| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一篇:论文综述部分(乙醇脱氢酶的研究进展) | 第8-29页 |
| 前言 | 第9页 |
| 1 ADH的分类、命名及其多态性 | 第9-10页 |
| 2 ADH的种族区域性 | 第10-11页 |
| 3 ADH的组织特异性和时间特异性 | 第11-12页 |
| 4 参与乙醇代谢的途径 | 第12-15页 |
| ·酒精的初级代谢 | 第12-13页 |
| ·ADH和ALDH途径 | 第13-14页 |
| ·微粒体乙醇氧化系统 | 第14-15页 |
| ·过氧化氢酶 | 第15页 |
| 5 ADH的动力学特征 | 第15-17页 |
| ·动力学参数 | 第15-16页 |
| ·底物及其抑制剂 | 第16页 |
| ·乙醇的药物动力学模型 | 第16-17页 |
| 6 ADH的结构 | 第17-20页 |
| 7 功能 | 第20-22页 |
| 8 ADH基因的表达调控 | 第22页 |
| 9 酒精代谢相关疾病 | 第22-24页 |
| ·乙醇与酒精性疾病 | 第23页 |
| ·NADH与酒精性疾病 | 第23-24页 |
| ·乙醛与酒精性疾病 | 第24页 |
| ·氧自由基与酒精性疾病 | 第24页 |
| ·ADH多态性与酒精性疾病 | 第24页 |
| 10 结束语 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-29页 |
| 第二篇:论文实验部分(乙醇脱氢酶基因的克隆表达及生物活性分析) | 第29-63页 |
| 前言 | 第30-32页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第32-36页 |
| ·RNA来源 | 第32页 |
| ·菌种 | 第32页 |
| ·质粒 | 第32页 |
| ·酶 | 第32页 |
| ·试剂盒 | 第32页 |
| ·缓冲液及其它溶液 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·各种电泳胶的配制 | 第34-35页 |
| ·其它主要试剂和商品来源 | 第35-36页 |
| ·主要仪器及设备 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-45页 |
| ·ADH1B2基因的获得 | 第36-37页 |
| ·克隆质粒pUCm-ADH1B2的构建及鉴定 | 第37-40页 |
| ·表达质粒pProEX-ADH1B2的构建及鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第42页 |
| ·包涵体的提取和纯化 | 第42-43页 |
| ·蛋白复性及活性检测 | 第43-45页 |
| 3 实验结果和分析 | 第45-56页 |
| ·人肝脏总RNA的质量分析 | 第45页 |
| ·RF-PCT扩增结果 | 第45-46页 |
| ·克隆质粒pUCm-ADH1B2的构建及鉴定 | 第46-48页 |
| ·表达质粒pProEX-ADH1B2的构建及鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| ·表达条件的优化 | 第50-52页 |
| ·包涵体的提取和纯化 | 第52-54页 |
| ·蛋白复性及活性检测 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·降落PCR的设计方案 | 第56页 |
| ·PCR产物的酶切 | 第56-57页 |
| ·包涵体的复性 | 第57-59页 |
| 5 总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 附录一:英文缩写词表 | 第63-64页 |
| 附录二:pUCm-T质粒图谱 | 第64-65页 |
| 附录三:pProEX HTb质粒图谱 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |