中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
前言 | 第8-13页 |
第一部分 SHBs基因稳定转染HepG2细胞系的建立 | 第13-28页 |
一. 材料 | 第13-15页 |
1. 仪器 | 第13-14页 |
2. 细胞与菌种、质粒 | 第14页 |
3. 主要试剂 | 第14-15页 |
二. 方法 | 第15-23页 |
1. SHBs基因片段获得 | 第15-16页 |
2. 构建真核表达质粒pcDNA3.1-SHBs | 第16-19页 |
3. 重组质粒pcDNA3. 1-SHBs稳定转染HepG2细胞 | 第19-23页 |
三. 结果 | 第23-26页 |
1. SHBs基因PCR扩增产物鉴定 | 第23-24页 |
2. 目的质粒pcDNA3.1-SHBs鉴定结果 | 第24页 |
3. HepG2细胞6418最佳筛选浓度确定试验 | 第24页 |
4. 重组HepG2细胞系中SHBs基因mRNA检测 | 第24-25页 |
5. ELISA方法检测SHBs蛋白 | 第25页 |
6. 稳定转染细胞株SHBs蛋白分泌周期测定 | 第25-26页 |
四. 讨论 | 第26-28页 |
第二部分 SHBs对肝细胞及其脂质代谢基因的影响研究 | 第28-40页 |
一. 材料 | 第28-29页 |
1. 器材 | 第28-29页 |
2. 细胞与主要试剂 | 第29页 |
二.方法 | 第29-34页 |
1. 细胞的处理 | 第29页 |
2. 稳定转染细胞转氨酶及脂质水平检测 | 第29-30页 |
3. 实时定量PCR检测肝细胞内相关基因mRNA水平表达差异 | 第30-32页 |
4. Western blot方法检测细胞中蛋白水平 | 第32-34页 |
三.结果 | 第34-36页 |
1. 稳定转染细胞转氨酶及脂质水平检测结果 | 第34-35页 |
2. 实时定量PCR结果 | 第35-36页 |
3. Western blot结果 | 第36页 |
四.讨论 | 第36-40页 |
小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
英文缩略词 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
综述 | 第51-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |