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猪链球菌2型部分毒力基因序列测定及血清学调查分析

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
第一部分 猪链球菌病研究进展第15-27页
   ·猪链球菌病原学第15-16页
     ·形态及结构第15页
     ·生长及培养特性第15页
     ·分类第15-16页
       ·根据溶血情况分类第15页
       ·按抗原构造分类第15-16页
     ·对环境抵抗力第16页
   ·流行病学特征第16-17页
     ·国内流行情况第16页
     ·流行特征第16-17页
       ·地区分布第16页
       ·时间分布第16页
       ·个体分布第16-17页
     ·自然感染部位第17页
     ·传染源第17页
     ·传播途径第17页
       ·直接性传播第17页
       ·间接性传播第17页
       ·垂直传播第17页
   ·致病机理第17-18页
   ·毒力因子第18-22页
     ·荚膜多糖第18-19页
     ·溶菌酶释放蛋白第19页
     ·胞外因子第19-20页
     ·溶血素第20-21页
     ·粘附素第21页
     ·其它毒力蛋白第21-22页
   ·检测方法第22-24页
     ·微生物学检测方法第22页
     ·血清学检测方法第22-23页
       ·国外研究情况第22-23页
       ·国内研究情况第23页
     ·分子生物学检测方法第23-24页
       ·荚膜多糖抗原基因第23页
       ·溶菌酶释放蛋白基因与胞外因子基因第23-24页
       ·溶血素基因第24页
       ·16Sr RNA基因片断第24页
   ·临床症状及病理变化第24-25页
     ·猪链球菌病的临床症状第24-25页
       ·败血症型第24-25页
       ·脑膜脑炎型第25页
       ·关节炎型第25页
       ·淋巴结脓肿型第25页
     ·猪链球菌病病理变化第25页
   ·猪链球菌病防制第25-27页
     ·预防措施第26页
       ·饲养管理第26页
       ·免疫接种第26页
     ·治疗第26-27页
第二部分 猪链球菌2型的分离与鉴定第27-35页
 1 材料第27-28页
   ·病料第27页
   ·实验动物第27页
   ·试剂第27页
   ·主要仪器第27-28页
 2 方法第28-30页
   ·病原菌分离及相关特性分析第28-29页
     ·直接涂片镜检第28页
     ·培养特性及形态观察第28页
     ·生化特性第28页
     ·人工感染试验第28-29页
       ·小白鼠人工感染试验第28页
       ·断奶仔猪人工感染试验第28-29页
     ·药敏试验第29页
   ·猪链球菌2型PCR方法的检测第29-30页
     ·引物合成第29页
     ·猪链球菌2型基因组DNA的提取第29页
     ·PCR方法鉴定猪链球菌2型CPS2J基因第29-30页
 3 结果第30-33页
   ·病原菌分离及相关特性分析第30-33页
     ·细菌的分离培养第30页
     ·细菌的形态第30-31页
     ·细菌的生化特性第31页
     ·人工感染试验第31-32页
     ·药敏试验第32-33页
   ·猪链球菌2型PCR鉴定第33页
 4 分析与讨论第33-35页
第三部份 猪链球菌2型部分毒力基因PCR检测及序列分析第35-50页
 1 材料第35-36页
   ·菌株第35页
   ·质粒第35-36页
   ·试剂第36页
   ·主要仪器第36页
 2 方法第36-43页
   ·猪链球菌2型CPS2J部分基因片段PCR检测方法的建立第36-37页
     ·引物设计与合成第36页
     ·猪链球菌2型基因组DNA的提取第36-37页
     ·PCR扩增猪链球菌2型CPS2J基因片断第37页
     ·PCR的特异性第37页
     ·PCR的敏感性第37页
   ·猪链球菌2型CPS2J部分基因片段序列测定第37-40页
     ·PCR产物纯化第37-38页
     ·大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞制备第38页
     ·CPS2J基因片段的克隆第38-39页
     ·PCR鉴定CPS2J阳性克隆第39页
     ·CPS2J基因酶切鉴定第39-40页
   ·猪链球菌2型MRP部分基因片段检测方法的建立第40页
     ·引物设计与合成第40页
     ·猪链球菌2型基因组DNA的提取第40页
     ·PCR扩增猪链球菌2型MRP基因片断第40页
   ·猪链球菌2型MRP部分基因片段序列测定第40-42页
     ·PCR产物纯化第40-41页
     ·大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞制备第41页
     ·MRP基因片段的克隆第41页
     ·PCR鉴定MRP阳性克隆第41页
     ·MRP基因酶切鉴定第41-42页
   ·猪链球菌2型EF部分基因片段PCR检测方法的建立第42-43页
     ·引物设计与合成第42页
     ·猪链球菌2型基因组DNA的提取第42页
     ·PCR扩增猪链球菌2型EF基因片断第42-43页
 3 结果第43-48页
   ·猪链球菌2型CPS2J部分基因片段PCR检测方法的建立第43-44页
     ·PCR特异性试验第43-44页
     ·PCR敏感性试验第44页
   ·CPS2J基因的克隆、鉴定第44-45页
   ·CPS2J基因片断序列测定及同源性比较第45-46页
   ·MRP基因的克隆、鉴定第46-47页
   ·MRP基因片断序列分析第47-48页
   ·EF基因PCR检测结果第48页
 4 分析与讨论第48-50页
第四部分 福建省猪链球该菌2型血清学调查分析第50-57页
 1 材料第50页
   ·主要试剂第50页
   ·血清样品第50页
   ·主要仪器第50页
 2 方法第50-51页
   ·猪链球菌2型抗体检测试剂盒操作步骤第50-51页
   ·福建省猪链球菌2型样品测定第51页
 3 结果第51-55页
   ·福建省各地采集的待检猪血清样品的代码与编号第51页
   ·福建省各地区及兽医院样本检测结果第51-54页
   ·福建省各地区血清猪链球菌2型抗体阳性率第54-55页
   ·福建省各地区猪链球菌2型血清抗体阳性猪场的比例第55页
 4 分析与讨论第55-57页
第五部分 结论第57-62页
 附录1第58-59页
  本文缩略词表(Abbreviations)第58-59页
 附录2第59-62页
  分子生物学检测相关试剂第59-60页
  ELISA检测相关试剂第60-62页
参考文献第62-68页
致谢第68页

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