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球孢白僵菌噻唑合成酶基因的克隆和功能分析

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-19页
   ·昆虫病原真菌的研究第11-15页
     ·昆虫病原真菌的研究现状第11-12页
     ·昆虫病原真菌的致病机理与过程第12-13页
     ·昆虫病原真菌的基因工程研究进展第13-15页
   ·噻唑合成酶的研究第15-19页
     ·维生素B1在生物体中的作用及合成路径第15-16页
     ·噻唑合成酶的研究进展第16-19页
第二章 引言第19-21页
   ·研究背景和意义第19-20页
   ·技术路线第20-21页
第三章 材料与方法第21-33页
   ·材料第21-24页
     ·菌株及主要载体第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·主要缓冲液配方第22-23页
     ·主要培养基配方第23-24页
   ·方法第24-33页
     ·突变体的筛选第24页
     ·球孢白僵菌DNA的提取第24页
     ·YADE法扩增突变体M936 T-DNA侧翼序列第24-26页
     ·BbThi同源重组载体的构建第26页
     ·BbThi超量表达载体的构建第26-27页
     ·同源重组载体和超量表达载体转入根癌农杆菌第27页
     ·农杆菌介导球孢白僵菌的遗传转化及同源重组转化子的筛选第27-29页
     ·PCR筛选同源重组转化子第29页
     ·Southern杂交分析第29-30页
     ·同源重组转化子中VB1含量测定第30-31页
     ·同源重组转化子表型分析第31页
     ·生物测定第31-33页
第四章 结果与分析第33-45页
   ·突变体的遗传稳定性分析第33页
   ·噻唑合成酶基因的序列分析第33-36页
   ·噻唑合成酶基因的拷贝数分析第36-37页
   ·外源VB1对突变体菌落生长形态的影响第37页
   ·同源重组转化子的筛选及分子验证第37-39页
     ·PCR筛选同源重组转化子第37-38页
     ·同源重组转化子Southern杂交验证第38-39页
   ·同源重组转化子中VB1含量测定第39-40页
   ·同源重组转化子的分析第40-45页
     ·BbThi基因破坏对菌株生长形态的影响第40-42页
     ·BbThi基因破坏对菌株产孢量的影响第42-43页
     ·BbThi基因破坏对孢子萌发的影响第43-44页
     ·BbThi基因破坏对菌株毒力的影响第44-45页
第五章 讨论第45-48页
   ·BbThi影响球孢白僵菌的产孢量第45页
   ·BbThi对球孢白僵菌的毒力影响不显著第45-46页
   ·维生素B1合成路径中基因的调控模式第46-48页
第六章 结论第48-49页
 1.球孢白僵菌中突变体的筛选与噻唑合成酶基因BbThi的克隆第48页
 2.BbThi在球孢白僵菌中的生物学功能分析第48-49页
参考文献第49-53页
附录1 文中缩写第53-54页
附录2 在学期间所发表的文章第54-55页
致谢第55-56页

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