| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一部分 前言 | 第12-18页 |
| 1 副结核病的危害 | 第12-13页 |
| 2 副结核分枝杆菌 | 第13-15页 |
| 3 副结核分枝杆菌与克隆病 | 第15-16页 |
| 4 诊断与防治 | 第16页 |
| 5 副结核分枝杆菌核酸疫苗 | 第16-17页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 实验内容 | 第18-46页 |
| 实验一 副结核分枝杆菌SOD基因的克隆及序列分析 | 第18-32页 |
| 1 引言 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18-21页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·克隆载体 | 第18-19页 |
| ·工具酶 | 第19页 |
| ·核酸分子量标准 | 第19页 |
| ·试剂盒 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·溶液 | 第19-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·副结核分枝杆菌的培养 | 第21页 |
| ·染色体基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第22页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第22-23页 |
| ·目的基因与质粒载体的连接 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第23-24页 |
| ·连接产物的转化 | 第24页 |
| ·质粒的小量提取 | 第24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-29页 |
| ·副结核分枝杆菌染色体基因组DNA | 第25-26页 |
| ·目的基因的PCR扩增产物 | 第26页 |
| ·重组克隆的筛选及鉴定 | 第26页 |
| ·目的基因的序列测定与分析 | 第26-29页 |
| 4 讨论 | 第29-32页 |
| ·目的基因的选择 | 第29-30页 |
| ·DNA聚合酶的选择 | 第30页 |
| ·PCR扩增条件的优化 | 第30页 |
| ·关于基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第31-32页 |
| 实验二 牛分枝杆菌主要保护性抗原基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-46页 |
| 1 引言 | 第32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-39页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·质粒与载体 | 第32页 |
| ·工具酶 | 第32页 |
| ·核酸分子量标准 | 第32-33页 |
| ·蛋白质分子量标准 | 第33页 |
| ·试剂盒 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·蛋白印迹转移膜 | 第33页 |
| ·溶液 | 第33-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第35-37页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第37页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第37页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第37-38页 |
| ·Western blot分析 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-43页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第39页 |
| ·阳性重组表达质粒的鉴定 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第39-42页 |
| ·Western blot分析 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·表达系统的选择 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第44页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第44页 |
| ·关于免疫印迹 | 第44页 |
| ·目的蛋白的活性 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 缩略语表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 个人简介 | 第54页 |