| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| ·概述 | 第17-28页 |
| ·糖尿病的定义 | 第17页 |
| ·糖尿病的类型 | 第17-18页 |
| ·糖尿病的流行病学 | 第18-19页 |
| ·糖尿病的并发症 | 第19-22页 |
| ·糖尿病的病因及发病机制 | 第22-25页 |
| ·糖尿病治疗与预防策略 | 第25-28页 |
| ·二肽基肽酶Ⅳ | 第28-36页 |
| ·DPP-IV 的分子结构 | 第29-31页 |
| ·DPP-IV 分布和功能 | 第31-32页 |
| ·DPP-IV 抑制剂的作用机理 | 第32-33页 |
| ·DPP-IV 抑制剂的研究现状 | 第33-36页 |
| ·课题研究思路 | 第36-37页 |
| ·实验设计流程 | 第37-39页 |
| 第二章 DPP-IV 蛋白催化结构域的克隆、表达及分离纯化 | 第39-55页 |
| ·实验用品 | 第39-45页 |
| ·实验用仪器 | 第39-40页 |
| ·主要试剂、溶液 | 第40-42页 |
| ·主要溶液的配制 | 第42-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·△DPP-Ⅳ的引物设计 | 第45页 |
| ·DPP-IV 催化结构域基因片段的扩增 | 第45-46页 |
| ·重组质粒 pKS-△DPP-Ⅳ的克隆 | 第46页 |
| ·重组质粒 pGex-HisC3-△DPP-IV 的克隆 | 第46-48页 |
| ·重组蛋白△DPP-IV 的表达 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白△DPP-IV 的纯化 | 第49-50页 |
| ·实验结果与讨论 | 第50-53页 |
| ·△DPP-IV 目的片段的扩增 | 第50-51页 |
| ·重组质粒 pGEX-HisC3-△DPP-IV 的构建 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白 GST-△DPP-IV 的表达和纯化 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-55页 |
| 第三章 DPP-IV 抑制剂的筛选 | 第55-67页 |
| ·实验用品 | 第57-58页 |
| ·实验用仪器与设备 | 第57页 |
| ·主要试剂、溶液 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·DPP-IV 酶促反应体系及酶活测定体系的建立 | 第58页 |
| ·DPP-IV 抑制率的测定 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第58页 |
| ·抑制率计算方法 | 第58-59页 |
| ·DPP-IV 抑制剂 IC50的测定 | 第59-60页 |
| ·半数抑制浓度(IC50)及计算原理 | 第59页 |
| ·DPP-IV 抑制剂 IC50的测定方法 | 第59页 |
| ·抑制剂抑制类型的确定 | 第59-60页 |
| ·实验结果与讨论 | 第60-65页 |
| ·DPP-IV 酶活性测定 | 第60-61页 |
| ·DPP-IV 的抑制剂筛选 | 第61-62页 |
| ·半数抑制浓度(IC50)的测定 | 第62-63页 |
| ·异槲皮苷对 DPP-IV 抑制类型的确定 | 第63-65页 |
| ·本章小结 | 第65-67页 |
| 第四章 细胞水平上研究异槲皮苷对 GLP-1 分泌的影响 | 第67-77页 |
| ·实验用品 | 第69-71页 |
| ·细胞株 | 第69页 |
| ·实验用仪器 | 第69-70页 |
| ·主要试剂、溶液 | 第70页 |
| ·主要溶液的配制 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-73页 |
| ·细胞培养 | 第71页 |
| ·GLP-1 分泌量的检测 | 第71-73页 |
| ·NCI-H716 细胞生长曲线及 GLP-1 分泌标准曲线绘制 | 第71页 |
| ·GLP-1ELISA 试剂盒标准曲线的绘制 | 第71-72页 |
| ·GLP-1 分泌量的检测 | 第72-73页 |
| ·实验结果与讨论 | 第73-76页 |
| ·NCI-H716 细胞生长曲线及 GLP-1 分泌曲线 | 第73页 |
| ·GLP-1ELISA 试剂盒标准曲线的绘制 | 第73-74页 |
| ·GLP-1 分泌量检测 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 第五章 异槲皮苷对 2 型糖尿病小鼠降血糖效果的研究 | 第77-103页 |
| ·实验用品 | 第78-81页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·实验用仪器 | 第78-79页 |
| ·主要试剂、溶液 | 第79-80页 |
| ·主要溶液的配制 | 第80-81页 |
| ·实验方法 | 第81-87页 |
| ·STZ 糖尿病小鼠模型的建立 | 第81-82页 |
| ·建立糖尿病小鼠模型 | 第81页 |
| ·体重检测 | 第81页 |
| ·血糖检测 | 第81页 |
| ·甘油三酯值和总胆固醇值检测 | 第81-82页 |
| ·异槲皮苷对小鼠体重、血糖浓度的影响 | 第82-83页 |
| ·对小鼠灌胃给药 | 第82页 |
| ·检测体重、血糖变化 | 第82页 |
| ·检测给药后糖耐量(OGTT)的变化 | 第82-83页 |
| ·给药后小鼠血清中 DPP-IV 的活性 | 第83页 |
| ·检测甘油三酯值和总胆固醇值变化 | 第83页 |
| ·GLP-1 和胰岛素分泌量的检测 | 第83页 |
| ·胰岛细胞形态观察 | 第83-87页 |
| ·蜡块的制备 | 第83-85页 |
| ·切片、贴片 | 第85-86页 |
| ·组织切片 HE 染色 | 第86-87页 |
| ·封片剂封存、显微镜照相 | 第87页 |
| ·实验结果 | 第87-100页 |
| ·2 型糖尿病小鼠模型的建立 | 第87-88页 |
| ·异槲皮苷对小鼠体重、血糖浓度的影响 | 第88-92页 |
| ·一般情况 | 第88页 |
| ·异槲皮苷对小鼠体重变化的影响 | 第88-89页 |
| ·异槲皮苷对小鼠血糖浓度变化的影响 | 第89-92页 |
| ·给药小鼠血清对 DPP-IV 的抑制作用 | 第92页 |
| ·异槲皮苷对小鼠甘油三酯和总胆固醇值变化的影响。 | 第92-94页 |
| ·异槲皮苷对小鼠甘油三酯值变化的影响 | 第92-93页 |
| ·异槲皮苷对小鼠胆固醇值变化的影响 | 第93-94页 |
| ·异槲皮苷对小鼠 GLP-1 和胰岛素分泌量的影响 | 第94-98页 |
| ·异槲皮苷对小鼠 GLP-1 分泌量的影响 | 第94-96页 |
| ·异槲皮苷对小鼠胰岛素分泌量的影响 | 第96-98页 |
| ·胰岛组织病理切片形态学观察 | 第98-100页 |
| ·本章小结 | 第100-103页 |
| 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-114页 |
| 攻读博士期间发表的论文科研成果 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |