| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 论文正文：NIRF 与P53 相互作用研究 | 第12-94页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 主要仪器设备和试剂的配制 | 第14-19页 |
| 1 主要的仪器设备 | 第14-15页 |
| 2 主要试剂的配制 | 第15-19页 |
| ·质粒构建和蛋白表达相关试剂 | 第15-16页 |
| ·蛋白免疫印迹试剂 | 第16-17页 |
| ·GST Pull-down, IP 和泛素化有关试剂 | 第17-19页 |
| 第一章 GST-P53 质粒构建和融合蛋白的表达、分离和纯化 | 第19-35页 |
| 1 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·设备 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| 2 结果 | 第27-31页 |
| ·pGEX-4T-1-P53 原核表达质粒的构建及鉴定 | 第27页 |
| ·融合蛋白的考马斯亮蓝和western 免疫印迹方法鉴定 | 第27-28页 |
| ·融合蛋白的复性(recovery)和去垢剂(detergent)的选择 | 第28-29页 |
| ·IPTG 作用时间对融合蛋白的影响 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-35页 |
| 第二章 NIRF 与P53 蛋白在细胞内的相互作用分析 | 第35-49页 |
| 1 材料和方法 | 第36-41页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| ·NIRF 在真核细胞中的表达 | 第41-42页 |
| ·NIRF 在细胞内(in vivo)与P53 的相互结合 | 第42-44页 |
| ·NIRF 对细胞内P53 的泛素化（in vivo ubiquitination） | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 第三章 NIRF 与P53 蛋白在细胞外的相互作用分析 | 第49-63页 |
| 1 材料和方法 | 第50-53页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·NIRF 在真核细胞中的表达 | 第53-54页 |
| ·GST-P53 蛋白的表达和纯化 | 第54-56页 |
| ·NIRF 在细胞外（in vitro）与P53 的相互结合(GST Pull-down ) | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 第四章 NIRF 在体外对P53 蛋白的泛素化作用分析 | 第63-74页 |
| 1 材料和试剂 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·设备 | 第63-64页 |
| 2 方法 | 第64-66页 |
| ·GST-NIRF 和GST-P53 蛋白的制备 | 第64-65页 |
| ·体外泛素化反应（in vitro ubiquitination） | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-70页 |
| ·GST-NIRF 和GST-P53 的表达和纯化 | 第66-68页 |
| ·NIRF 对P53 的细胞外泛素化 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第五章 NIRF 蛋白的结构生物信息学分析 | 第74-94页 |
| 1 方法 | 第75页 |
| 2 结果 | 第75-91页 |
| ·搜寻同源的三维结构数据 | 第75-77页 |
| ·N-端区域的结构特点分析 | 第77-81页 |
| ·C-端区域的结构信息分析 | 第81-91页 |
| 3 讨论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 结论 | 第94-96页 |
| 文献综述 | 第96-168页 |
| 致谢 | 第168-169页 |
| 攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文 | 第169页 |
