| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·研究背景 | 第11-21页 |
| ·拟南芥概述 | 第11页 |
| ·减数分裂 | 第11-12页 |
| ·细胞骨架 | 第12-16页 |
| ·微管骨架在减数分裂中的研究 | 第16-19页 |
| ·植物花药及雌、雄配子体的发育 | 第19-20页 |
| ·绿色荧光蛋白在转基因中的应用 | 第20页 |
| ·Kinesin-12 蛋白 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验样品 | 第23页 |
| ·所用载体 | 第23页 |
| ·酶、试剂盒及化学药品 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-39页 |
| ·拟南芥的种植 | 第23页 |
| ·T-DNA 插入突变体的纯合性鉴定 | 第23-24页 |
| ·载体构建 | 第24-30页 |
| ·重组质粒转化 GV3101 农杆菌 | 第30-31页 |
| ·浸花法转化拟南芥 | 第31页 |
| ·筛选和鉴定阳性转基因植株 | 第31-32页 |
| ·TRIzol 法提取植物总 RNA | 第32-33页 |
| ·RNA 反转录形成 cDNA | 第33-34页 |
| ·半定量 RT-PCR 法检测细胞内目的基因在转录水平的表达 | 第34-35页 |
| ·拟南芥野生型和突变体的花粉染色（TTC法） | 第35页 |
| ·扫描电镜观察野生型拟南芥和 kinesin-12 突变体的花药 | 第35-36页 |
| ·野生型和突变体拟南芥小孢子母细胞的 DAPI 染色 | 第36页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察雌配子体的发育 | 第36页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察野生型和突变体拟南芥的成熟花粉粒 | 第36-37页 |
| ·抗体免疫荧光标记野生型及突变体的小孢子母细胞的微管骨架 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-55页 |
| ·拟南芥突变体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·基因克隆及重组质粒载体的构建 | 第40-46页 |
| ·FABD2、GFP 及 Tubulin 的克隆 | 第40-41页 |
| ·Pdmc-GFP 的 PCR 验证及酶切验证 | 第41页 |
| ·pDMC-GFP-FABD2及 pDMC-GFP-tubulin 的 PCR 验证及酶切验证 | 第41-46页 |
| ·阳性转基因植株的鉴定 | 第46-47页 |
| ·DNA 水平鉴定阳性转基因植株 | 第46-47页 |
| ·转录水平鉴定阳性转基因植株 | 第47页 |
| ·kinesin-12 基因影响突变体的表型特征 | 第47-49页 |
| ·kinesin-12基因影响花粉的发育 | 第49-50页 |
| ·kinesin-12基因影响花药的发育 | 第50-51页 |
| ·kinesin-12基因影响小孢子母细胞的减数分裂过程 | 第51-53页 |
| ·kinesin-12基因影响拟南芥雌配子体的发育 | 第53页 |
| ·突变体小孢子母细胞的微管间接免疫荧光标记 | 第53-55页 |
| 4 结论与讨论 | 第55-61页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-61页 |
| ·构建表达载体应考虑的因素 | 第56页 |
| ·被子植物的种子发育 | 第56-57页 |
| ·植物雄性不育以及影响花粉败育的因素 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71页 |
