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猪胚胎体外生产技术的初步研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
引言第12-13页
第一部分 文献综述第13-34页
 一、猪卵母细胞体外成熟与孤雌激活的研究进展第13-19页
  1 卵母细胞体外成熟研究的意义和进展第13-14页
  2 卵母细胞体外成熟研究的进展第14页
  3 哺乳动物卵母细胞的生长和成熟第14-15页
  4 影响卵母细胞体外成熟的因素第15-19页
   ·卵巢卵母细胞本身质量第16页
   ·外界因素对体外成熟的影响第16-17页
     ·卵巢保存温度及时间第17页
     ·体外培养时温度、时间和气相环境第17页
   ·成熟培养液中不同添加物对体外成熟的影响第17-19页
     ·激素添加第17-18页
     ·卵泡液(pFF)的添加第18页
     ·其他添加物对体外成熟的影响第18-19页
 二、猪卵母细胞孤雌激活研究进展第19-24页
  1 卵母细胞的激活原理第19页
  2 卵母细胞的激活方法第19-22页
   ·电激活第19-20页
   ·化学激活第20-22页
     ·钙离子载体A23187和离子霉素(ionomycin)第20-21页
     ·乙醇激活第21页
     ·其它化学激活剂第21页
     ·联合激活第21-22页
  3 卵母细胞孤雌激活的核质变化第22页
  4 核移植中卵母细胞激活研究的意义第22-24页
 三、猪卵母细胞体外受精研究现状第24-30页
  1 体外受精研究概况第24-25页
  2 研究意义第25页
  3 猪体外受精存在的问题及原因第25-26页
  4 影响猪体外受精的因素第26-28页
   ·精子密度和受精时间对体外受精的影响第26-27页
   ·体外受精液第27页
   ·促进精子获能的物质第27-28页
  5 精子处理方法第28页
  6 培养条件对体外受精胚发育的影响第28-30页
 参考文献第30-34页
第二部分 试验研究第34-65页
 第一章 猪卵母细胞体外成熟与孤雌激活第34-54页
  1 材料与方法第34-41页
   ·材料第34-37页
     ·主要仪器与试剂第34-35页
     ·溶液的配制第35-37页
   ·方法第37-41页
     ·卵母细胞体外成熟第37-38页
     ·成熟培养后COCs上卵丘细胞的去除第38页
     ·卵母细胞成熟鉴定第38页
     ·卵母细胞孤雌激活第38-39页
     ·孤雌激活后胚胎培养第39页
     ·染色标本制作同第39-40页
     ·核相的评估第40页
     ·胚胎移植手术操作流程第40-41页
   ·数据处理第41页
  2 结果第41-46页
   ·季节对卵母细胞体外成熟及孤雌激活发育的影响第41-42页
   ·放线菌酮素(CHX)对卵母细胞减数分裂的影响第42-43页
   ·电激活参数的研究第43-44页
   ·乙醇激活第44-45页
   ·电激活与不同化学激活剂联合激活第45页
   ·胺环己酮对猪卵母细胞孤雌激活的影响第45-46页
  3 讨论第46-51页
  参考文献第51-54页
 第二章 猪卵母细胞体外受精研究第54-65页
  1 材料与方法第54-56页
   ·试验材料第54页
     ·主要试剂第54页
     ·卵巢第54页
     ·主要仪器设备第54页
   ·试验方法第54-56页
     ·卵母细胞的采集和体外成熟培养第54-55页
     ·卵母细胞的准备第55页
     ·精子的准备第55页
       ·鲜精第55页
       ·冻精冷冻和解冻第55页
     ·精卵共孵育第55-56页
     ·受精卵的培养第56页
     ·观察卵裂率和囊胚率第56页
     ·多精入卵观察第56页
     ·胚胎染色体分析第56页
   ·数据处理第56页
  2 结果第56-60页
   ·不同共孵时间的受精能力比较第56-57页
   ·精子受精前孵育时间对猪卵母细胞体外受精及进一步发育的影响第57-58页
   ·精卵共孵时精子密度对体外受精的影响第58页
   ·冻精和鲜精受精能力的比较第58-59页
   ·胚胎发育速度对猪体外受精胚发育的影响第59页
   ·发育速度对囊胚染色体异常的影响第59-60页
  3 讨论第60-63页
  参考文献第63-65页
全文结论第65-67页
附录第67-71页
致谢第71-73页
攻读学位期间发表的学术论文目录第73页

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