 的分子结构第29-31页
     ·DPP-IV 分布和功能第31-32页
     ·DPP-IV 抑制剂的作用机理第32-33页
     ·DPP-IV 抑制剂的研究现状第33-36页
   ·课题研究思路第36-37页
   ·实验设计流程第37-39页
第二章 DPP-IV 蛋白催化结构域的克隆、表达及分离纯化第39-55页
   ·实验用品第39-45页
     ·实验用仪器第39-40页
     ·主要试剂、溶液第40-42页
     ·主要溶液的配制第42-45页
   ·实验方法第45-50页
     ·△DPP-Ⅳ的引物设计第45页
     ·DPP-IV 催化结构域基因片段的扩增第45-46页
     ·重组质粒 pKS-△DPP-Ⅳ的克隆第46页
     ·重组质粒 pGex-HisC3-△DPP-IV 的克隆第46-48页
     ·重组蛋白△DPP-IV 的表达第48-49页
     ·重组蛋白△DPP-IV 的纯化第49-50页
   ·实验结果与讨论第50-53页
     ·△DPP-IV 目的片段的扩增第50-51页
     ·重组质粒 pGEX-HisC3-△DPP-IV 的构建第51-52页
     ·重组蛋白 GST-△DPP-IV 的表达和纯化第52-53页
   ·本章小结第53-55页
第三章 DPP-IV 抑制剂的筛选第55-67页
   ·实验用品第57-58页
     ·实验用仪器与设备第57页
     ·主要试剂、溶液第57-58页
   ·实验方法第58-60页
     ·DPP-IV 酶促反应体系及酶活测定体系的建立第58页
     ·DPP-IV 抑制率的测定第58-59页
       ·实验方法第58页
       ·抑制率计算方法第58-59页
     ·DPP-IV 抑制剂 IC50的测定第59-60页
       ·半数抑制浓度(IC50)及计算原理第59页
       ·DPP-IV 抑制剂 IC50的测定方法第59页
       ·抑制剂抑制类型的确定第59-60页
   ·实验结果与讨论第60-65页
     ·DPP-IV 酶活性测定第60-61页
     ·DPP-IV 的抑制剂筛选第61-62页
     ·半数抑制浓度(IC50)的测定第62-63页
     ·异槲皮苷对 DPP-IV 抑制类型的确定第63-65页
   ·本章小结第65-67页
第四章 细胞水平上研究异槲皮苷对 GLP-1 分泌的影响第67-77页
   ·实验用品第69-71页
     ·细胞株第69页
     ·实验用仪器第69-70页
     ·主要试剂、溶液第70页
     ·主要溶液的配制第70-71页
   ·实验方法第71-73页
     ·细胞培养第71页
     ·GLP-1 分泌量的检测第71-73页
       ·NCI-H716 细胞生长曲线及 GLP-1 分泌标准曲线绘制第71页
       ·GLP-1ELISA 试剂盒标准曲线的绘制第71-72页
       ·GLP-1 分泌量的检测第72-73页
   ·实验结果与讨论第73-76页
     ·NCI-H716 细胞生长曲线及 GLP-1 分泌曲线第73页
     ·GLP-1ELISA 试剂盒标准曲线的绘制第73-74页
     ·GLP-1 分泌量检测第74-76页
   ·本章小结第76-77页
第五章 异槲皮苷对 2 型糖尿病小鼠降血糖效果的研究第77-103页
   ·实验用品第78-81页
     ·实验动物第78页
     ·实验用仪器第78-79页
     ·主要试剂、溶液第79-80页
     ·主要溶液的配制第80-81页
   ·实验方法第81-87页
     ·STZ 糖尿病小鼠模型的建立第81-82页
       ·建立糖尿病小鼠模型第81页
       ·体重检测第81页
       ·血糖检测第81页
       ·甘油三酯值和总胆固醇值检测第81-82页
     ·异槲皮苷对小鼠体重、血糖浓度的影响第82-83页
       ·对小鼠灌胃给药第82页
       ·检测体重、血糖变化第82页
       ·检测给药后糖耐量(OGTT)的变化第82-83页
       ·给药后小鼠血清中 DPP-IV 的活性第83页
       ·检测甘油三酯值和总胆固醇值变化第83页
       ·GLP-1 和胰岛素分泌量的检测第83页
     ·胰岛细胞形态观察第83-87页
       ·蜡块的制备第83-85页
       ·切片、贴片第85-86页
       ·组织切片 HE 染色第86-87页
       ·封片剂封存、显微镜照相第87页
   ·实验结果第87-100页
     ·2 型糖尿病小鼠模型的建立第87-88页
     ·异槲皮苷对小鼠体重、血糖浓度的影响第88-92页
       ·一般情况第88页
       ·异槲皮苷对小鼠体重变化的影响第88-89页
       ·异槲皮苷对小鼠血糖浓度变化的影响第89-92页
       ·给药小鼠血清对 DPP-IV 的抑制作用第92页
     ·异槲皮苷对小鼠甘油三酯和总胆固醇值变化的影响。第92-94页
       ·异槲皮苷对小鼠甘油三酯值变化的影响第92-93页
       ·异槲皮苷对小鼠胆固醇值变化的影响第93-94页
     ·异槲皮苷对小鼠 GLP-1 和胰岛素分泌量的影响第94-98页
       ·异槲皮苷对小鼠 GLP-1 分泌量的影响第94-96页
       ·异槲皮苷对小鼠胰岛素分泌量的影响第96-98页
     ·胰岛组织病理切片形态学观察第98-100页
   ·本章小结第100-103页
结论第103-104页
参考文献第104-114页
攻读博士期间发表的论文科研成果第114-115页
致谢第115页

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