| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 主要符号表 | 第5-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-37页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·菌种和质粒 | 第21页 |
| ·酶类及其它相关试剂 | 第21页 |
| ·主要试剂及配制 | 第21-23页 |
| ·RNA提取、变性电泳相关试剂 | 第21-22页 |
| ·TAE电泳缓冲液 | 第22-23页 |
| ·克隆转化相关试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·镰形扇头蜱的实验室饲养 | 第24-25页 |
| ·人工兔体饲养 | 第24页 |
| ·离开宿主阶段的培养 | 第24-25页 |
| ·镰形扇头蜱总RNA提取及鉴定 | 第25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·RNA变性电泳 | 第25页 |
| ·镰形扇头蜱金属蛋白酶基因EST序列的获取 | 第25-26页 |
| ·镰形扇头蜱金属蛋白酶基因的克隆 | 第26-32页 |
| ·EST序列的分析 | 第26页 |
| ·5′RACE法克隆目的基因的5′端 | 第26-30页 |
| ·金属蛋白酶全长基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·RT-PCR分析金属蛋白酶在镰形扇头蜱的分布情况 | 第32-33页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第32页 |
| ·RNA抽提效果鉴定 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·RT—PCR | 第32-33页 |
| ·金属蛋白酶基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| ·核酸序列的基本性质分析 | 第33页 |
| ·蛋白质功能的初步预测 | 第33页 |
| ·镰形扇头蜱金属蛋白酶基因的原核表达 | 第33-35页 |
| ·原核表达载体pET-32a空质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·目的基因双酶切位点的加入 | 第34页 |
| ·表达重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒转化宿主菌BL21 | 第35页 |
| ·镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂的生物信息学分析 | 第35-37页 |
| ·核酸的基本性质分析 | 第35-36页 |
| ·蛋白质功能的初步预测 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·镰形扇头蜱的实验室饲养 | 第37页 |
| ·镰形扇头蜱总RNA提取结果 | 第37-38页 |
| ·原始序列 | 第38页 |
| ·目的基因5’端的克隆结果 | 第38-40页 |
| ·金属蛋白酶全长基因的克隆 | 第40页 |
| ·RT-PCR分析金属蛋白酶在镰形扇头蜱中的表达分布 | 第40-43页 |
| ·金属蛋白酶基因的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·核酸序列的基本性质分析 | 第43-44页 |
| ·蛋白质的生物学功能预测 | 第44-46页 |
| ·关于丝氨酸蛋白酶抑制剂的生物信息学预测结果 | 第46-49页 |
| ·核酸序列的基本性质分析 | 第46页 |
| ·蛋白质的生物学功能预测 | 第46-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-52页 |
| ·蜱的实验室饲养 | 第49页 |
| ·RNA提取及检测 | 第49页 |
| ·RNA质量对RACE方法的影响 | 第49-50页 |
| ·其他条件对RACE实验的影响 | 第50页 |
| ·T—PCR方法在分析目的基因表达变化中的应用 | 第50-51页 |
| ·生物信息学在基因和蛋白质功能研究中的应用 | 第51页 |
| ·MP在镰形扇头蜱体内可能的生理作用 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 论文独创性声明 | 第59页 |
| 论文使用授权声明 | 第59-60页 |