| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| ·垫状卷柏简介 | 第11页 |
| ·海藻糖 | 第11-17页 |
| ·海藻糖的保护作用 | 第11-13页 |
| ·抗冷冻以及对生物膜系的保护作用 | 第11-12页 |
| ·保护DNA辐射损伤以及稳定蛋白质的作用 | 第12-13页 |
| ·海藻糖的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖在食品与保健品方面中的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖在化妆品方面中的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖在医药方面中的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖在农业方面中的应用 | 第13页 |
| ·海藻糖保护作用的分子机理 | 第13-14页 |
| ·“水替代”假说 | 第14页 |
| ·“玻璃态”假说 | 第14页 |
| ·“优先排阻”假说 | 第14页 |
| ·海藻生物合成途径 | 第14-15页 |
| ·葡萄糖为底物的合成途径 | 第14-15页 |
| ·麦芽糖为底物的合成途径 | 第15页 |
| ·淀粉为底物的合成途径 | 第15页 |
| ·高等植物中海藻糖-6-磷酸合成酶基因的研究进展 | 第15-16页 |
| ·海藻糖合成酶基因在遗传转化方面的研究 | 第16-17页 |
| ·玉米遗传转化 | 第17-19页 |
| ·玉米遗传转化系统 | 第17页 |
| ·玉米遗传转化方法 | 第17-19页 |
| ·电激法 | 第17-18页 |
| ·化学物质介导转化法 | 第18页 |
| ·基因枪法 | 第18页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第18-19页 |
| ·本研究的立体依据以及主要研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-37页 |
| ·垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因SpTPS1及其截短改造基因SpTPS1Δ的克隆 | 第20-22页 |
| ·垫状卷柏的RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RNA反转录cDNA | 第21页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第22页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第22-28页 |
| ·目的片段和表达载体的酶切 | 第22-23页 |
| ·酶切产物的回收与纯化 | 第23-24页 |
| ·目的片段插入表达载体 | 第24-28页 |
| ·连接 | 第24页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第24-25页 |
| ·菌液PCR检测 | 第25-26页 |
| ·质粒提取 | 第26页 |
| ·质粒的酶切检测 | 第26-27页 |
| ·DNA的序列测序鉴定 | 第27-28页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·植物表达载体质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第29页 |
| ·农杆菌菌液PCR鉴定 | 第29页 |
| ·农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 | 第29-34页 |
| ·培养基的制备 | 第29-32页 |
| ·玉米愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| ·农杆菌侵染愈伤组织 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织的恢复培养 | 第33页 |
| ·愈伤组织的筛选培养 | 第33页 |
| ·抗性愈伤组织的分化以及生根壮苗 | 第33页 |
| ·再生植株移栽大田 | 第33-34页 |
| ·再生植株的后代繁殖 | 第34页 |
| ·再生植株的分子检测 | 第34-37页 |
| ·再生植株基因组DNA的提取 | 第34页 |
| ·目的基因片段的PCR检测 | 第34-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-47页 |
| ·植物表达载体 | 第37-41页 |
| ·含SpTPS1基因片段的表达载体 | 第37页 |
| ·含SpTPS1Δ基因片段的表达载体 | 第37页 |
| ·表达载体的质粒酶切图谱 | 第37-41页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第41页 |
| ·玉米转基因植株 | 第41-43页 |
| ·玉米胚性愈伤组织 | 第41-42页 |
| ·愈伤组织分化的再生植株 | 第42-43页 |
| ·再生植株及后代生长情况 | 第43页 |
| ·再生植株的pcr检测结果 | 第43-45页 |
| ·目的基因以及筛选标记基因的PCR检测结果 | 第43-45页 |
| ·转基因植株后代的分子检测结果 | 第45-47页 |
| ·转基因植株后代T_1代的PCR扩增检测结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·再生植株的PCR扩增检测 | 第47页 |
| ·玉米中海藻糖的积累 | 第47-48页 |
| ·过量表达外源基因对植株生长的影响 | 第48页 |
| ·后续实验 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54页 |