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毛白杨TIR-NBS类抗病相关PtDrl02基因启动子的结构与功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
本文缩略词(Abbreviation)第11-16页
引言第16-18页
1 文献综述第18-36页
   ·植物启动子研究进展第18-32页
     ·植物启动子基本结构特征第18-19页
     ·植物启动子研究策略第19-26页
     ·植物启动子的类型及其作用机制第26-32页
       ·组成型启动子第26-27页
       ·诱导型启动子第27-30页
       ·组织特异型启动子第30-31页
       ·双向启动子和人工启动子第31-32页
   ·杨树TIR-NBS类抗病相关基因及其启动子研究概况第32-34页
     ·杨树TIR-NBS类抗病相关基因第32-34页
     ·杨树TIR-NBS类抗病相关基因的表达调控及其启动子研究第34页
   ·立题依据与技术路线第34-36页
2 毛白杨PtDrl02基因的表达特性及其启动子区的克隆与分析第36-52页
   ·材料与方法第36-41页
     ·材料与试剂第36-37页
       ·植物材料第36-37页
       ·质粒与菌株第37页
       ·酶和生化试剂第37页
       ·主要仪器设备第37页
     ·实验方法第37-41页
       ·材料处理第37页
       ·总RNA的提取及第一链cDNA的合成第37-38页
       ·PtDrl02基因的半定量RT-PCR分析第38页
       ·PtDrl02基因的实时荧光定量qRT-PCR分析第38-39页
       ·总DNA的提取与启动子的克隆及序列测定第39-41页
       ·核酸及蛋白序列的生物信息学分析第41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·毛白杨PtDrl02基因的组织表达特性第45-46页
     ·毛白杨PtDrl02基因病原相关诱导表达特性第46-47页
     ·毛白杨PtDrl02基因启动子的克隆第47-48页
     ·毛白杨PtDrl02基因启动子的序列分析第48-50页
   ·讨论第50-52页
3 毛白杨PtDrl02启动子的结构分析与功能鉴定第52-72页
   ·材料与方法第52-59页
     ·材料与试剂第52-53页
       ·植物材料第52页
       ·质粒与菌株第52-53页
       ·酶和生化试剂第53页
       ·主要仪器设备第53页
     ·实验方法第53-59页
       ·启动子全长与5′缺失序列的PCR扩增第53-54页
       ·启动子全长与5′缺失序列植物表达载体的构建第54-55页
       ·PtDrl02启动子双向表达植物载体的构建第55-56页
       ·植物表达载体向农杆菌的转化第56页
       ·烟草遗传转化及转基因植株的筛选与鉴定第56-57页
       ·启动子双向表达载体的瞬时表达第57页
       ·材料处理第57页
       ·GUS组织化学染色第57-58页
       ·GUS蛋白活性分析第58页
       ·GUS与GFP报告基因的mRNA表达分析第58页
       ·启动子与PtWRKY1转录因子基因的共转化及瞬时表达分析第58-59页
   ·结果与分析第59-68页
     ·PtDrl02启动子全长及其5′缺失序列植物表达载体的构建第59-61页
     ·转基因烟草植株的获得第61页
     ·PtDrl02启动子的组织表达特性第61-63页
     ·PtDrl02启动子基本上游调控元件的鉴定第63页
     ·PtDrl02启动子逆境诱导响应功能域的鉴定第63-65页
     ·PtDrl02启动子上游调控元件的方向性分析第65-68页
     ·毛白杨PtWRKY1转录因子对PtDrl02启动子活性的调控第68页
   ·讨论第68-72页
4 5′非编码区序列对PtDrl02启动子功能活性的影响第72-84页
   ·材料与方法第72-74页
     ·材料与试剂第72-73页
       ·植物材料第72页
       ·质粒与菌株第72页
       ·酶和生化试剂第72-73页
       ·主要仪器设备第73页
     ·实验方法第73-74页
       ·核酸及蛋白序列的生物信息学分析第73页
       ·启动子-5′UTR序列融合表达植物载体的构建第73页
       ·植物表达载体向农杆菌的转化第73-74页
       ·植物表达载体的瞬时活性分析第74页
       ·烟草遗传转化及转基因植株的筛选与鉴定第74页
       ·材料处理第74页
       ·GUS组织化学染色第74页
       ·GUS蛋白活性分析第74页
       ·GUS报告基因的mRNA表达分析第74页
   ·结果与分析第74-81页
     ·PtDrl02基因5′非编码区序列的生物信息学分析第74-76页
     ·植物表达载体的构建第76页
     ·P-985/UTR/GUS植物表达载体的瞬时表达分析第76-77页
     ·启动子-5′UTR转基因烟草GUS表达分析第77-80页
     ·PtDrl025′UTR序列对PtDrl02启动子诱导表达活性的影响第80-81页
   ·讨论第81-84页
5 PtDrl02启动子在转基因毛白杨中的表达特性第84-96页
   ·材料与方法第84-86页
     ·材料与试剂第84-85页
       ·植物材料第84-85页
       ·质粒与菌株第85页
       ·酶和生化试剂第85页
       ·主要仪器设备第85页
     ·实验方法第85-86页
       ·杨树遗传转化及转基因植株的筛选与鉴定第85页
       ·材料处理第85-86页
       ·GUS组织化学染色第86页
       ·半定量RT-PCR分析与实时荧光定量qRT-PCR分析第86页
   ·结果与分析第86-89页
     ·转PtDrl02启动子毛白杨的获得及其分子鉴定第86-88页
     ·PtDrl02启动子在转基因毛白杨中的组织表达特性第88-89页
     ·PtDrl02启动子在转基因毛白杨中的诱导表达特性第89页
   ·讨论第89-96页
6 结论与展望第96-100页
   ·结论第96-98页
   ·展望第98-100页
参考文献第100-120页
个人简介第120-122页
导师简介第122-124页
硕博期间发表的论文与登录的基因第124-126页
致谢第126页

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