摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
1 绪论 | 第11-25页 |
·硫氧还蛋白的研究概况 | 第11-23页 |
·硫氧还蛋白的发现及分类 | 第11-13页 |
·硫氧还蛋白的结构特点与调控机制 | 第13-15页 |
·硫氧还蛋白的功能 | 第15-23页 |
·盐胁迫对植物的伤害机制 | 第23-24页 |
·本课题的主要研究背景,目的及意义 | 第24-25页 |
2 拟南芥Trxs基因的克隆及在逆境下的表达特性分析 | 第25-38页 |
·材料和试剂 | 第25-26页 |
·菌株和载体 | 第25页 |
·植物材料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·拟南芥Trxs基因的克隆与分析 | 第26-29页 |
·拟南芥Trxs基因的克隆 | 第26-29页 |
·拟南芥Trxs家族基因序列分析 | 第29页 |
·Northern blot检测逆境下AtTrxs基因的转录表达特性 | 第29-30页 |
·拟南芥悬浮细胞系的逆境处理 | 第29页 |
·探针设计与标记 | 第29页 |
·Northern blot检测 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-37页 |
·拟南芥Trxs基因的克隆 | 第30-31页 |
·拟南芥Trxs家族基因序列分析结果 | 第31-33页 |
·在逆境下,拟南芥Trxs基因转录水平的表达特性分析 | 第33-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
3 拟南芥硫氧还蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第38-46页 |
·材料与方法 | 第38-42页 |
·材料与试剂 | 第38-39页 |
·原核表达载体pQE-30-AtTrxs构建及转化 | 第39页 |
·His-AtTrx h1,His-30-AtTrx h5融合蛋白的小量诱导表达 | 第39-40页 |
·His-AtTrx h1,His-30-AtTrx h5融合蛋白的大量表达与纯化 | 第40页 |
·His-AtTrx h1,His-30-AtTrx h5融合蛋白浓度测定 | 第40页 |
·His-AtTrx h1,His-30-AtTrx h5融合蛋白还原性测定 | 第40-41页 |
·多克隆抗体的的制备 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-44页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第42页 |
·重组融合蛋白在E.coli M15中的表达 | 第42页 |
·His-AtTrx h1,His-AtTrx h5融合蛋白在M15中的大量表达与纯化 | 第42-44页 |
·His-AtTrx h1,His-AtTrx h5融合蛋白浓度测定结果 | 第44页 |
·His-AtTrx h1,His-AtTrx h5融合蛋白的活性测定结果 | 第44页 |
·抗体效价测定结果 | 第44页 |
·本章小结 | 第44-46页 |
4 转AtTrxs基因拟南芥对逆境适应性 | 第46-57页 |
·材料与试剂 | 第46页 |
·材料 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·方法 | 第46-51页 |
·植物表达载体pB1121-AtTrxs的构建及转化 | 第46-47页 |
·真空浸润法转基因 | 第47-48页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第48-49页 |
·转基因拟南芥中Trxs基因在蛋白水平上的表达 | 第49-50页 |
·转AtTrxs基因拟南芥植株的抗盐碱性分析 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·植物表达载体pB1121-AtTrxs的构建 | 第51页 |
·卡那霉抗性筛选转基因拟南芥 | 第51页 |
·转A.thaliana Trxs基因的拟南芥植株PCR检测 | 第51-53页 |
·转A.thaliana Trxs基因的拟南芥植株Northern杂交检测 | 第53页 |
·转基因拟南芥中Trxs基因在蛋白水平上的表达 | 第53页 |
·转拟南芥Trxs基因的拟南芥植株的抗盐碱性分析 | 第53-55页 |
·本章小结 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
附录 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |