| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-19页 |
| ·RNA沉默简介 | 第8-15页 |
| ·RNA沉默的发现与发展 | 第8-9页 |
| ·RNA沉默的机制 | 第9-15页 |
| ·siRNA的合成 | 第15-17页 |
| ·化学合成法 | 第15页 |
| ·体外转录合成法 | 第15-16页 |
| ·siRNA表达载体在细胞中表达siRNA | 第16页 |
| ·siRNA表达框架在细胞中表达siRNA | 第16-17页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第17页 |
| ·本实验的研究背景与目的 | 第17-19页 |
| Ⅱ 实验材料 | 第19-23页 |
| ·供试病毒、菌株、质粒及细胞系 | 第19页 |
| ·实验所用试剂 | 第19-23页 |
| ·细菌培养培养基 | 第19页 |
| ·细胞培养基 | 第19-20页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第20页 |
| ·酶及其它常规试剂 | 第20-21页 |
| ·常用溶液及配制 | 第21-23页 |
| Ⅲ 实验方法 | 第23-29页 |
| ·病毒的扩增 | 第23页 |
| ·含AcMNPV p35基因的Ac Bacmid DNA的制备 | 第23-24页 |
| ·AcMNPVp35基因片段的扩增与纯化回收 | 第24-25页 |
| ·PCR反应体系 | 第24页 |
| ·PCR反应热循环程序 | 第24页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第24-25页 |
| ·重组pLITMUS-p35的制备 | 第25-27页 |
| ·pLITMUS28i质粒的制备 | 第25页 |
| ·双酶切质粒pLITMUS28i DNA | 第25页 |
| ·pLITMUS-p35的构建 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
| ·脂质体转染效率的检测。 | 第27页 |
| ·dsRNA的体外转录 | 第27页 |
| ·dsRNA转染AcMNPV感染的sf9细胞 | 第27-28页 |
| ·细胞凋亡的DAPI检测 | 第28-29页 |
| Ⅳ 实验结果分析及其讨论 | 第29-34页 |
| ·实验结果及分析 | 第29-32页 |
| ·AcMNPVp35基因片段的克隆及鉴定 | 第29页 |
| ·AcMNPVp35基因片段dsRNA的体外制备 | 第29-30页 |
| ·脂质体转染效率的检测 | 第30-31页 |
| ·dsRNA转染AcMNPV感染的sf9细胞 | 第31-32页 |
| ·结果讨论 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-38页 |
| 致谢 | 第38页 |