布鲁氏菌外膜蛋白Omp15的原核表达及免疫活性鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·布鲁氏菌病的国内外研究现状 | 第10-16页 |
| ·布鲁氏菌病病原 | 第10-11页 |
| ·布鲁氏菌蛋白抗原研究进展 | 第11-12页 |
| ·布鲁氏菌病疫苗的研究方向 | 第12-13页 |
| ·布鲁氏菌病流行病学及临床症状 | 第13-14页 |
| ·布鲁氏菌病的诊断 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-28页 |
| ·试验材料 | 第16-21页 |
| ·菌株和载体 | 第16-17页 |
| ·工具酶及化学试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器和设备 | 第17-18页 |
| ·试验试剂的配制 | 第18-21页 |
| ·试验方法 | 第21-28页 |
| ·外膜蛋白筛选 | 第21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·布鲁氏菌基因组的提取 | 第22页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第22页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第22-25页 |
| ·阳性重组载体的表达 | 第25页 |
| ·重组蛋白的反应原性鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第26-27页 |
| ·布鲁氏菌病ELISA诊断方法初探 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-34页 |
| ·目的蛋白跨膜分析的结果 | 第28-29页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·重组质粒菌液PCR鉴定结果 | 第30页 |
| ·重组质粒酶切鉴定的结果 | 第30-31页 |
| ·测序结果与序列分析 | 第31-32页 |
| ·目的蛋白质的表达 | 第32页 |
| ·重组融合蛋白免疫印迹鉴定 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·ELISA的结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| ·目的蛋白的选取 | 第34页 |
| ·关于试验技术 | 第34页 |
| ·关于诱导表达的分析 | 第34-35页 |
| ·关于免疫印迹的分析 | 第35页 |
| ·关于重组蛋白质的纯化讨论 | 第35-36页 |
| ·关于超声波裂解 | 第35页 |
| ·包涵体的洗涤溶解 | 第35-36页 |
| ·关于Omp15外膜蛋白质ELISA结果 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 附录一 | 第43-45页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第45-46页 |
| 作者简历 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附件 | 第48页 |
