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毛竹生长素相关基因的克隆及辐射对其表达的影响

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-16页
   ·研究背景第11页
   ·生长素第11-14页
     ·生长素信号转导第11-12页
     ·生长素结合蛋白第12页
     ·生长素早期应答基因第12-13页
     ·生长素反应因子第13-14页
   ·毛竹辐射育种第14-15页
   ·本研究的目的和意义第15-16页
2 材料与方法第16-31页
   ·实验材料第16-18页
     ·植物材料第16页
     ·菌株和载体第16页
     ·主要试剂第16-17页
     ·使用软件及网站第17页
     ·主使用仪器第17-18页
     ·引物第18页
   ·实验方法第18-31页
     ·毛竹总RNA的提取第18-19页
     ·毛竹cDNA第一链的合成第19页
     ·RACE第一链cDNA的合成第19-20页
     ·PCR反应体系和琼脂糖凝胶电泳第20-21页
     ·PCR产物的回收纯化第21-22页
     ·目的片段与克隆载体的连接第22页
     ·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第22页
     ·重组质粒的菌液PCR鉴定第22-23页
     ·质粒DNA的小量提取和纯化第23-24页
     ·重组质粒的酶切鉴定及测序分析第24页
     ·植物表达载体构建第24-25页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的制备第25页
     ·重组质粒转化根癌农杆菌感受态细胞(电击法)第25-26页
     ·农杆菌菌液PCR鉴定第26页
     ·拟南芥的培养第26页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第26-27页
     ·拟南芥转化种子的筛选第27页
     ·转基因拟南芥植株基因组DNA的检测第27-28页
     ·毛竹种子的辐射处理第28页
     ·实时荧光定量PCR样品cDNA的合成第28-29页
     ·实时荧光定量PCR进行表达分析第29-31页
3 结果与分析第31-52页
   ·PheABP1基因的克隆及表达分析第31-37页
     ·PheABP1基因片段的克隆第31-32页
     ·PheABP1全长基因的克隆第32页
     ·PheABP1基因的序列分析第32-34页
     ·毛竹生长素结合蛋白基因PheABP1编码蛋白结构特征分析第34-36页
     ·PheABP1基因植物表达载体构建第36-37页
     ·PheABP1基因转化拟南芥及抗性筛选第37页
   ·PheARF1基因的克隆及表达分析第37-39页
     ·PheARF1基因片段的克隆第37-38页
     ·PheARF1全长基因的克隆第38页
     ·PheARF1基因的序列分析第38-39页
   ·毛竹种子的辐射处理情况第39-44页
     ·毛竹总RNA的提取与反转录第40-41页
     ·实时荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线分析第41-44页
   ·基因表达情况分析第44-52页
     ·PheABP1基因的表达情况第44-48页
     ·PheARF1基因的表达情况第48-52页
4 讨论第52-54页
   ·PheABP1基因的讨论第52页
   ·PheARF1基因的讨论第52-53页
   ·辐射对基因表达的影响第53-54页
5 结论第54-56页
参考文献第56-63页
附图第63-65页
研究生在读期间发表文章第65-66页
致谢第66页

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