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小麦Pm21抗白粉病的差异蛋白质组学

缩略词表第1-9页
摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-38页
   ·植物蛋白质组学研究进展第13-16页
     ·植物蛋白质组学在遗传研究中的应用第13-14页
     ·植物蛋白质组学在发育生物学中应用第14-15页
     ·植物蛋白质组学在非生物胁迫中的应用第15页
     ·植物蛋白质组学在生物胁迫中的应用第15-16页
       ·真菌与植物互作第15-16页
       ·病毒与植物互作第16页
   ·蛋白质组学研究技术第16-28页
     ·样品制备第16-18页
       ·蛋白分离提取第17页
       ·亲水蛋白与膜结合疏水蛋白的提取第17页
       ·细胞器蛋白的提取第17-18页
     ·蛋白质分离技术第18-21页
       ·双向电泳(two-dimensional-electrophoresis,2-DE)第18-21页
       ·液相色谱层析第21页
       ·亲和层析第21页
     ·蛋白质分析鉴定技术第21-24页
       ·Edman 氨基酸测序技术第21-22页
       ·质谱技术第22-24页
     ·蛋白质差异定量分析第24-27页
       ·基于胶的差异分析技术第24-25页
       ·多维液相色谱技术(Multidimensional liquid chromatography)第25-26页
       ·稳定同位素特征标签生物质谱(SIAMS)第26页
       ·iTRAQ第26页
       ·蛋白质芯片第26-27页
     ·生物信息学在蛋白质组学中应用第27-28页
     ·蛋白质互作研究技术第28页
   ·抗小麦白粉病的研究进展第28-35页
     ·抗小麦白粉病基因鉴定进展第29-34页
     ·抗小麦白粉病的基因利用进展第34页
     ·植物抗病的分子机理进展第34-35页
     ·病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)研究进展第35页
   ·本研究的目的意义及研究内容第35-38页
     ·研究目的和意义第35-36页
     ·研究内容第36-37页
     ·技术路线第37-38页
2 材料与方法第38-51页
   ·实验材料第38-39页
     ·植物材料第38页
     ·病菌材料第38页
     ·菌株和表达载体第38页
     ·引物第38-39页
     ·酶、主要试剂及试剂盒第39页
   ·实验方法第39-51页
     ·Pm21 材料的鉴定筛选第39-40页
       ·小麦总 DNA 的提取第39页
       ·PCR 扩增产物第39-40页
     ·Pm21 材料的显微水平观察第40页
       ·显微观察第40页
       ·电子显微镜观察第40页
     ·蛋白质提取第40-43页
       ·叶片全蛋白的提取第40-41页
       ·叶片膜蛋白提取第41-42页
       ·蛋白质定量分析第42-43页
     ·电泳步骤第43-49页
       ·SDS-PAGE 垂直胶电泳第43-44页
       ·双向电泳步骤第44-47页
       ·凝胶图谱分析第47-48页
       ·质谱鉴定第48页
       ·数据库搜索和蛋白鉴定第48-49页
     ·TaPRP 基因的烟草转化第49-51页
       ·cDNA 的克隆第49页
       ·植物表达载体的构建第49页
       ·烟草的遗传转化第49-50页
       ·转基因烟草的鉴定第50页
       ·转基因烟草的耐寒性分析第50-51页
3 结果与分析第51-71页
   ·小麦白粉病的抗性鉴定结果第51-52页
     ·大田表现性状第51页
     ·分子标记鉴定第51-52页
   ·显微和超显微差异第52-56页
   ·2-D 图凝胶电泳鉴定第56-66页
     ·蛋白提取和定量第56页
     ·蛋白凝胶电泳结果第56-66页
   ·富脯氨酸蛋白基因的烟草转化的抗性鉴定第66-71页
     ·TaPRP 基因扩增及序列分析第66-68页
     ·载体构建第68-69页
     ·转基因烟草植株的鉴定第69-70页
     ·转基因烟草的耐寒性实验第70-71页
4.讨论第71-79页
   ·抗病材料分子鉴定第71-72页
   ·显微和超微结构观察第72-73页
   ·抗病材料的差异蛋白质的表达功能分析第73-77页
     ·接种白粉菌 96h 后差异蛋白质的表达功能分析第73-75页
     ·接种白粉菌 6h 后差异蛋白质的表达功能分析第75-76页
     ·接种白粉菌 4h 后差异亲水蛋白质的表达功能分析第76-77页
     ·接种白粉菌 4h 后差异膜蛋白质的表达功能分析第77页
   ·TaPRP 基因的克隆第77-79页
     ·TaPRP 基因的克隆分析第77-78页
     ·耐寒性分析第78-79页
5 结论第79-80页
6 论文创新点及今后开展的工作第80-81页
参考文献第81-88页
致谢第88-89页
攻读学位期间发论文表情况第89页

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