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绿僵菌侵染蝗虫差异糖蛋白及其酪氨酸蛋白磷酸酶在寄主血淋巴中的靶标蛋白分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
缩略词第12-13页
1 绪论第13-33页
   ·引言第13-14页
   ·研究背景第14-29页
     ·生物防治的概念与蝗虫生物防治的种类第14-17页
     ·病原真菌绿僵菌侵染寄主昆虫的过程第17-18页
     ·虫生真菌侵染致病机理第18-23页
     ·寄主的抵御作用第23-25页
     ·糖蛋白的生理功能及与动物疾病的关系第25-26页
     ·磷酸化蛋白的生理功能第26页
     ·蛋白组学在研究病原与寄主相互作用方面的进展第26-29页
   ·立题依据第29-30页
   ·研究目标和内容第30-31页
   ·整体设计思路第31-32页
   ·创新之处第32-33页
2 金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴生理生化特性研究第33-41页
   ·技术路线第33-34页
   ·材料与方法第34-37页
     ·供试菌株第34页
     ·主要仪器第34页
     ·主要试剂第34-36页
     ·产孢培养基第36页
     ·供试菌株培养及分生孢子油剂制备第36页
     ·东亚飞蝗接种CQMa102 及饲养第36页
     ·血淋巴采集与样品制备第36页
     ·游离氨基酸含量测定第36-37页
     ·蛋白质浓度测定第37页
     ·总蛋白 SDS-PAGE第37页
   ·结果与分析第37-39页
     ·CQMa102 侵染对东亚飞蝗的生理影响第37页
     ·CQMa102 侵染血淋巴游离氨基酸含量的影响第37-38页
     ·CQMa102 侵染对东亚飞蝗血淋巴蛋白质含量的影响第38-39页
     ·CQMa102 侵染对东亚飞蝗血淋巴蛋白质SDS-PAGE 图谱的影响第39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
3 病原真菌金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴糖蛋白差异表达研究第41-77页
   ·技术路线第41-42页
   ·材料和方法第42-48页
     ·主要仪器设备第42页
     ·主要化学试剂第42-43页
     ·主要溶液及配制第43-44页
     ·蝗虫血淋巴的收集第44页
     ·糖蛋白分离纯化第44-45页
     ·双向电泳样品制备第45页
     ·等电聚焦电泳第45-46页
     ·第二向电泳(SDS-PAGE)第46-47页
     ·凝胶染色第47页
     ·PDQuest 软件分析蛋白差异点第47页
     ·差异糖蛋白的鉴定第47-48页
   ·结果与分析第48-73页
     ·双向电泳重复性和稳定性分析第48-50页
     ·金龟子绿僵菌侵染昆虫血淋巴差异表达糖蛋白第50-52页
     ·差异表达糖蛋白肽质量指纹图谱分析第52-58页
     ·差异表达糖蛋白de novo 测序第58-73页
   ·讨论第73-76页
     ·影响东亚飞蝗血淋巴蛋白双向电泳质量的关键因素第73-74页
     ·关于鉴定出的三个差异表达糖蛋白的功能分析第74-75页
     ·关于差异蛋白的确定第75页
     ·基于MS/MS 的de novo 测序技术在未知蛋白鉴定中的应用第75-76页
   ·本章小结第76-77页
4 蝗虫血淋巴中绿僵菌PTPase 的靶标磷酸化蛋白分析第77-97页
   ·材料与方法第77-85页
     ·东亚飞蝗第77页
     ·主要仪器设备第77-78页
     ·主要试剂及配制第78-81页
     ·酸性磷酸酶活性及酪氨酸蛋白磷酸酶活性分析测定第81页
     ·绿僵菌PTPase 分离纯化第81-82页
     ·蝗虫血淋巴的收集第82页
     ·蝗虫血淋巴磷酸化蛋白的亲和层析第82-83页
     ·蛋白浓度的测定第83页
     ·蝗虫血淋巴与纯化的PTPase 作用第83页
     ·双向电泳第83-85页
     ·PDQUEST 软件分析蛋白差异点第85页
     ·肽指纹图谱分析第85页
   ·结果与分析第85-93页
     ·绿僵菌PTPase 的纯化第85-87页
     ·凝胶图谱匹配性分析第87-88页
     ·磷酸化蛋白差异点分析第88-89页
     ·差异点蛋白MALDI-TOF-MS/MS 质谱分析及比对结果第89-93页
   ·讨论第93-97页
     ·关于血淋巴中磷酸化蛋白的纯化第93页
     ·关于Toll-like receptors 的功能第93-94页
     ·关于Golgi autoantigen,golgin subfamily A member 4 (Trans-Golgi p230)类自身抗原第94-97页
5 主要研究结论及后续研究建议第97-101页
   ·主要研究结论第97-98页
     ·金龟子绿僵菌侵染进程中东亚飞蝗血淋巴生理生化特性研究第97页
     ·病原真菌金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴糖蛋白差异表达研究第97页
     ·蝗虫血淋巴中绿僵菌PTPase 的靶标磷酸化蛋白分析第97-98页
   ·后续工作建议第98-101页
     ·研究绿僵菌感染蝗虫总蛋白差异表达蛋白第98页
     ·研究感病昆虫差异表达糖蛋白的功能第98页
     ·研究PTPase 在活体蝗虫体内的靶标物质第98-99页
     ·研究感病蝗虫血淋巴差异磷酸化蛋白第99-101页
致谢第101-103页
参考文献第103-117页
附录第117页

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