小鼠Ii基因的克隆、表达及其抗体制备
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 插图和附表清单 | 第8-9页 |
| 主要符号表 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 1 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·质粒、工程菌和细胞: | 第17页 |
| ·主要工具酶及试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液的配制 | 第17-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·小鼠Ii基因cDNA的提取 | 第21-23页 |
| ·小鼠Ii基因的克隆与鉴定 | 第23-26页 |
| ·小鼠Ii基因序列分析 | 第26页 |
| ·小鼠Ii基因的原核表达与鉴定 | 第26-27页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的大量提取与纯化 | 第27-29页 |
| ·兔抗鼠GST-Ii多克隆抗体的制备及鉴定 | 第29-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-44页 |
| ·小鼠Ii基因的克隆与鉴定 | 第31-34页 |
| ·小鼠脾脏组织总RNA的抽提结果 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增小鼠Ii基因 | 第31页 |
| ·小鼠Ii基因RT-PCR产物的单酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pGEX-4T-1-Ii的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·小鼠Ii基因序列分析 | 第34-39页 |
| ·Ii核苷酸序列同源性分析及进化树绘制 | 第34-37页 |
| ·Ii氨基酸序列同源性分析及进化树绘制 | 第37-39页 |
| ·小鼠Ii基因的原核表达与鉴定 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE检测 | 第39页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的可溶性鉴定 | 第39-40页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的大量提取与纯化 | 第40-42页 |
| ·pGEX-4T-1-Ii诱导表达条件的优化 | 第40-41页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的大量提取结果 | 第41-42页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的浓度测定 | 第42页 |
| ·兔抗鼠GST-Ii多克隆抗体效价测定及鉴定 | 第42-44页 |
| ·琼脂免疫双向扩散测定多抗效价结果 | 第42页 |
| ·ELISA测定多抗效价结果 | 第42-43页 |
| ·Western Blotting鉴定多抗特异性 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-56页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR扩增小鼠Ii基因 | 第45-46页 |
| ·重组载体pGEX-4T-1-Ii的构建及鉴定 | 第46-48页 |
| ·小鼠Ii基因DNA序列分析 | 第48-49页 |
| ·小鼠Ii基因的原核表达 | 第49-51页 |
| ·GST-Ii融合蛋白的大量提取与复性 | 第51-54页 |
| ·影响抗体制备的因素分析 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
