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多肽ELISA方法建立及其在肝癌早期诊断相关研究中的初步应用

缩略词表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
前言第12-19页
第一章 多肽 Pep5 单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立第19-29页
 1 材料与仪器第19-20页
   ·实验动物第19页
   ·细胞系第19页
   ·免疫抗原第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·主要仪器第20页
 2 实验方法第20-24页
   ·动物免疫第20-21页
   ·细胞融合第21-22页
     ·制备小鼠骨髓瘤细胞悬液第21页
     ·制备饲养细胞层第21页
     ·制备脾细胞第21页
     ·细胞融合第21-22页
   ·杂交瘤细胞上清抗体检测第22-23页
   ·阳性杂交瘤细胞的克隆第23页
   ·杂交瘤细胞的冷冻保存与复苏第23-24页
     ·杂交瘤细胞的冻存第23页
     ·杂交瘤细胞的复苏第23-24页
 3 结果与讨论第24-28页
   ·小鼠尾血检测第24页
   ·细胞融合率第24-25页
   ·阳性杂交瘤细胞的初筛和复筛第25-26页
   ·杂交瘤细胞株亚型鉴定第26页
   ·上清单克隆细胞的传代第26-27页
   ·上清单克隆抗体细胞株的冻存第27页
   ·上清单克隆抗体细胞株的复苏与灵敏度检测第27-28页
 4 本章小结第28-29页
第二章 Pep5 腹水抗体制备、纯化及酶标第29-38页
 1 材料与仪器第29-30页
   ·实验动物第29页
   ·主要试剂第29-30页
   ·主要仪器第30页
   ·腹水抗体纯化所需主要试剂及配制第30页
 2 实验方法第30-33页
   ·小鼠腹水抗体制备第30-31页
   ·腹水抗体的纯化第31页
   ·腹水抗体及纯化抗体鉴定第31-32页
     ·滴度测定第31-32页
     ·SDS-PAGE第32页
   ·单抗的辣根过氧化物酶标记第32-33页
   ·酶标抗体效价测定第33页
 3 结果与讨论第33-37页
   ·腹水抗体及纯化抗体滴度测定第33-35页
   ·单克隆抗体的纯化第35-36页
   ·酶标抗体鉴定第36-37页
 4 本章小结第37-38页
第三章 多肽 ELISA 方法建立及优化第38-53页
 1 材料与仪器第38-39页
   ·主要材料第38页
   ·主要仪器第38-39页
 2 实验方法第39-40页
   ·直接 ELISA 法第39页
   ·双抗体夹心 ELISA 法第39-40页
   ·竞争 ELISA 法第40页
 3 结果与讨论第40-52页
   ·直接 ELISA 法第40-45页
     ·直接 ELISA 法的建立第40-41页
     ·方法优化第41-45页
   ·双抗体夹心法第45-47页
     ·方法的建立第45-46页
     ·方法的优化第46-47页
   ·竞争法第47-50页
     ·方法的建立第47-48页
     ·方法的优化第48-50页
   ·三种 ELSIA 方法比较第50-52页
 4 本章小结第52-53页
第四章 直接 ELISA 方法评价与初步应用第53-61页
 1 材料与仪器第53-54页
   ·主要材料第53页
   ·血清样本第53页
   ·主要仪器第53-54页
 2 实验方法第54-55页
   ·直接 ELISA 法第54页
   ·临床血清的检测第54页
   ·数据统计分析第54页
   ·ROC 曲线的绘制第54-55页
 3 结果与讨论第55-60页
   ·直接 ELISA 方法评价第55-57页
     ·标准曲线第55-56页
     ·检测限与精密性第56页
     ·回收率第56-57页
   ·临床血清的检测第57-58页
   ·敏感性及特异性第58-59页
   ·HCC 患者血清中 Pep5 与 AFP 的关系第59-60页
 4 本章小结第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-65页
综述第65-72页
 参考文献第69-72页
附录第72-77页
个人简介第77-78页
攻读硕士学位期间发表论文与研究成果第78-80页
致谢第80页

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