| 致谢 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Summary | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-39页 |
| 第一章 马铃薯Y病毒属病毒与寄主互作的分子生物学研究进展 | 第14-22页 |
| 1． 病毒的基因组结构 | 第14-15页 |
| 2． 病毒的系统侵染 | 第15-17页 |
| 2．1 病毒基因组的扩增 | 第15-16页 |
| 2．2 病毒细胞间的运动 | 第16页 |
| 2．3 病毒的长距离转运 | 第16-17页 |
| 3． 病毒HcPro蛋白在PTGS中的作用 | 第17-18页 |
| 4． 病毒诱导的症状学 | 第18-19页 |
| 5． 病毒的传播 | 第19-20页 |
| 5．1 病毒的蚜虫传播 | 第19页 |
| 5．2 病毒的种子传播 | 第19-20页 |
| 6． 植物的自然抗性与工程抗性 | 第20-22页 |
| 第二章 转录后基因沉默与植物病毒抗性 | 第22-31页 |
| 1． PTGS的特点 | 第22-23页 |
| 2． 转基因植物中病毒诱导的PTGS | 第23页 |
| 3． 非转基因植物中病毒诱导的PTGS | 第23-24页 |
| 4． PTGS启动的机制 | 第24-26页 |
| 4．1 PTGS启动的决定因子 | 第24页 |
| 4．2 PTGS启动的机制 | 第24-26页 |
| 5． PTGS的系统传导 | 第26-28页 |
| 5．1 PTGS信号的存在和传导 | 第26-27页 |
| 5．2 PTGS传导的方向和途径 | 第27页 |
| 5．3 PTGS传导的信号物质 | 第27-28页 |
| 6． PTGS的抑制 | 第28-29页 |
| 6．1 病毒对PTGS抑制的现象 | 第28-29页 |
| 6．2 病毒对PTGS抑制的机制 | 第29页 |
| 7． PTGS的作用 | 第29-31页 |
| 7．1 PTGS是植物自然的抗病毒机制 | 第29-30页 |
| 7．2 PTGS是分析植物基因功能的有效方法 | 第30-31页 |
| 第三章 转基因植物中RNA介导的病毒抗性研究进展 | 第31-39页 |
| 1． 植物抗病毒基因工程育种策略 | 第31-32页 |
| 2． RNA介导的抗性及特点 | 第32-33页 |
| 3． RNA介导抗性与共抑制的相似处 | 第33-34页 |
| 4． RNA介导抗性的分子机理 | 第34-36页 |
| 5． 用于解释RNA介导抗性的假说 | 第36-37页 |
| 5．1 RNA阈值模型（RNA threshold model） | 第36页 |
| 5．2 甲基化--异常RNA模型（methylation-aberrant RNA hypothesis） | 第36-37页 |
| 5．3 RNA-DNA互作（RNA-DNA interaction） | 第37页 |
| 6． 结语 | 第37-39页 |
| 第二部分 实验研究 | 第39-104页 |
| 前言 | 第39-41页 |
| 第一章 材料与方法综览 | 第41-53页 |
| 1． 材料 | 第41页 |
| 1．1 毒源 | 第41页 |
| 1．2 供试植物 | 第41页 |
| 1．3 菌种、质粒 | 第41页 |
| 1．4 常用缓冲液及培养基的配制 | 第41页 |
| 1．5 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第41页 |
| 2． 方法 | 第41-53页 |
| 2．1 病毒的提纯及病毒RNA的提取 | 第41-42页 |
| 2．2 ELISA检测 | 第42-43页 |
| 2．3 PCR检测 | 第43页 |
| 2．4 质粒DNA的提取 | 第43-45页 |
| 2．5 植物总DNA的提取及Southern blot分析 | 第45-48页 |
| 2．6 转基因植物的Dot-blot检测 | 第48页 |
| 2．7 植物总RNA的提取及Northern blot分析 | 第48-50页 |
| 2．8 植物可溶性蛋白质的提取及Western blot分析 | 第50-53页 |
| 第二章 马铃薯Y病毒两分离物特性及其侵染寄主的超微结构比较 | 第53-63页 |
| 1． 材料与方法 | 第53-54页 |
| 1．1 毒源的分离、纯化与鉴定 | 第53页 |
| 1．2 分离物生物学特性测定 | 第53-54页 |
| 1．3 病毒提纯及电镜观察 | 第54页 |
| 1．4 抗血清制备与血清学关系测定 | 第54页 |
| 1．5 寄主组织超薄切片 | 第54页 |
| 2． 结果与分析 | 第54-58页 |
| 2．1 寄主范围和症状 | 第54-55页 |
| 2．2 两分离物的体外抗性 | 第55页 |
| 2．3 两分离物的蚜传特性 | 第55页 |
| 2．4 病毒提纯和粒体大小 | 第55-57页 |
| 2．5 抗血清效价及血清学关系 | 第57页 |
| 2．6 两分离物侵染后寄主的超微结构变化及其差异比较 | 第57-58页 |
| 3． 讨论 | 第58-63页 |
| 第三章 翻译与非翻译PVY~N CP基因的克隆、测序及其植物表达载体的构建 | 第63-76页 |
| 1． 材料与方法 | 第63-68页 |
| 1．1 病毒的提纯和病毒RNA的提取 | 第63页 |
| 1．2 cDNA的合成及PCR扩增 | 第63-65页 |
| 1．3 PCR产物的纯化 | 第65页 |
| 1．4 基因的克隆 | 第65-67页 |
| 1．5 基因序列的测定 | 第67页 |
| 1．6 植物表达载体的构建 | 第67-68页 |
| 2． 结果与分析 | 第68-75页 |
| 2．1 PVY~N的提纯 | 第68-69页 |
| 2．2 PVY~N RNA的提取 | 第69页 |
| 2．3 RT-PCR扩增的CP基因 | 第69-70页 |
| 2．4 基因的克隆与重组质粒的鉴定 | 第70-71页 |
| 2．5 基因序列的测定与分析 | 第71页 |
| 2．6 植物表达载体的构建 | 第71-75页 |
| 3． 讨论 | 第75-76页 |
| 第四章 翻译与非翻译PVY~N CP基因在烟草中的表达及其介导的抗病性比较 | 第76-95页 |
| 1． 材料与方法 | 第76-78页 |
| 1．1 菌株、质粒和试剂 | 第76页 |
| 1．2 植物表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 1．3 基因转化、植物再生及T_0代转基因植株的筛选 | 第77-78页 |
| 1．4 T_0代转基因植株的扩繁 | 第78页 |
| 1．5 T_0代转基因植株的抗病性及ELISA检测 | 第78页 |
| 1．6 植物总DNA的提取和Southern blot分析 | 第78页 |
| 1．7 植物总RNA的提取和Northern blot分析 | 第78页 |
| 1．8 植物可溶性蛋白的提取和Western blot分析 | 第78页 |
| 2． 结果与分析 | 第78-93页 |
| 2．1 烟草遗传转化及T_0代转基因植株再生 | 第78-81页 |
| 2．2 T_0代转基因烟草的抗病性分析 | 第81-86页 |
| 2．3 转基因植株Southern blot分析及转基因拷贝数与抗病性的关系 | 第86-90页 |
| 2．4 转基因mRNA表达及其在细胞内积累量与抗病性的关系 | 第90-93页 |
| 2．5 转基因蛋白质表达及其与抗病性的关系 | 第93页 |
| 3． 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 翻译与非翻译PVY~N CP基因转基因植株的遗传分析 | 第95-104页 |
| 1． 材料与方法 | 第95-96页 |
| 1．1 材料 | 第95页 |
| 1．2 转基因植株Kan~r抗性的检测 | 第95页 |
| 1．3 转基因植株PCR检测 | 第95-96页 |
| 1．4 转基因植株的抗病性检测 | 第96页 |
| 1．5 转基因植株的分子分析 | 第96页 |
| 2． 结果与分析 | 第96-101页 |
| 2．1 转基因植株T_1代遗传 | 第96-101页 |
| 2．2 T_1代转基因植株的分子杂交 | 第101页 |
| 3． 讨论 | 第101-103页 |
| 小结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-112页 |
| 附录A： 本论文所用缩写词及中英文对照 | 第112-115页 |
| 附录B： 常用缓冲液及培养基的配制 | 第115-120页 |
| 附录C： 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第120-121页 |
| 附录D： 本文所用载体图谱 | 第121-123页 |
| 附录E： 博士期间形成的主要学术论文目录 | 第123页 |
