缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-19页 |
第一章 多肽 Pep5 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第19-29页 |
1 材料与仪器 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第19页 |
·细胞系 | 第19页 |
·免疫抗原 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-24页 |
·动物免疫 | 第20-21页 |
·细胞融合 | 第21-22页 |
·制备小鼠骨髓瘤细胞悬液 | 第21页 |
·制备饲养细胞层 | 第21页 |
·制备脾细胞 | 第21页 |
·细胞融合 | 第21-22页 |
·杂交瘤细胞上清抗体检测 | 第22-23页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第23页 |
·杂交瘤细胞的冷冻保存与复苏 | 第23-24页 |
·杂交瘤细胞的冻存 | 第23页 |
·杂交瘤细胞的复苏 | 第23-24页 |
3 结果与讨论 | 第24-28页 |
·小鼠尾血检测 | 第24页 |
·细胞融合率 | 第24-25页 |
·阳性杂交瘤细胞的初筛和复筛 | 第25-26页 |
·杂交瘤细胞株亚型鉴定 | 第26页 |
·上清单克隆细胞的传代 | 第26-27页 |
·上清单克隆抗体细胞株的冻存 | 第27页 |
·上清单克隆抗体细胞株的复苏与灵敏度检测 | 第27-28页 |
4 本章小结 | 第28-29页 |
第二章 Pep5 腹水抗体制备、纯化及酶标 | 第29-38页 |
1 材料与仪器 | 第29-30页 |
·实验动物 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·腹水抗体纯化所需主要试剂及配制 | 第30页 |
2 实验方法 | 第30-33页 |
·小鼠腹水抗体制备 | 第30-31页 |
·腹水抗体的纯化 | 第31页 |
·腹水抗体及纯化抗体鉴定 | 第31-32页 |
·滴度测定 | 第31-32页 |
·SDS-PAGE | 第32页 |
·单抗的辣根过氧化物酶标记 | 第32-33页 |
·酶标抗体效价测定 | 第33页 |
3 结果与讨论 | 第33-37页 |
·腹水抗体及纯化抗体滴度测定 | 第33-35页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第35-36页 |
·酶标抗体鉴定 | 第36-37页 |
4 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 多肽 ELISA 方法建立及优化 | 第38-53页 |
1 材料与仪器 | 第38-39页 |
·主要材料 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
2 实验方法 | 第39-40页 |
·直接 ELISA 法 | 第39页 |
·双抗体夹心 ELISA 法 | 第39-40页 |
·竞争 ELISA 法 | 第40页 |
3 结果与讨论 | 第40-52页 |
·直接 ELISA 法 | 第40-45页 |
·直接 ELISA 法的建立 | 第40-41页 |
·方法优化 | 第41-45页 |
·双抗体夹心法 | 第45-47页 |
·方法的建立 | 第45-46页 |
·方法的优化 | 第46-47页 |
·竞争法 | 第47-50页 |
·方法的建立 | 第47-48页 |
·方法的优化 | 第48-50页 |
·三种 ELSIA 方法比较 | 第50-52页 |
4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 直接 ELISA 方法评价与初步应用 | 第53-61页 |
1 材料与仪器 | 第53-54页 |
·主要材料 | 第53页 |
·血清样本 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53-54页 |
2 实验方法 | 第54-55页 |
·直接 ELISA 法 | 第54页 |
·临床血清的检测 | 第54页 |
·数据统计分析 | 第54页 |
·ROC 曲线的绘制 | 第54-55页 |
3 结果与讨论 | 第55-60页 |
·直接 ELISA 方法评价 | 第55-57页 |
·标准曲线 | 第55-56页 |
·检测限与精密性 | 第56页 |
·回收率 | 第56-57页 |
·临床血清的检测 | 第57-58页 |
·敏感性及特异性 | 第58-59页 |
·HCC 患者血清中 Pep5 与 AFP 的关系 | 第59-60页 |
4 本章小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
综述 | 第65-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |
附录 | 第72-77页 |
个人简介 | 第77-78页 |
攻读硕士学位期间发表论文与研究成果 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |