| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-18页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·结核病流行状况 | 第9-10页 |
| ·结核分枝杆菌PCR检测方法的研究进展 | 第10-12页 |
| ·PCR检测结核分枝杆菌的敏感性和特异性 | 第10页 |
| ·PCR检测活菌 | 第10-11页 |
| ·PCR用于结核杆菌型的检测 | 第11页 |
| ·PCR检测耐药性结核分枝杆菌 | 第11-12页 |
| ·PCR在检测鹿结核杆菌的应用 | 第12页 |
| ·HSP60基因研究进展 | 第12-18页 |
| ·HSP60的分布及结构 | 第12-13页 |
| ·HSP60与疾病的关系 | 第13页 |
| ·HSP60的免疫学特征 | 第13-14页 |
| ·HSP60作用机理 | 第14-16页 |
| ·HSP60生物学功能 | 第16-18页 |
| 2 PCR技术检测鹿结核病 | 第18-24页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·标准菌来源 | 第18页 |
| ·被检血液样品 | 第18页 |
| ·酶及相关试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂的配置 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·复合型结核 PCR检测 | 第19-20页 |
| ·人型结核 PCR检测 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-22页 |
| ·复合型结核杆菌的检测 | 第20-21页 |
| ·结核分枝杆菌的检测 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| ·PCR检测结核病 | 第22页 |
| ·鹿结核病的感染状况 | 第22-23页 |
| ·鹿结核病的防治 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| 3 鹿结核分离株HSP65基因克隆及序列测定 | 第24-37页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·克隆菌种、质粒及结核分枝杆菌总DNA | 第24页 |
| ·工具酶和试剂 | 第24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| ·试剂配制 | 第24-25页 |
| ·PCR引物 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·PCR扩增目的基因HSP65 | 第25页 |
| ·PCR扩增目的片段的纯化 | 第25-26页 |
| ·HSP65基因克隆载体的构建 | 第26-27页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第27-28页 |
| ·原核表达重组质粒pGEX-6p-1-HSP65的构建 | 第28-29页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第29-30页 |
| ·测序质粒pMD18-T-HSP65的鉴定结果 | 第30页 |
| ·原核重组质粒pGEX-6p-1-HSP65的鉴定 | 第30-31页 |
| ·核苷酸序列测定及同源性分析 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·PCR | 第34页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 4 HSP65基因在大肠杆菌中的诱导表达及免疫原性测定 | 第37-43页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·宿主菌 | 第37页 |
| ·主要工具酶和试剂 | 第37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·试剂配制 | 第37-38页 |
| ·pGEX-6p-1-HSP65重组质粒的大量提取 | 第38页 |
| ·重组质粒转化E. coli BL21感受态 | 第38页 |
| ·HSP65重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·HSP65表达蛋白活性测定 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·重组菌诱导表达及SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·HSP65表达蛋白抗原性 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·HSP65基因的原核表达 | 第41-42页 |
| ·HSP65蛋白免疫活性 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录 A | 第51-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 独创性声明 | 第55页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第55页 |
