摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-34页 |
一、猪卵母细胞体外成熟与孤雌激活的研究进展 | 第13-19页 |
1 卵母细胞体外成熟研究的意义和进展 | 第13-14页 |
2 卵母细胞体外成熟研究的进展 | 第14页 |
3 哺乳动物卵母细胞的生长和成熟 | 第14-15页 |
4 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第15-19页 |
·卵巢卵母细胞本身质量 | 第16页 |
·外界因素对体外成熟的影响 | 第16-17页 |
·卵巢保存温度及时间 | 第17页 |
·体外培养时温度、时间和气相环境 | 第17页 |
·成熟培养液中不同添加物对体外成熟的影响 | 第17-19页 |
·激素添加 | 第17-18页 |
·卵泡液(pFF)的添加 | 第18页 |
·其他添加物对体外成熟的影响 | 第18-19页 |
二、猪卵母细胞孤雌激活研究进展 | 第19-24页 |
1 卵母细胞的激活原理 | 第19页 |
2 卵母细胞的激活方法 | 第19-22页 |
·电激活 | 第19-20页 |
·化学激活 | 第20-22页 |
·钙离子载体A23187和离子霉素(ionomycin) | 第20-21页 |
·乙醇激活 | 第21页 |
·其它化学激活剂 | 第21页 |
·联合激活 | 第21-22页 |
3 卵母细胞孤雌激活的核质变化 | 第22页 |
4 核移植中卵母细胞激活研究的意义 | 第22-24页 |
三、猪卵母细胞体外受精研究现状 | 第24-30页 |
1 体外受精研究概况 | 第24-25页 |
2 研究意义 | 第25页 |
3 猪体外受精存在的问题及原因 | 第25-26页 |
4 影响猪体外受精的因素 | 第26-28页 |
·精子密度和受精时间对体外受精的影响 | 第26-27页 |
·体外受精液 | 第27页 |
·促进精子获能的物质 | 第27-28页 |
5 精子处理方法 | 第28页 |
6 培养条件对体外受精胚发育的影响 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-34页 |
第二部分 试验研究 | 第34-65页 |
第一章 猪卵母细胞体外成熟与孤雌激活 | 第34-54页 |
1 材料与方法 | 第34-41页 |
·材料 | 第34-37页 |
·主要仪器与试剂 | 第34-35页 |
·溶液的配制 | 第35-37页 |
·方法 | 第37-41页 |
·卵母细胞体外成熟 | 第37-38页 |
·成熟培养后COCs上卵丘细胞的去除 | 第38页 |
·卵母细胞成熟鉴定 | 第38页 |
·卵母细胞孤雌激活 | 第38-39页 |
·孤雌激活后胚胎培养 | 第39页 |
·染色标本制作同 | 第39-40页 |
·核相的评估 | 第40页 |
·胚胎移植手术操作流程 | 第40-41页 |
·数据处理 | 第41页 |
2 结果 | 第41-46页 |
·季节对卵母细胞体外成熟及孤雌激活发育的影响 | 第41-42页 |
·放线菌酮素(CHX)对卵母细胞减数分裂的影响 | 第42-43页 |
·电激活参数的研究 | 第43-44页 |
·乙醇激活 | 第44-45页 |
·电激活与不同化学激活剂联合激活 | 第45页 |
·胺环己酮对猪卵母细胞孤雌激活的影响 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
第二章 猪卵母细胞体外受精研究 | 第54-65页 |
1 材料与方法 | 第54-56页 |
·试验材料 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54页 |
·卵巢 | 第54页 |
·主要仪器设备 | 第54页 |
·试验方法 | 第54-56页 |
·卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第54-55页 |
·卵母细胞的准备 | 第55页 |
·精子的准备 | 第55页 |
·鲜精 | 第55页 |
·冻精冷冻和解冻 | 第55页 |
·精卵共孵育 | 第55-56页 |
·受精卵的培养 | 第56页 |
·观察卵裂率和囊胚率 | 第56页 |
·多精入卵观察 | 第56页 |
·胚胎染色体分析 | 第56页 |
·数据处理 | 第56页 |
2 结果 | 第56-60页 |
·不同共孵时间的受精能力比较 | 第56-57页 |
·精子受精前孵育时间对猪卵母细胞体外受精及进一步发育的影响 | 第57-58页 |
·精卵共孵时精子密度对体外受精的影响 | 第58页 |
·冻精和鲜精受精能力的比较 | 第58-59页 |
·胚胎发育速度对猪体外受精胚发育的影响 | 第59页 |
·发育速度对囊胚染色体异常的影响 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
全文结论 | 第65-67页 |
附录 | 第67-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73页 |