中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
中英文对照表 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-18页 |
1 引言 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-26页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·实验菌株 | 第20页 |
·培养基及规试剂 | 第20页 |
·分子生物学试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·APEC中papC、iucD、irp2、tsh、iss单基因PCR扩增 | 第21-23页 |
·大肠杆菌培养与基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss单基因PCR扩增体系 | 第23页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss单基因PCR反应参数 | 第23页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss PCR产物的鉴定 | 第23页 |
·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第23页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss PCR产物测序鉴定 | 第23页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss多重PCR条件的优化 | 第23-25页 |
·引物浓度的优化 | 第23页 |
·镁离子浓度的优化 | 第23-24页 |
·Taq酶量的优化 | 第24页 |
·退火温度的优化 | 第24页 |
·延伸时间的优化 | 第24-25页 |
·循环次数的优化 | 第25页 |
·DNA提取方法的比较 | 第25页 |
·多重PCR敏感性实验 | 第25页 |
·多重PCR特异性实验 | 第25页 |
·APEC安徽分离株毒力基因的多重PCR检测 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-40页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss单基因PCR扩增结果 | 第26-29页 |
·papC基因的PCR扩增 | 第26页 |
·iucD基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
·irp2基因的PCR扩增 | 第27页 |
·tsh基因的PCR扩增 | 第27-28页 |
·iss基因的PCR扩增 | 第28页 |
·5种基因的单基因PCR扩增结果 | 第28-29页 |
·papC、iucD、irp2、tsh、iss基因测序与同源性比较 | 第29-33页 |
·papC基因的PCR产物序列与同源性比较 | 第29页 |
·iucD基因的PCR产物序列与同源性比较 | 第29-30页 |
·irp2基因的PCR产物序列与同源性比较 | 第30-31页 |
·tsh基因的PCR产物序列与同源性比较 | 第31-32页 |
·iss基因的PCR产物序列与同源性比较 | 第32-33页 |
·多重PCR反应条件的优化结果 | 第33-37页 |
·引物浓度的优化结果 | 第33页 |
·镁离子浓度的优化结果 | 第33-34页 |
·Taq酶量的优化结果 | 第34-35页 |
·退火温度的优化结果 | 第35页 |
·延伸时间的优化结果 | 第35-36页 |
·循环次数的优化结果 | 第36页 |
·DNA提取方法的比较结果 | 第36-37页 |
·优化后的多重PCR条件 | 第37页 |
·多重PCR敏感性实验结果 | 第37-38页 |
·多重PCR特异性实验结果 | 第38-39页 |
·APEC安徽分离株毒力基因的多重PCR检测结果 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
·禽致病性大肠杆菌毒力基因与致病性的关系 | 第40页 |
·多重PCR条件优化 | 第40-42页 |
·禽致病性大肠杆菌毒力基因的测序 | 第42页 |
·禽致病性大肠杆菌安徽分离株的毒力基因分布 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |