| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-17页 |
| 第一章 鸡传染性支气管炎研究进展 | 第17-26页 |
| ·IB 病原学研究 | 第17-19页 |
| ·病原分类 | 第17-18页 |
| ·血清型 | 第18页 |
| ·理化特性 | 第18页 |
| ·培养特性 | 第18-19页 |
| ·生物学活性 | 第19页 |
| ·IB 的流行病学 | 第19页 |
| ·IB 的临床症状 | 第19-20页 |
| ·IB 的病理变化 | 第20页 |
| ·IB 的诊断 | 第20-22页 |
| ·IBV 的分离鉴定 | 第20页 |
| ·IBV 的血清学诊断 | 第20-21页 |
| ·IBV 的分子生物学诊断 | 第21-22页 |
| ·IB 的防治技术 | 第22-26页 |
| ·疫苗 | 第22-24页 |
| ·免疫接种 | 第24-25页 |
| ·综合措施 | 第25-26页 |
| 第二章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展 | 第26-37页 |
| ·IBV 的基因组结构 | 第26-27页 |
| ·IBV 的合成 | 第27-31页 |
| ·IBV 基因组RNA 的复制与转录 | 第27-30页 |
| ·IBV 病毒粒子的装配、运输与出芽 | 第30-31页 |
| ·IBV 结构蛋白 | 第31-33页 |
| ·纤突（S）蛋白 | 第31页 |
| ·膜（M）蛋白 | 第31-32页 |
| ·核（N）蛋白 | 第32页 |
| ·小膜蛋白（sM 蛋白或3c 蛋白或E 蛋白） | 第32-33页 |
| ·IBV 非结构蛋白 | 第33-34页 |
| ·IBV 的遗传变异 | 第34-37页 |
| ·IBV 分子遗传变异的机理 | 第34页 |
| ·IBV 分子遗传变异的影响因素 | 第34-37页 |
| 第三章鸡传染性支气管炎病毒N、M 基因及其编码蛋白的研究进展 | 第37-47页 |
| ·编码IBV N 蛋白的MRNA 结构特征 | 第37-38页 |
| ·IBV N 蛋白的生物学功能 | 第38-39页 |
| ·IBV N 蛋白遗传变异 | 第39-40页 |
| ·N 基因的免疫原性 | 第40-42页 |
| ·IBV 抗原表位在N 蛋白上的定位 | 第40页 |
| ·IBV N 蛋白与免疫 | 第40-41页 |
| ·N 基因的原核与真核表达及表达蛋白的免疫原性 | 第41-42页 |
| ·IBV N 基因及其编码产物在诊断中的应用 | 第42-43页 |
| ·IBV N 基因在诊断中的应用 | 第42-43页 |
| ·N 蛋白及其单抗在诊断中的应用 | 第43页 |
| ·IBV M 基因及编码的M 蛋白结构特征与功能 | 第43-44页 |
| ·IBV M 蛋白遗传变异 | 第44-45页 |
| ·IBV M 蛋白与免疫 | 第45-46页 |
| ·IBV M 蛋白单克隆抗体研究 | 第46-47页 |
| 第四章鸡传染性支气管炎病毒HN99 株N 基因的克隆及分子遗传变异分析 | 第47-68页 |
| ·材料 | 第47-49页 |
| ·毒株 | 第47页 |
| ·SPF 鸡胚 | 第47页 |
| ·载体与菌株 | 第47页 |
| ·工具酶与试剂 | 第47-48页 |
| ·引物 | 第48页 |
| ·IBV 参考毒株名称及GenBank 登录号 | 第48页 |
| ·培养基的配制 | 第48页 |
| ·常用溶液的配制 | 第48页 |
| ·小量碱裂解法制备质粒所用溶液 | 第48-49页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第49页 |
| ·其它溶液的配制 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-53页 |
| ·IBV HN99 株病毒增殖与RNA 的提取 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR 扩增IBV HN99 株N 基因片段 | 第50-51页 |
| ·PCR 产物的回收、纯化与克隆 | 第51页 |
| ·转化 | 第51-52页 |
| ·碱裂解法提取质粒pMD18-T-N | 第52页 |
| ·重组质粒pMD18-T-N 的PCR 及双酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·遗传变异分析 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-66页 |
| ·HN99 株N 基因的扩增 | 第53-54页 |
| ·pMD18-T-N 重组质粒鉴定 | 第54页 |
| ·IBV HN99 株N 基因的核苷酸序列测定 | 第54-55页 |
| ·IBV 不同毒株N 基因的同源性分析 | 第55-56页 |
| ·IBV HN99 株N 基因的遗传变异分析 | 第56-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第五章 鸡传染性支气管炎病毒HN99 株、W 株M 基因的克隆及分子遗传变异分析 | 第68-85页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·毒株 | 第68页 |
| ·SPF 鸡胚 | 第68页 |
| ·载体与菌株 | 第68-69页 |
| ·工具酶与试剂 | 第69页 |
| ·引物 | 第69页 |
| ·IBV M 基因参考毒株名称及GenBank 登录号 | 第69页 |
| ·培养基的配制及常用溶液的配制 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| ·IBV HN99 株、W 株病毒增殖与RNA 的提取 | 第69-70页 |
| ·RT-PCR 扩增IBV HN99 株、W 株M 基因片段 | 第70页 |
| ·M 基因PCR 产物的回收、纯化与克隆 | 第70-71页 |
| ·转化 | 第71页 |
| ·重组质粒pMD18-T-M(HN99)、pMD18-T-M(W)的提取 | 第71页 |
| ·阳性重组子的PCR 及双酶切鉴定 | 第71-72页 |
| ·M 基因测序 | 第72页 |
| ·遗传变异分析 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-82页 |
| ·HN99 株、W 株M 基因的扩增 | 第72-73页 |
| ·重组质粒pMD18-T-M(HN99)、pMD18-T-M(W)鉴定 | 第73页 |
| ·IBV HN99 株、W 株M 基因的核苷酸序列测定 | 第73-74页 |
| ·IBV 不同毒株M 基因的同源性分析 | 第74-76页 |
| ·IBV HN99 株、W 株M 基因的遗传变异分析 | 第76-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-85页 |
| 第六章鸡传染性支气管炎HN99 株M 基因在昆虫-杆状病毒系统中的表达 | 第85-99页 |
| ·材料 | 第85-87页 |
| ·引物设计与合成 | 第85页 |
| ·载体和菌株 | 第85-86页 |
| ·细胞系及其培养基 | 第86页 |
| ·酶和其他分子生物学试剂 | 第86-87页 |
| ·M13 通用引物 | 第87页 |
| ·细菌培养基 | 第87页 |
| ·主要仪器设备 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-93页 |
| ·杆状病毒Bac to Bac 表达系统操作流程 | 第87页 |
| ·Bacmid-egfp 的构建流程 | 第87-88页 |
| ·IBV HN99 株M 基因的PCR 扩增及产物回收 | 第88-89页 |
| ·重组质粒pFBDM-MBP/M（简称pF-MBP/M）的构建 | 第89-90页 |
| ·转座 | 第90页 |
| ·重组转座子的鉴定 | 第90-91页 |
| ·转染 | 第91-92页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第92页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第92-93页 |
| ·重组蛋白Western Blot 检测 | 第93页 |
| ·结果 | 第93-97页 |
| ·pF-MBP/M 质粒的筛选与酶切鉴定 | 第93-94页 |
| ·重组转座子PCR 鉴定 | 第94-95页 |
| ·转染后细胞病变及绿色荧光观察 | 第95页 |
| ·重组杆状病毒的PCR 鉴定 | 第95-96页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 和Western Blot 分析 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| ·小结 | 第98-99页 |
| 第七章鸡传染性支气管炎病毒HN99 株N 基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性检测 | 第99-112页 |
| ·材料 | 第99-103页 |
| ·毒株、血清及实验动物 | 第99-100页 |
| ·引物设计与合成 | 第100页 |
| ·载体、菌株及质粒 | 第100-101页 |
| ·主要试剂 | 第101-102页 |
| ·蛋白非变性纯化所用主要溶液 | 第102页 |
| ·ELISA 和western blot 所用主要溶液 | 第102页 |
| ·主要仪器 | 第102-103页 |
| ·方法 | 第103-106页 |
| ·IBV HN99 N 基因的PCR 扩增及产物回收 | 第103页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第103-104页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的表达及鉴定 | 第104-105页 |
| ·IBV HN99 核蛋白的纯化 | 第105页 |
| ·核蛋白多克隆抗体的制备 | 第105页 |
| ·核蛋白多克隆抗体与不同IBV 的反应性 | 第105-106页 |
| ·结果 | 第106-110页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第106页 |
| ·重组核蛋白基因的表达和鉴定 | 第106-108页 |
| ·IBN HN99 核蛋白的纯化 | 第108-109页 |
| ·IBN HN99 核蛋白多克隆抗体与不同IBV 的反应性 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 结论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 作者简介 | 第125页 |
