基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的建立
| 缩略词表 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1. 选题背景 | 第9页 |
| 2. 鸭瘟诊断方法研究进展 | 第9-17页 |
| ·病毒的分离和鉴定 | 第10页 |
| ·血清学方法 | 第10-13页 |
| ·血清中和试验(SN) | 第10-11页 |
| ·琼脂糖凝胶沉淀试验(AGP) | 第11页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第11-12页 |
| ·微量固相放射免疫试验(Micro-SPRIA) | 第12页 |
| ·反向间接血凝试验(RPHA) | 第12页 |
| ·免疫荧光 | 第12-13页 |
| ·免疫组化 | 第13页 |
| ·分子生物学方法 | 第13-15页 |
| ·核酸探针 | 第13页 |
| ·PCR检测 | 第13-14页 |
| ·环介导等温扩增技术(LAMP) | 第14-15页 |
| ·原位PCR | 第15页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第15-17页 |
| 3. 选题意义 | 第17-19页 |
| 第二章 基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的建立 | 第19-35页 |
| 1. 材料 | 第19-20页 |
| ·病毒、菌体及载体 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验主要试剂 | 第19页 |
| ·实验试剂的配置 | 第19-20页 |
| 2. 实验方法 | 第20-27页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR方法的设计 | 第20-22页 |
| ·引物的合理性验证 | 第22页 |
| ·标准阳性质粒的制备 | 第22-25页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·标准品模板的制备 | 第23页 |
| ·PCR产物的回收 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第24-25页 |
| ·标准品阳性质粒拷贝数的测定 | 第25页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR方法的建立 | 第25-27页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR反应条件的优化 | 第25-26页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第26页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的敏感性试验 | 第26页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的重复性试验 | 第26-27页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的特异性试验 | 第27页 |
| 3 试验结果 | 第27-34页 |
| ·测序结果 | 第27-28页 |
| ·引物的合理性验证 | 第28页 |
| ·构建标准品阳性质粒 | 第28-29页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR反应条件的优化 | 第29-30页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第30-32页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的敏感性试验 | 第32页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的重复性试验 | 第32-33页 |
| ·基于鸭瘟TK基因的荧光定量PCR的特异性试验 | 第33-34页 |
| 4. 讨论 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 致谢 | 第39页 |