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HPV16主要衣壳蛋白L1与hnRNP H1的相互作用及其功能

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
缩略词第14-16页
前言第16-37页
 1.HPV概况第16-18页
     ·HPV病理学研究第16-17页
     ·HPV在不同年龄段人群中的易感性第17-18页
 2.HPV基因组与结构第18-21页
     ·HPV的基因组第18-20页
   ·HPV病毒的结构第20-21页
 3.HPV感染及增殖的分子生物学研究进展第21-23页
     ·病毒与受体结合第21页
     ·病毒的入胞与基因的运输第21-22页
     ·HPV生活史第22-23页
 4.HPV晚期基因转录后水平调控第23-28页
   ·HPV蛋白表达调控的意义第23-24页
     ·poly A signal第24-26页
     ·'-UTR第26-28页
 5.hnRNP H1蛋白生物学功能及与HPV的关系第28-30页
     ·hnRNP蛋白家族的主要功能第28页
     ·hnRNP H1/H'与HPV蛋白表达调控的关系第28-30页
 6.相关实验方法第30-36页
     ·筛选相互作用蛋白的方法第30-31页
     ·双向凝胶电泳第31-32页
     ·基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱第32-33页
   ·RNA干扰技术第33-36页
 7.本论文研究目的与意义第36-37页
材料与方法第37-56页
 1.材料第37-45页
 2.方法第45-56页
结果与分析第56-79页
 第一部分:免疫沉淀法获取HPV16 VLPs结合蛋白方法的建立及初步验证第56-63页
  1.免疫沉淀法获取HPV16 L1相互作用蛋白第56-58页
     ·HPV VLPs的构建第56页
     ·原核表达的HPV16 VLPs可以进入HeLa细胞第56-57页
     ·免疫沉淀法获取及鉴定HPV 16L1相互作用的胞内蛋白第57-58页
     ·MALDI-TOF-MS鉴定与HPV16 L1相互作用的蛋白第58页
  2.hnRNP H1与HPV 16L1的相互作用验证第58-62页
     ·hnRNP H1真核表达质粒的构建第58-60页
     ·体内共沉淀验证HPV16 L1与H1蛋白的相互作用第60-61页
     ·hnRNP H1与HPV16 L1在细胞内的共定位第61-62页
  3.第一部分小结第62-63页
 第二部分:hnRNP H1在病毒转录调控中的作用第63-79页
  4.HPV16转录后调控模型的建立第63-72页
     ·质粒的构建第64-68页
     ·hnRNP H1参与的转录终止模型的验证第68-72页
  5.HPV16 L1蛋白的表达对HPV转录模型的影响第72-77页
     ·荧光显微镜及流式细胞技术检测GPG的表达受L1蛋白的影响第72-73页
     ·RT-PCR检测16L1蛋白的表达对pGPG转录的影响第73-74页
     ·Western blot检测16L1蛋白的表达对pGPG表达的影响第74-75页
     ·HPV16 L1蛋白对pGPG转录产生的mRNA稳定性的影响第75-76页
     ·hnRNP H1基因沉默后HPV16 L1对转录通读的影响第76-77页
  6 第二部分小结第77-79页
讨论第79-85页
 1.筛选相互作用蛋白方案第79-80页
   ·-DE和MALDI-TOF-MS分离鉴定蛋白第80-81页
 3.蛋白相互作用的进一步验证第81页
 4.hnRNP H1参与的HPV的晚期蛋白表达调控机制第81-82页
 5.模拟HPV晚期基因转录后调控模型的建立第82页
 6.L1蛋白对晚期基因表达的促进作用第82-85页
小结与展望第85-87页
参考文献第87-92页
致谢第92-93页
附录第93页

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