中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
缩略词 | 第14-16页 |
前言 | 第16-37页 |
1.HPV概况 | 第16-18页 |
·HPV病理学研究 | 第16-17页 |
·HPV在不同年龄段人群中的易感性 | 第17-18页 |
2.HPV基因组与结构 | 第18-21页 |
·HPV的基因组 | 第18-20页 |
·HPV病毒的结构 | 第20-21页 |
3.HPV感染及增殖的分子生物学研究进展 | 第21-23页 |
·病毒与受体结合 | 第21页 |
·病毒的入胞与基因的运输 | 第21-22页 |
·HPV生活史 | 第22-23页 |
4.HPV晚期基因转录后水平调控 | 第23-28页 |
·HPV蛋白表达调控的意义 | 第23-24页 |
·poly A signal | 第24-26页 |
·'-UTR | 第26-28页 |
5.hnRNP H1蛋白生物学功能及与HPV的关系 | 第28-30页 |
·hnRNP蛋白家族的主要功能 | 第28页 |
·hnRNP H1/H'与HPV蛋白表达调控的关系 | 第28-30页 |
6.相关实验方法 | 第30-36页 |
·筛选相互作用蛋白的方法 | 第30-31页 |
·双向凝胶电泳 | 第31-32页 |
·基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 | 第32-33页 |
·RNA干扰技术 | 第33-36页 |
7.本论文研究目的与意义 | 第36-37页 |
材料与方法 | 第37-56页 |
1.材料 | 第37-45页 |
2.方法 | 第45-56页 |
结果与分析 | 第56-79页 |
第一部分:免疫沉淀法获取HPV16 VLPs结合蛋白方法的建立及初步验证 | 第56-63页 |
1.免疫沉淀法获取HPV16 L1相互作用蛋白 | 第56-58页 |
·HPV VLPs的构建 | 第56页 |
·原核表达的HPV16 VLPs可以进入HeLa细胞 | 第56-57页 |
·免疫沉淀法获取及鉴定HPV 16L1相互作用的胞内蛋白 | 第57-58页 |
·MALDI-TOF-MS鉴定与HPV16 L1相互作用的蛋白 | 第58页 |
2.hnRNP H1与HPV 16L1的相互作用验证 | 第58-62页 |
·hnRNP H1真核表达质粒的构建 | 第58-60页 |
·体内共沉淀验证HPV16 L1与H1蛋白的相互作用 | 第60-61页 |
·hnRNP H1与HPV16 L1在细胞内的共定位 | 第61-62页 |
3.第一部分小结 | 第62-63页 |
第二部分:hnRNP H1在病毒转录调控中的作用 | 第63-79页 |
4.HPV16转录后调控模型的建立 | 第63-72页 |
·质粒的构建 | 第64-68页 |
·hnRNP H1参与的转录终止模型的验证 | 第68-72页 |
5.HPV16 L1蛋白的表达对HPV转录模型的影响 | 第72-77页 |
·荧光显微镜及流式细胞技术检测GPG的表达受L1蛋白的影响 | 第72-73页 |
·RT-PCR检测16L1蛋白的表达对pGPG转录的影响 | 第73-74页 |
·Western blot检测16L1蛋白的表达对pGPG表达的影响 | 第74-75页 |
·HPV16 L1蛋白对pGPG转录产生的mRNA稳定性的影响 | 第75-76页 |
·hnRNP H1基因沉默后HPV16 L1对转录通读的影响 | 第76-77页 |
6 第二部分小结 | 第77-79页 |
讨论 | 第79-85页 |
1.筛选相互作用蛋白方案 | 第79-80页 |
·-DE和MALDI-TOF-MS分离鉴定蛋白 | 第80-81页 |
3.蛋白相互作用的进一步验证 | 第81页 |
4.hnRNP H1参与的HPV的晚期蛋白表达调控机制 | 第81-82页 |
5.模拟HPV晚期基因转录后调控模型的建立 | 第82页 |
6.L1蛋白对晚期基因表达的促进作用 | 第82-85页 |
小结与展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
附录 | 第93页 |