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乙醇脱氢酶的克隆表达及生物活性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
第一篇:论文综述部分(乙醇脱氢酶的研究进展)第8-29页
 前言第9页
 1 ADH的分类、命名及其多态性第9-10页
 2 ADH的种族区域性第10-11页
 3 ADH的组织特异性和时间特异性第11-12页
 4 参与乙醇代谢的途径第12-15页
   ·酒精的初级代谢第12-13页
   ·ADH和ALDH途径第13-14页
   ·微粒体乙醇氧化系统第14-15页
   ·过氧化氢酶第15页
 5 ADH的动力学特征第15-17页
   ·动力学参数第15-16页
   ·底物及其抑制剂第16页
   ·乙醇的药物动力学模型第16-17页
 6 ADH的结构第17-20页
 7 功能第20-22页
 8 ADH基因的表达调控第22页
 9 酒精代谢相关疾病第22-24页
   ·乙醇与酒精性疾病第23页
   ·NADH与酒精性疾病第23-24页
   ·乙醛与酒精性疾病第24页
   ·氧自由基与酒精性疾病第24页
   ·ADH多态性与酒精性疾病第24页
 10 结束语第24-25页
 参考文献第25-29页
第二篇:论文实验部分(乙醇脱氢酶基因的克隆表达及生物活性分析)第29-63页
 前言第30-32页
 1 实验材料及仪器第32-36页
   ·RNA来源第32页
   ·菌种第32页
   ·质粒第32页
   ·酶第32页
   ·试剂盒第32页
   ·缓冲液及其它溶液第32-34页
   ·培养基第34页
   ·各种电泳胶的配制第34-35页
   ·其它主要试剂和商品来源第35-36页
   ·主要仪器及设备第36页
 2 实验方法第36-45页
   ·ADH1B2基因的获得第36-37页
   ·克隆质粒pUCm-ADH1B2的构建及鉴定第37-40页
   ·表达质粒pProEX-ADH1B2的构建及鉴定第40-41页
   ·重组蛋白的诱导表达第41-42页
   ·重组蛋白表达条件的优化第42页
   ·包涵体的提取和纯化第42-43页
   ·蛋白复性及活性检测第43-45页
 3 实验结果和分析第45-56页
   ·人肝脏总RNA的质量分析第45页
   ·RF-PCT扩增结果第45-46页
   ·克隆质粒pUCm-ADH1B2的构建及鉴定第46-48页
   ·表达质粒pProEX-ADH1B2的构建及鉴定第48-50页
   ·重组蛋白的诱导表达第50页
   ·表达条件的优化第50-52页
   ·包涵体的提取和纯化第52-54页
   ·蛋白复性及活性检测第54-56页
 4 讨论第56-59页
   ·降落PCR的设计方案第56页
   ·PCR产物的酶切第56-57页
   ·包涵体的复性第57-59页
 5 总结第59-60页
 参考文献第60-63页
附录一:英文缩写词表第63-64页
附录二:pUCm-T质粒图谱第64-65页
附录三:pProEX HTb质粒图谱第65-67页
致谢第67页

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