| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩写一览表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-36页 |
| ·盐胁迫和植物耐盐机理的研究进展 | 第13-19页 |
| ·盐胁迫下植物的信号转导途径与应答基因 | 第13-15页 |
| ·植物的盐耐受性反应 | 第15-16页 |
| ·植物耐盐基因工程 | 第16-19页 |
| ·小盐芥的研究背景 | 第19-21页 |
| ·盐胁迫的研究中的模式植物 | 第19页 |
| ·选择小盐芥 | 第19-21页 |
| ·转录因子研究背景 | 第21-27页 |
| ·植物转录因子的结构 | 第21-23页 |
| ·转录因子研究方法 | 第23-25页 |
| ·逆境信号传导过程中的转录因子 | 第25-27页 |
| ·锌指蛋白研究进展 | 第27-32页 |
| ·锌指蛋白的结构特点及分类 | 第27页 |
| ·植物TFⅢA类型锌指蛋白 | 第27-29页 |
| ·植物TFⅢA类型锌指蛋白的功能 | 第29-32页 |
| ·基因克隆的策略及RACE技术介绍 | 第32-36页 |
| ·EST策略 | 第32-33页 |
| ·RACE技术 | 第33-36页 |
| 第二章 小盐芥锌指蛋白ThZF1基因的克隆 | 第36-50页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·植物材料和E.coli菌株 | 第36页 |
| ·质粒载体及涉及序列 | 第36页 |
| ·PCR引物 | 第36-37页 |
| ·工具酶及分子量标准 | 第37页 |
| ·试剂盒 | 第37页 |
| ·杂交膜及放射性同位素 | 第37页 |
| ·主要化学试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·DNA和蛋白质序列分析软件 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-42页 |
| ·组织总RNA提取(小量法) | 第37-38页 |
| ·总RNA质量及浓度测定 | 第38页 |
| ·RT-PCR | 第38-39页 |
| ·RACE方法 | 第39-40页 |
| ·PCR产物的纯化和回收 | 第40-41页 |
| ·连接反应 | 第41页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·重组质粒的转化 | 第41页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·酶切反应 | 第42页 |
| ·PCR产物及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第42页 |
| ·DNA序列测定 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-48页 |
| ·RNA的质量检测结果 | 第42页 |
| ·ThZF1中间片段的获得 | 第42-43页 |
| ·3'RACE片段的获得 | 第43-44页 |
| ·5'RACE片段的获得 | 第44-45页 |
| ·全序列的拼接与分析 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·ThZF1 cDNA的克隆 | 第48-49页 |
| ·ThZF1属于ZPT亚家族成员 | 第49-50页 |
| 第三章 ThZF1的表达特性分析 | 第50-57页 |
| ·材料与方法 | 第50-53页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-55页 |
| ·干旱和盐胁迫诱导了ThZF1基因的表达 | 第53-54页 |
| ·ThZF1-GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 ThZF1的转录因子功能分析 | 第57-69页 |
| ·转录激活活性分析 | 第57-60页 |
| ·载体构建 | 第57页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第57页 |
| ·酵母热击转化 | 第57-58页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-59页 |
| ·相关溶液配制 | 第59-60页 |
| ·烟草瞬时表达分析 | 第60-63页 |
| ·载体构建 | 第60页 |
| ·阳性农杆菌的制备和转化 | 第60-61页 |
| ·瞬时表达及GUS活性分析 | 第61-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-63页 |
| ·DNA结合功能分析 | 第63-68页 |
| ·载体构建 | 第63页 |
| ·蛋白表达和纯化 | 第63-65页 |
| ·探针制备 | 第65页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第65-66页 |
| ·结果 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| 第五章 转ThZF1基因拟南芥耐盐耐旱性研究 | 第69-78页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·植物材料及胁迫处理 | 第69页 |
| ·工程菌与质粒载体 | 第69页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第69页 |
| ·常用培养基 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第70页 |
| ·农杆菌的转化 | 第70页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化(真空渗入法) | 第70页 |
| ·基因组DNA的提取(SDS法) | 第70-71页 |
| ·阳性株的鉴定 | 第71-72页 |
| ·转基因拟南芥的离体叶片的失水速率测定 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-76页 |
| ·真核表达载体pCAMBIA1301-ThZF1构建与鉴定 | 第72-73页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第73页 |
| ·转基因拟南芥的鉴定 | 第73-74页 |
| ·转基因拟南芥的表型分析 | 第74-75页 |
| ·转基因拟南芥的离体叶片的干旱分析 | 第75页 |
| ·ThZF1的下游基因表达分析 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 第六章 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 常用培养基和溶液的配制 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简历 | 第91页 |