| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-21页 |
| 符号说明 | 第21-22页 |
| 第一部分 前言 | 第22-46页 |
| ·土壤磷资源现状 | 第22-23页 |
| ·磷对植物生长发育的作用 | 第23页 |
| ·植物低磷响应的生理生化机制 | 第23-28页 |
| ·磷动员和吸收能力的提高 | 第24-26页 |
| ·外泌有机酸和质子 | 第24-25页 |
| ·酸性磷酸酶合成增加 | 第25页 |
| ·磷吸收能力的提高 | 第25-26页 |
| ·植物体内磷分配的改变 | 第26页 |
| ·代谢反应的调整 | 第26-27页 |
| ·根系形态结构的变化 | 第27-28页 |
| ·植物低磷响应的分子机制 | 第28-36页 |
| ·植物磷吸收相关基因及调控 | 第28-29页 |
| ·植物体内磷分配相关基因及调控 | 第29页 |
| ·有机酸和酸性磷酸酶合成和分泌相关基因及调控 | 第29-30页 |
| ·植物根系形态结构的调控 | 第30-31页 |
| ·植物低磷反应的基因表达调控 | 第31-32页 |
| ·植物低磷信号转导机制研究进展 | 第32-36页 |
| ·以PHR1为中心的低磷信号转导途径 | 第32-34页 |
| ·与SPX结构域基因相关的低磷信号转导途径 | 第34-35页 |
| ·低磷信号转导途径与激素等信号途径的关系 | 第35-36页 |
| ·H~+-PPase及相关基因工程的研究进展 | 第36-39页 |
| ·液泡膜H~+-PPase的分子结构与功能 | 第37-39页 |
| ·H~+-PPase的分子结构 | 第37-38页 |
| ·H~+-PPase的主要功能 | 第38-39页 |
| ·H~+-PPase与植物抗逆的研究进展 | 第39页 |
| ·MicroRNA研究进展 | 第39-44页 |
| ·miRNA的生物合成 | 第40-41页 |
| ·miRNA的转录 | 第40页 |
| ·miRNA加工运输 | 第40-41页 |
| ·miRNA进入沉默复合体 | 第41页 |
| ·miRNA的作用方式 | 第41-42页 |
| ·miRNA对靶基因的剪切 | 第41-42页 |
| ·miRNA对靶基因的翻译抑制作用 | 第42页 |
| ·miRNA在植物体中的功能 | 第42-44页 |
| ·miRNA参与花器官发育 | 第42-43页 |
| ·miRNA参与叶片发育 | 第43页 |
| ·miRNA参与植物低磷响应过程 | 第43-44页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第44-46页 |
| 第二部分 转TsVP提高玉米低磷耐受性的研究 | 第46-83页 |
| ·材料与方法 | 第46-56页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·转基因玉米T2代纯合株系的分子生物学检测 | 第46-50页 |
| ·PCR检测 | 第46-47页 |
| ·半定量RT-PCR | 第47-48页 |
| ·Southern杂交检测 | 第48-50页 |
| ·植物材料培养 | 第50-51页 |
| ·TsVP基因表达强度的检测 | 第51页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第51页 |
| ·Real time PCR反应 | 第51页 |
| ·液泡膜H-PPase活性的测定 | 第51-52页 |
| ·液泡膜的分离 | 第51-52页 |
| ·液泡膜H-PPase活性测定 | 第52页 |
| ·植株生物量和磷含量的测定 | 第52页 |
| ·磷吸收动力学参数的测定 | 第52页 |
| ·根系形态参数的测定 | 第52-53页 |
| ·酸性磷酸酶活性测定 | 第53页 |
| ·细胞内酸性磷酸酶活性测定 | 第53页 |
| ·分泌型酸性磷酸酶活性测定 | 第53页 |
| ·根系有机酸分泌速率测定 | 第53-54页 |
| ·玉米根际pH值测定 | 第54页 |
| ·质膜ATPase活性检测 | 第54页 |
| ·可溶性糖测定 | 第54页 |
| ·IAA含量测定 | 第54-55页 |
| ·生长素运输相关基因表达测定 | 第55页 |
| ·土壤培养实验 | 第55-56页 |
| ·光合作用和叶绿素荧光参数测定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-77页 |
| ·转TsVP玉米T2代纯合株系的分子生物学检测 | 第56-57页 |
| ·转基因玉米有较高的液泡膜H-PPase活性 | 第57-58页 |
| ·低磷胁迫对玉米生长的影响 | 第58-59页 |
| ·转基因玉米有较发达的根系系统 | 第59-60页 |
| ·转基因玉米有较高的磷吸收的速率 | 第60-62页 |
| ·转基因玉米积累较多的磷 | 第62-63页 |
| ·转基因玉米有较强的根际酸化能力 | 第63-64页 |
| ·玉米酸性磷酸酶分析 | 第64-65页 |
| ·玉米可溶性糖含量分析 | 第65-66页 |
| ·玉米生长素含量分析 | 第66-67页 |
| ·玉米生长素运输相关基因表达分析 | 第67-68页 |
| ·外源施加IAA和NPA对非转基因玉米和转基因玉米根系的影响 | 第68-69页 |
| ·玉米在低磷土壤中的生长发育状况 | 第69-77页 |
| ·长期低磷胁迫对玉米生长发育的影响 | 第69-73页 |
| ·低磷胁迫对玉米光合作用的影响 | 第73-74页 |
| ·低磷胁迫对玉米雌雄穗发育的影响 | 第74-75页 |
| ·低磷胁迫对玉米广量的影响 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-83页 |
| 第三部分 不同供磷水平下耐低磷玉米自交系99038和来源亲本Qi319microRNA的差异分析 | 第83-116页 |
| ·材料与方法 | 第83-87页 |
| ·植物材料和培养 | 第83页 |
| ·植株生物量、磷含量和根系形态参数的测定 | 第83-84页 |
| ·小RNA文库构建和测序 | 第84页 |
| ·测序数据分析和miRNA鉴定 | 第84-85页 |
| ·靶基因鉴定 | 第85页 |
| ·览定文库间差异表达的miRNA | 第85页 |
| ·通过real-time PCR分析miRNA表达水平 | 第85-87页 |
| ·玉米small RNA提取 | 第85-86页 |
| ·Small RNA 反转录 | 第86页 |
| ·Real time PCR | 第86-87页 |
| ·通过real-time PCR分析靶基因表达水平 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-110页 |
| ·低磷胁迫对Qi319和99038生长的影响 | 第87-89页 |
| ·玉米小RNA高通量测序数据分析 | 第89-90页 |
| ·玉米小RNA长度分布 | 第90-91页 |
| ·玉米小RNA分类 | 第91-93页 |
| ·玉米已知miRNA鉴定 | 第93-94页 |
| ·玉米novel miRNA鉴定 | 第94页 |
| ·玉米miRNA靶基因鉴定 | 第94-96页 |
| ·不同供磷水平下Qi319和99038间差异表达的miRNA | 第96-100页 |
| ·玉米低磷响应miRNA | 第100-104页 |
| ·通过real-time PCR确认miRNA农达水平 | 第104-105页 |
| ·miRNA及其靶基因表达模式分析 | 第105-110页 |
| ·讨论 | 第110-116页 |
| 第四部分 总结和展望 | 第116-119页 |
| 参考文献 | 第119-134页 |
| 附录3-1 本工作中鉴定到的玉米已知miRNA及表达量 | 第134-141页 |
| 附录3-2 本工作中鉴定到的玉米novel miRNA及表达量 | 第141-145页 |
| 附录3-3 玉米novel miRNA候选靶基因 | 第145-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第158-159页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第159页 |
