| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-23页 |
| 第一章 绪论 | 第23-50页 |
| ·乳酸简介 | 第23-24页 |
| ·乳酸的结构与性质 | 第23-24页 |
| ·乳酸的生产方法 | 第24页 |
| ·L-乳酸的应用 | 第24-27页 |
| ·L-乳酸在食品工业中的应用 | 第25页 |
| ·L-乳酸在医药行业中的应用 | 第25-26页 |
| ·L-乳酸在轻工、化工行业中的应用 | 第26页 |
| ·L-乳酸在农业中的应用 | 第26页 |
| ·可生物降解材料聚乳酸 | 第26-27页 |
| ·可生物降解塑料 | 第26-27页 |
| ·可生物降解医用材料 | 第27页 |
| ·发酵法生产L-乳酸的代谢途径 | 第27-28页 |
| ·同型乳酸发酵菌 | 第27-28页 |
| ·异型乳酸发酵 | 第28页 |
| ·混合酸发酵 | 第28页 |
| ·米根霉发酵法生产L-乳酸的研究进展 | 第28-41页 |
| ·米根霉发酵产L-的代谢机理 | 第29-30页 |
| ·米根霉的碳代谢网络 | 第29页 |
| ·米根霉发酵生产L-乳酸的代谢工程研究 | 第29-30页 |
| ·米根霉生产L-乳酸的发酵工艺进展 | 第30-33页 |
| ·发酵原料 | 第31页 |
| ·发酵方式 | 第31-33页 |
| ·代谢控制发酵 | 第33-37页 |
| ·微生物的代谢调节 | 第33页 |
| ·代谢控制发酵简介 | 第33-35页 |
| ·以无机盐、通气为调控措施的米根霉代谢控制发酵 | 第35-37页 |
| ·米根霉菌种诱变选育进展 | 第37-38页 |
| ·米根霉的代谢控制育种 | 第38-41页 |
| ·代谢控制育种概述 | 第38-40页 |
| ·筛选营养缺陷型是代谢控制育种的有效措施 | 第40页 |
| ·米根霉发酵生产L-乳酸的代谢控制育种思路 | 第40-41页 |
| ·本文主要研究内容 | 第41页 |
| ·研究的课题来源 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 第二章 发酵液中乳酸检测方法的建立 | 第50-58页 |
| ·仪器、试剂及供试材料 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·检测方法 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·EDTA定钙法测定发酵液中乳酸含量研究 | 第52-54页 |
| ·CaCO_3的加入量对测定结果的影响 | 第52页 |
| ·碳酸钙过量并过滤对测定结果的影响 | 第52-53页 |
| ·pH值对测定结果的影响 | 第53页 |
| ·测定回收率实验 | 第53-54页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC)与EDTA定钙法的测定结果比较 | 第54页 |
| ·反相HPLC法测定发酵液中乳酸方法的建立 | 第54-56页 |
| ·定性测定 | 第54-55页 |
| ·标准曲线绘制 | 第55页 |
| ·重复性试验 | 第55页 |
| ·回收率试验 | 第55-56页 |
| ·发酵液的测定 | 第56页 |
| ·结果讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 第三章 米根霉LDH和ADH的分离纯化及特性研究 | 第58-74页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料与方法 | 第59-65页 |
| ·菌种 | 第59页 |
| ·2 主要试剂 | 第59-60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60页 |
| ·LDH的初步分离提取 | 第60-61页 |
| ·LDH粗酶液的特性研究 | 第61-62页 |
| ·ADH的初步分离提取 | 第62页 |
| ·ADH粗酶液的特性研究 | 第62-63页 |
| ·分析方法 | 第63-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-72页 |
| ·米根霉LDH粗酶液的酶学特性研究 | 第65-69页 |
| ·温度对LDH活力的影响 | 第65页 |
| ·反应体系pH值对LDH活力的影响 | 第65-66页 |
| ·不同离子对LDH活力的影响 | 第66-67页 |
| ·NADH浓度对LDH酶活性的影响及K_m测定 | 第67-68页 |
| ·丙酮酸浓度对酶活性的影响及K_m测定 | 第68-69页 |
| ·米根霉ADH粗酶液的酶学特性研究 | 第69-72页 |
| ·温度对ADH活力的影响 | 第69-70页 |
| ·反应体系pH值对ADH活力的影响 | 第70页 |
| ·不同离子及EDTA对ADH活力的影响 | 第70-71页 |
| ·乙醛浓度对ADH活力的影响及Km的测定 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第四章 Mg~(2+)与Zn~(2+)对米根霉的发酵调控 | 第74-92页 |
| ·前言 | 第74-75页 |
| ·材料与方法 | 第75-81页 |
| ·实验菌种 | 第75页 |
| ·实验试剂 | 第75页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第75-76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-77页 |
| ·分析方法 | 第77-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-90页 |
| ·出发菌株发酵特性研究 | 第81-82页 |
| ·摇瓶条件下Mg~(2+)与Zn~(2+)离子调控米根霉As3.3461发酵特性 | 第82-86页 |
| ·不同Mg~(2+)浓度对发酵的影响 | 第82-84页 |
| ·不同Zn~(2+)浓度对发酵的影响 | 第84-86页 |
| ·发酵罐实验研究 | 第86-90页 |
| ·罐发酵条件下不同Mg~(2+)浓度对发酵的影响 | 第86-88页 |
| ·罐发酵条件下不同Zn~(2+)浓度对发酵的影响 | 第88-90页 |
| ·本章小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-92页 |
| 第五章 不同通气条件对米根霉的发酵调控 | 第92-110页 |
| ·前言 | 第92-93页 |
| ·材料与方法 | 第93-96页 |
| ·实验材料、仪器与设备 | 第93页 |
| ·培养基 | 第93-94页 |
| ·孢子悬浮液的制备 | 第94页 |
| ·不同通气条件下的米根霉发酵特性 | 第94-95页 |
| ·分析方法 | 第95-96页 |
| ·结果与分析 | 第96-108页 |
| ·摇瓶条件下不同通气条件发酵实验 | 第96-102页 |
| ·不同装液量下的碳代谢特性 | 第96-98页 |
| ·不同转速下的碳代谢特性 | 第98-100页 |
| ·限氧条件下的碳代谢特性 | 第100-102页 |
| ·发酵罐条件下不同通气条件发酵实验 | 第102-108页 |
| ·不同装液量下的碳代谢特性 | 第102-104页 |
| ·不同转速下的碳代谢特性 | 第104-105页 |
| ·不同通气速率下的碳代谢特性 | 第105-108页 |
| ·本章小结 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-110页 |
| 第六章 米根霉ADH突变株的代谢调控选育及发酵特性 | 第110-128页 |
| ·前言 | 第110-111页 |
| ·材料与方法 | 第111-118页 |
| ·实验材料 | 第111-112页 |
| ·培养基 | 第112-113页 |
| ·实验方法 | 第113-117页 |
| ·筛选方案设计 | 第113页 |
| ·ADH突变株筛选原理 | 第113-114页 |
| ·亚硝基胍(NTG)的致突变机理 | 第114页 |
| ·紫外线(UV)的致突变机理 | 第114页 |
| ·二次诱变 | 第114-115页 |
| ·诱变育种步骤 | 第115-116页 |
| ·ADH突变菌株的初步摇瓶发酵研究 | 第116页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第116-117页 |
| ·分析方法 | 第117-118页 |
| ·结果与分析 | 第118-126页 |
| ·ADH突变株的筛选条件的确定 | 第118-120页 |
| ·丙烯醇最适筛选浓度的确定 | 第118-119页 |
| ·NTG诱变最佳剂量 | 第119页 |
| ·紫外诱变最佳剂量 | 第119-120页 |
| ·米根霉ADH高产菌株的二次诱变选育 | 第120-123页 |
| ·NTG诱变效果 | 第120-122页 |
| ·UV诱变效果 | 第122-123页 |
| ·swsp-1-2突变菌株的发酵特性初步研究 | 第123-125页 |
| ·突变株swsp-1-2的遗传稳定性 | 第125-126页 |
| ·本章小结 | 第126页 |
| 参考文献 | 第126-128页 |
| 第七章 米根霉LDH基因的克隆及表达 | 第128-135页 |
| ·材料与方法 | 第128-129页 |
| ·材料 | 第128-129页 |
| ·方法 | 第129页 |
| ·结果与分析 | 第129-133页 |
| ·乳酸脱氢酶基因ldhL的克隆及序列分析 | 第129-132页 |
| ·表达载体pET17b-ldhL的构建及验证 | 第132页 |
| ·乳酸脱氢酶基因ldhL的诱导表达 | 第132-133页 |
| ·讨论 | 第133页 |
| ·本章小结 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-135页 |
| 第八章 结论与建议 | 第135-138页 |
| ·研究的主要结论 | 第135-136页 |
| ·论文的创新点 | 第136页 |
| ·下一步研究建议 | 第136-138页 |
| 攻读学位期间的主要科研内容 | 第138-139页 |
