| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13页 |
| 研究论文 | 第13-48页 |
| 第一章 甘蓝型油菜（Brassica napus）BAN同源片段克隆及序列分析 | 第13-30页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 材料和方法 | 第16-22页 |
| 1． 材料 | 第16-17页 |
| 1．1 植物材料 | 第16页 |
| 1．2 菌株及载体 | 第16页 |
| 1．2．1 克隆用大肠杆菌宿主菌 | 第16页 |
| 1．2．2 克隆用载体 | 第16页 |
| 1．3 培养基 | 第16-17页 |
| 1．3．1 LB培养基 | 第16页 |
| 1．3．2 LM培养基 | 第16页 |
| 1．3．3 SOB培养基 | 第16-17页 |
| 1．3．4 SOC培养基 | 第17页 |
| 1．4 工具酶和试剂 | 第17页 |
| 2． 方法 | 第17-22页 |
| 2．1 基因组DNA提取 | 第17-18页 |
| 2．1．1 油彩DNA的大规模提取 | 第17-18页 |
| 2．1．2 拟南芥总DNA的提取 | 第18页 |
| 2．2 PCR扩增 | 第18-19页 |
| 2．2．1 BAN基因保守区及其PCR引物设计 | 第18-19页 |
| 2．2．2 PCR扩增 | 第19页 |
| 2．2．3 PCR产物的回收 | 第19页 |
| 2．3 PCR产物克隆 | 第19-21页 |
| 2．3．1 克隆用TA载体的制作 | 第20页 |
| 2．3．2 细菌转化 | 第20页 |
| 2．3．3 X-Gal平板筛选阳性克隆 | 第20页 |
| 2．3．4 菌落PCR扩增筛选重组子 | 第20-21页 |
| 2．3．5 质粒DNA的提取 | 第21页 |
| 2．3．6 重组质粒的酶切验证 | 第21页 |
| 2．4 测序和序列分析 | 第21-22页 |
| 结果 | 第22-28页 |
| 1． 油菜BAN片段扩增PCR产物克隆鉴定 | 第22页 |
| 1．1 BAN片段在油菜及其它近缘植物植物中的PCR扩增 | 第22页 |
| 1．2 PCR产物克隆及其酶切鉴定 | 第22页 |
| 2． 克隆片段DNA序列测定及比较分析 | 第22-28页 |
| 2．1 甘蓝型油菜和拟南芥BAN片段序列测定 | 第22-26页 |
| 2．2 甘蓝型油菜BAN基因的序列比较 | 第26-28页 |
| 讨论 | 第28-30页 |
| 1． PCR产物的克隆 | 第28页 |
| 2． 利用模式植物“拟南芥”来克隆油菜中相关基因 | 第28-29页 |
| 3． 利用已克隆的DNA片段获取全长基因及其cDNA | 第29-30页 |
| 第二章 甘蓝型油菜（B．napus）花序浸泡法转基因研究 | 第30-48页 |
| 引言 | 第31-32页 |
| 材料和方法 | 第32-36页 |
| 1． 材料 | 第32-33页 |
| 1．1 植物材料 | 第32页 |
| 1．2 根癌农杆菌及转基因用质粒 | 第32页 |
| 1．3 培养基和化学试剂 | 第32-33页 |
| 1．3．1 LB培养基 | 第32页 |
| 1．3．2 MS培养基（仅含大量元素） | 第32-33页 |
| 1．3．3 化学试剂 | 第33页 |
| 1．3．4 卡那霉素和利福平的配制 | 第33页 |
| 1．4 花序浸泡液 | 第33页 |
| 2． 方法 | 第33-36页 |
| 2．1 农杆菌培养 | 第33-34页 |
| 2．2 花序浸泡处理方法 | 第34-35页 |
| 2．2．1 开花期浸泡 | 第34页 |
| 2．2．1．1 上午处理 | 第34页 |
| 2．2．1．2 下午处理 | 第34页 |
| 2．2．1．3 不育材料授粉后处理 | 第34页 |
| 2．2．2 开花前浸泡 | 第34-35页 |
| 2．2．2．1 不育材料授粉前浸泡 | 第34-35页 |
| 2．2．2．2 不育材料授粉前浸泡对照 | 第35页 |
| 2．2．3 子房损伤后浸泡处理 | 第35页 |
| 2．3 甘蓝型油菜对卡那霉素的敏感性实验 | 第35-36页 |
| 2．3．1 配制不同浓度的卡那霉素培养基 | 第35页 |
| 2．3．2 油菜种子消毒及种苗培养 | 第35-36页 |
| 结果 | 第36-40页 |
| 1． 油菜的花序浸泡 | 第36页 |
| 2． 油菜对卡那霉素的敏感性试验 | 第36-40页 |
| 讨论 | 第40-43页 |
| 1． 影响转基因油菜筛选的环境因素 | 第40页 |
| 2． 影响花序浸泡法转基因的重要因素 | 第40-42页 |
| 3． 选择标记基因 | 第42-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 文献综述 甘蓝型黄籽油菜和油菜转基因研究进展 | 第48-71页 |
| 引言 | 第49-68页 |
| 1． 甘蓝型黄籽油菜的优越性和研究现状 | 第50-54页 |
| 1．1 甘蓝型黄籽油菜的发现 | 第50-51页 |
| 1．2 目前甘蓝型黄籽油菜的研究进展 | 第51-54页 |
| 1．2．1 种皮色泽的遗传 | 第51-52页 |
| 1．2．2 种皮颜色与种子含油量的关系 | 第52页 |
| 1．2．3 甘蓝型黄籽油菜的自交退化现象 | 第52-53页 |
| 1．2．4 油菜种皮颜色的色素决定成分 | 第53-54页 |
| 2． 植物类黄酮合成途径的研究 | 第54-56页 |
| 2．1 类黄酮合成途径的概述 | 第54-55页 |
| 2．2 BAN基因与种皮色素的关系 | 第55-56页 |
| 3． 外源基因转入油菜的主要方法 | 第56-66页 |
| 3．1 农杆菌介导的基因转移 | 第57-61页 |
| 3．1．1 农杆菌介导的基因转化原理 | 第57-59页 |
| 3．1．1．1 T-DNA转移机理 | 第57-59页 |
| 3．1．1．2 农杆菌Ti质粒载体系统 | 第59页 |
| 3．1．2 农杆菌转化的特点 | 第59-60页 |
| 3．1．3 农杆菌介导法在油菜中的应用 | 第60页 |
| 3．1．4 存在的问题 | 第60-61页 |
| 3．2 直接基因的转化 | 第61-63页 |
| 3．2．1 PEG介导基因转化 | 第61页 |
| 3．2．2 电击介导基因转化 | 第61-62页 |
| 3．2．3 激光微束穿刺法 | 第62页 |
| 3．2．4 基因枪法 | 第62-63页 |
| 3．3 种质系统介导的基因转移 | 第63-66页 |
| 3．3．1 子房注射法 | 第63-64页 |
| 3．3．2 花序浸泡法 | 第64-66页 |
| 3．3．2．1 开花时间对转化的影响 | 第64-65页 |
| 3．3．2．2 表面活性剂SilwetL-77和其它添加物对转基因的影响 | 第65-66页 |
| 3．3．2．3 农杆菌的重复浸染和湿度对转基因的影响 | 第66页 |
| 3．4 利用转基因技术培育甘蓝型黄籽油菜 | 第66页 |
| 4． 展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
