中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
·昆虫病原真菌的研究 | 第11-15页 |
·昆虫病原真菌的研究现状 | 第11-12页 |
·昆虫病原真菌的致病机理与过程 | 第12-13页 |
·昆虫病原真菌的基因工程研究进展 | 第13-15页 |
·噻唑合成酶的研究 | 第15-19页 |
·维生素B1在生物体中的作用及合成路径 | 第15-16页 |
·噻唑合成酶的研究进展 | 第16-19页 |
第二章 引言 | 第19-21页 |
·研究背景和意义 | 第19-20页 |
·技术路线 | 第20-21页 |
第三章 材料与方法 | 第21-33页 |
·材料 | 第21-24页 |
·菌株及主要载体 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·主要缓冲液配方 | 第22-23页 |
·主要培养基配方 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-33页 |
·突变体的筛选 | 第24页 |
·球孢白僵菌DNA的提取 | 第24页 |
·YADE法扩增突变体M936 T-DNA侧翼序列 | 第24-26页 |
·BbThi同源重组载体的构建 | 第26页 |
·BbThi超量表达载体的构建 | 第26-27页 |
·同源重组载体和超量表达载体转入根癌农杆菌 | 第27页 |
·农杆菌介导球孢白僵菌的遗传转化及同源重组转化子的筛选 | 第27-29页 |
·PCR筛选同源重组转化子 | 第29页 |
·Southern杂交分析 | 第29-30页 |
·同源重组转化子中VB1含量测定 | 第30-31页 |
·同源重组转化子表型分析 | 第31页 |
·生物测定 | 第31-33页 |
第四章 结果与分析 | 第33-45页 |
·突变体的遗传稳定性分析 | 第33页 |
·噻唑合成酶基因的序列分析 | 第33-36页 |
·噻唑合成酶基因的拷贝数分析 | 第36-37页 |
·外源VB1对突变体菌落生长形态的影响 | 第37页 |
·同源重组转化子的筛选及分子验证 | 第37-39页 |
·PCR筛选同源重组转化子 | 第37-38页 |
·同源重组转化子Southern杂交验证 | 第38-39页 |
·同源重组转化子中VB1含量测定 | 第39-40页 |
·同源重组转化子的分析 | 第40-45页 |
·BbThi基因破坏对菌株生长形态的影响 | 第40-42页 |
·BbThi基因破坏对菌株产孢量的影响 | 第42-43页 |
·BbThi基因破坏对孢子萌发的影响 | 第43-44页 |
·BbThi基因破坏对菌株毒力的影响 | 第44-45页 |
第五章 讨论 | 第45-48页 |
·BbThi影响球孢白僵菌的产孢量 | 第45页 |
·BbThi对球孢白僵菌的毒力影响不显著 | 第45-46页 |
·维生素B1合成路径中基因的调控模式 | 第46-48页 |
第六章 结论 | 第48-49页 |
1.球孢白僵菌中突变体的筛选与噻唑合成酶基因BbThi的克隆 | 第48页 |
2.BbThi在球孢白僵菌中的生物学功能分析 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录1 文中缩写 | 第53-54页 |
附录2 在学期间所发表的文章 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |