摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
1 绪论 | 第13-33页 |
·引言 | 第13-14页 |
·研究背景 | 第14-29页 |
·生物防治的概念与蝗虫生物防治的种类 | 第14-17页 |
·病原真菌绿僵菌侵染寄主昆虫的过程 | 第17-18页 |
·虫生真菌侵染致病机理 | 第18-23页 |
·寄主的抵御作用 | 第23-25页 |
·糖蛋白的生理功能及与动物疾病的关系 | 第25-26页 |
·磷酸化蛋白的生理功能 | 第26页 |
·蛋白组学在研究病原与寄主相互作用方面的进展 | 第26-29页 |
·立题依据 | 第29-30页 |
·研究目标和内容 | 第30-31页 |
·整体设计思路 | 第31-32页 |
·创新之处 | 第32-33页 |
2 金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴生理生化特性研究 | 第33-41页 |
·技术路线 | 第33-34页 |
·材料与方法 | 第34-37页 |
·供试菌株 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-36页 |
·产孢培养基 | 第36页 |
·供试菌株培养及分生孢子油剂制备 | 第36页 |
·东亚飞蝗接种CQMa102 及饲养 | 第36页 |
·血淋巴采集与样品制备 | 第36页 |
·游离氨基酸含量测定 | 第36-37页 |
·蛋白质浓度测定 | 第37页 |
·总蛋白 SDS-PAGE | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-39页 |
·CQMa102 侵染对东亚飞蝗的生理影响 | 第37页 |
·CQMa102 侵染血淋巴游离氨基酸含量的影响 | 第37-38页 |
·CQMa102 侵染对东亚飞蝗血淋巴蛋白质含量的影响 | 第38-39页 |
·CQMa102 侵染对东亚飞蝗血淋巴蛋白质SDS-PAGE 图谱的影响 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
3 病原真菌金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴糖蛋白差异表达研究 | 第41-77页 |
·技术路线 | 第41-42页 |
·材料和方法 | 第42-48页 |
·主要仪器设备 | 第42页 |
·主要化学试剂 | 第42-43页 |
·主要溶液及配制 | 第43-44页 |
·蝗虫血淋巴的收集 | 第44页 |
·糖蛋白分离纯化 | 第44-45页 |
·双向电泳样品制备 | 第45页 |
·等电聚焦电泳 | 第45-46页 |
·第二向电泳(SDS-PAGE) | 第46-47页 |
·凝胶染色 | 第47页 |
·PDQuest 软件分析蛋白差异点 | 第47页 |
·差异糖蛋白的鉴定 | 第47-48页 |
·结果与分析 | 第48-73页 |
·双向电泳重复性和稳定性分析 | 第48-50页 |
·金龟子绿僵菌侵染昆虫血淋巴差异表达糖蛋白 | 第50-52页 |
·差异表达糖蛋白肽质量指纹图谱分析 | 第52-58页 |
·差异表达糖蛋白de novo 测序 | 第58-73页 |
·讨论 | 第73-76页 |
·影响东亚飞蝗血淋巴蛋白双向电泳质量的关键因素 | 第73-74页 |
·关于鉴定出的三个差异表达糖蛋白的功能分析 | 第74-75页 |
·关于差异蛋白的确定 | 第75页 |
·基于MS/MS 的de novo 测序技术在未知蛋白鉴定中的应用 | 第75-76页 |
·本章小结 | 第76-77页 |
4 蝗虫血淋巴中绿僵菌PTPase 的靶标磷酸化蛋白分析 | 第77-97页 |
·材料与方法 | 第77-85页 |
·东亚飞蝗 | 第77页 |
·主要仪器设备 | 第77-78页 |
·主要试剂及配制 | 第78-81页 |
·酸性磷酸酶活性及酪氨酸蛋白磷酸酶活性分析测定 | 第81页 |
·绿僵菌PTPase 分离纯化 | 第81-82页 |
·蝗虫血淋巴的收集 | 第82页 |
·蝗虫血淋巴磷酸化蛋白的亲和层析 | 第82-83页 |
·蛋白浓度的测定 | 第83页 |
·蝗虫血淋巴与纯化的PTPase 作用 | 第83页 |
·双向电泳 | 第83-85页 |
·PDQUEST 软件分析蛋白差异点 | 第85页 |
·肽指纹图谱分析 | 第85页 |
·结果与分析 | 第85-93页 |
·绿僵菌PTPase 的纯化 | 第85-87页 |
·凝胶图谱匹配性分析 | 第87-88页 |
·磷酸化蛋白差异点分析 | 第88-89页 |
·差异点蛋白MALDI-TOF-MS/MS 质谱分析及比对结果 | 第89-93页 |
·讨论 | 第93-97页 |
·关于血淋巴中磷酸化蛋白的纯化 | 第93页 |
·关于Toll-like receptors 的功能 | 第93-94页 |
·关于Golgi autoantigen,golgin subfamily A member 4 (Trans-Golgi p230)类自身抗原 | 第94-97页 |
5 主要研究结论及后续研究建议 | 第97-101页 |
·主要研究结论 | 第97-98页 |
·金龟子绿僵菌侵染进程中东亚飞蝗血淋巴生理生化特性研究 | 第97页 |
·病原真菌金龟子绿僵菌侵染后东亚飞蝗血淋巴糖蛋白差异表达研究 | 第97页 |
·蝗虫血淋巴中绿僵菌PTPase 的靶标磷酸化蛋白分析 | 第97-98页 |
·后续工作建议 | 第98-101页 |
·研究绿僵菌感染蝗虫总蛋白差异表达蛋白 | 第98页 |
·研究感病昆虫差异表达糖蛋白的功能 | 第98页 |
·研究PTPase 在活体蝗虫体内的靶标物质 | 第98-99页 |
·研究感病蝗虫血淋巴差异磷酸化蛋白 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-117页 |
附录 | 第117页 |