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灵芝子实体多糖的分离纯化、硫酸化及生物活性研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
第一章 引言第16-24页
 1 灵芝多糖的提取、分离纯化、纯度鉴定及结构解析第16-18页
   ·灵芝多糖的提取第16-17页
   ·灵芝多糖的分离纯化第17页
   ·多糖的纯度鉴定第17页
   ·多糖的结构分析第17-18页
 2 多糖的药理活性第18-20页
   ·抗肿瘤第18页
   ·免疫调节第18-19页
   ·降血脂降糖作用第19页
   ·抗氧化、抗衰老作用第19页
   ·其它作用第19-20页
 3 多糖的结构修饰第20-23页
   ·硫酸化修饰第20-21页
     ·硫酸化方法第20页
     ·取代度的检测方法第20页
     ·硫酸化多糖的活性第20-21页
   ·乙酰化修饰第21页
   ·羧甲基化修饰第21-22页
   ·烷基化修饰第22页
   ·磷酸化修饰第22页
   ·其它化学修饰方法第22-23页
 4 本课题研究的目的意义及主要内容第23-24页
   ·目的意义第23页
   ·主要研究内容第23-24页
第二章 灵芝子实体多糖的分离纯化第24-50页
 第一节 灵芝子实体多糖的分离纯化第24-44页
  1 材料和方法第24-32页
   ·材料第24-25页
     ·材料来源第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25页
   ·实验方法第25-32页
     ·灵芝子实体多糖组份的制备和分离纯化第25-28页
     ·多糖含量的测定第28-30页
     ·蛋白质含量测定第30-31页
     ·多糖组份的脱色第31-32页
     ·多糖的纯度鉴定和分子量测定第32页
  2 结果与分析第32-44页
   ·灵芝子实体多糖组份的制备和分离纯化第32-42页
     ·不同分子量段的多糖组份的制备第32页
     ·碱提多糖组份的制备第32-33页
     ·离子交换层析第33-35页
     ·多糖组份的大孔树脂脱色第35-38页
     ·LZ5-W的ConA亲和层析第38-40页
     ·凝胶层析第40-42页
   ·样品纯度鉴定和分子量测定第42-44页
   ·理化性质分析第44页
 第二节 灵芝子实体多糖组份化学性质的初步研究第44-49页
  1 材料与方法第44-46页
   ·材料第44-45页
     ·实验材料第44页
     ·主要试剂和仪器第44-45页
   ·方法第45-46页
     ·紫外扫描第45页
     ·单糖组成分析第45-46页
  2 结果与分析第46-49页
   ·样品的紫外扫描第46页
   ·单糖组成分析第46-49页
 第三节 本章小结第49-50页
第三章 灵芝子实体多糖的分子修饰第50-64页
 第一节 灵芝子实体多糖的硫酸化第50-63页
  1 材料与方法第51-54页
   ·材料第51页
     ·样品第51页
     ·试剂第51页
     ·仪器第51页
   ·方法第51-54页
     ·硫酸酯多糖的制备第51页
     ·硫酸酯多糖肽纯度及相对分子量测定第51-52页
     ·硫酸基含量的测定第52-53页
     ·取代度(D.S)计算第53页
     ·硫酸化条件的单因素试验第53页
     ·正交试验第53-54页
  2 结果与分析第54-63页
   ·硫酸脂多糖的得率及取代度第54-55页
     ·硫酸基含量的标准曲线第54页
     ·硫酸酯化多糖肽的分子量第54-55页
   ·单因素试验结果第55-57页
     ·温度对取代度和得率的影响第55-56页
     ·酯化试剂比例对取代度和得率的影响第56-57页
     ·反应时间对取代度和得率的影响第57页
   ·正交试验第57-62页
   ·不同取代度的LZ5-S,A3的硫酸化样品的制备第62页
   ·样品筛选第62-63页
 第二节 本章小结第63-64页
第四章 灵芝子实体多糖及其衍生物的生物活性研究第64-84页
 第一节 灵芝子实体多糖及其硫酸化产物体外免疫活性研究第64-71页
  1 试剂和材料第64-65页
   ·供试细胞第64页
   ·试剂第64-65页
   ·供试样品第65页
   ·仪器第65页
  2 实验方法第65-67页
   ·样品的配制第65页
   ·小鼠RAW264.7巨噬细胞株的培养第65页
   ·巨噬细胞产NO的测定第65-66页
   ·小鼠脾淋巴细胞的制备第66页
   ·小鼠脾淋巴细胞增殖率的测定第66-67页
  3 结果与分析第67-71页
   ·体外刺激RAW264.7巨噬细胞株生成NO试验第67-69页
     ·不同分子量段的灵芝多糖组分及其硫酸化样品刺激巨噬细胞生成NO作用第67页
     ·离子柱层各组分及其硫酸化后样品刺激巨噬细胞生成NO作用第67-68页
     ·灵芝碱提多糖及其硫酸化产物刺激巨噬细胞产生NO的作用第68-69页
   ·体外刺激淋巴细胞增殖的作用第69-71页
     ·组份G1及其硫酸化产物对小鼠脾淋巴细胞的刺激作用第69页
     ·组份G2及其硫酸化产物对小鼠脾淋巴细胞的刺激作用第69-70页
     ·组份G3-2及其硫酸化产物对小鼠脾淋巴细胞的刺激作用第70-71页
     ·组份LZ5-S和A3及其硫酸化产物对小鼠脾淋巴细胞的刺激作用第71页
 第二节 灵芝子实体多糖及其硫酸化产物抗凝血活性研究第71-75页
  1 材料和方法第72-73页
   ·试剂及实验动物第72页
   ·供试样品第72页
   ·主要仪器第72页
   ·动物取血第72页
   ·抗凝血检测第72-73页
  2 结果与分析第73-75页
   ·各样品及其硫酸化产物的抗凝血作用第73-74页
     ·样品对APTT的影响第73-74页
     ·样品对PT的影响第74页
   ·不同取代度的硫酸化产物的抗凝血作用第74-75页
 第三节 多糖及其硫酸化产物的抗肿瘤活性研究第75-78页
  1 试剂和材料第75-76页
   ·试剂第75-76页
   ·材料第76页
  2 方法第76页
   ·样品的配制第76页
   ·K562细胞的培养第76页
   ·MTT法测定第76页
  3 结果与分析第76-78页
 第四节 灵芝多糖及其硫酸化产物的抗菌活性研究第78-81页
  1 材料和试剂第78-79页
   ·试剂及菌株第78页
   ·供试样品第78-79页
   ·主要仪器第79页
  2 实验方法第79页
   ·培养基制备第79页
   ·滤纸片的制备第79页
   ·菌株的传代第79页
   ·细菌计数第79页
   ·药敏试验第79页
  3 结果与分析第79-81页
 第五节 本章小结第81-84页
全文讨论第84-86页
全文总结第86-90页
参考文献第90-96页
本论文创新点第96-98页
本论文不足与展望第98-100页
附录第100-108页
致谢第108页

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