| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-37页 |
| ·课题背景 | 第11页 |
| ·微生物脂肪酶研究概况 | 第11-19页 |
| ·微生物脂肪酶性质 | 第12-13页 |
| ·微生物脂肪酶来源 | 第13页 |
| ·脂肪酶的分子结构 | 第13-14页 |
| ·微生物脂肪酶的克隆、表达研究进展 | 第14-18页 |
| ·脂肪酶定向进化研究进展 | 第18-19页 |
| ·微生物脂肪酶的应用进展 | 第19页 |
| ·微生物淀粉酶研究概况 | 第19-28页 |
| ·α-淀粉酶的性质 | 第20-21页 |
| ·α-淀粉酶作用机理 | 第21-22页 |
| ·产α-淀粉酶的主要微生物类群 | 第22页 |
| ·α-淀粉酶的结构 | 第22-23页 |
| ·α-淀粉酶的活力的测定方法 | 第23-24页 |
| ·耐热α-淀粉酶的应用 | 第24-26页 |
| ·耐高温α-淀粉酶生产菌株育种进展 | 第26-27页 |
| ·α-淀粉酶分子生物学研究进展 | 第27-28页 |
| ·微生物α-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第28-33页 |
| ·α-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第29-30页 |
| ·α-葡萄糖苷酶活性测定方法 | 第30-31页 |
| ·α-葡萄糖苷酶的蛋白质结构与活性中心 | 第31-32页 |
| ·α-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第32页 |
| ·α-葡萄糖苷酶的应用及前景展望 | 第32-33页 |
| ·本课题主要内容和目的意义 | 第33-37页 |
| ·本课题主要内容 | 第33-34页 |
| ·本课题的目的、意义 | 第34-37页 |
| 第2章 脂肪酶产生菌B.subtilis FS321的分离鉴定及其产酶条件的初步优化 | 第37-49页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·实验结果与分析 | 第41-46页 |
| ·脂肪酶产生菌发酵条件实验 | 第41-42页 |
| ·脂肪酶最适反应条件初探试验 | 第42-43页 |
| ·细菌FS321细胞脂肪酸成分分析 | 第43-44页 |
| ·细菌FS321核糖体基因16S rDNA克隆与序列分析 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第46-49页 |
| 第3章 B.subtilis FS321的脂肪酶基因的克隆与表达 | 第49-63页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49-50页 |
| ·酶和主要试剂 | 第50页 |
| ·引物序列 | 第50页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-55页 |
| ·B.subtilis FS321脂肪酶基因的克隆、测序 | 第50-51页 |
| ·B.subtilis FS321脂肪酶基因的表达 | 第51-55页 |
| ·实验结果 | 第55-60页 |
| ·B.subtilis FS321脂肪酶基因的获得 | 第55页 |
| ·脂肪酶基因的克隆 | 第55页 |
| ·肪酶基因序列分析 | 第55-58页 |
| ·肪酶基因的表达 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60-63页 |
| 第4章 B.subtilis FS321的α-淀粉酶基因的克隆与表达 | 第63-75页 |
| ·前言 | 第63页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·菌株和质粒 | 第63页 |
| ·培养基 | 第63页 |
| ·酶和试剂 | 第63页 |
| ·引物序列 | 第63-64页 |
| ·其它溶液和缓冲液 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·B.Subtilis FS321 α-淀粉酶的最适反应温度试验 | 第64页 |
| ·α-淀粉酶基因的克隆、测序 | 第64-65页 |
| ·重组α-淀粉酶的表达 | 第65-67页 |
| ·重组α-淀粉酶酶学性质的初步研究 | 第67页 |
| ·实验结果 | 第67-73页 |
| ·B.subtilis FS321α-淀粉酶最适反应温度试验 | 第67-68页 |
| ·B.subtilis FS321α-淀粉酶基因的获得 | 第68页 |
| ·α-淀粉酶基因的克隆 | 第68页 |
| ·淀粉酶基因序列分析 | 第68-71页 |
| ·α-淀粉酶基因的表达 | 第71-72页 |
| ·α-淀粉酶的酶学性质研究 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第5章 嗜碱芽孢杆菌OF4的α-葡萄糖苷酶基因克隆与表达 | 第75-91页 |
| ·前言 | 第75页 |
| ·材料 | 第75-76页 |
| ·菌株与质粒 | 第75页 |
| ·化学试剂与酶 | 第75-76页 |
| ·引物序列 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·方法 | 第76-83页 |
| ·提取专性嗜碱菌OF4的基因组DNA | 第76页 |
| ·α-葡萄糖苷酶基因序列的获得 | 第76页 |
| ·提取表达质粒pET28a(+) | 第76-77页 |
| ·重组α-葡萄糖苷酶菌株的构建 | 第77-79页 |
| ·重组α-葡萄糖苷酶的表达 | 第79页 |
| ·重组α-葡萄糖苷酶的纯化 | 第79-81页 |
| ·重组酶蛋白浓度的测定 | 第81页 |
| ·酶活测定和酶学性质初步研究 | 第81-83页 |
| ·结果 | 第83-88页 |
| ·α-葡萄糖苷酶基因序列分析 | 第83-84页 |
| ·α-葡萄糖苷酶PCR扩增的结果 | 第84页 |
| ·α-葡萄糖苷酶阳性克隆的筛选与验证 | 第84-85页 |
| ·重组α-葡萄糖苷酶的表达验证 | 第85页 |
| ·酶活测定和酶学性质初步研究 | 第85-88页 |
| ·小结 | 第88-91页 |
| 总结 | 第91-93页 |
| 展望 | 第93-95页 |
| 附录 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-111页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 个人简历 | 第113-114页 |
