| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 绪论 | 第8-12页 |
| 正文 | 第12-40页 |
| 1.材料、试剂及仪器 | 第12-16页 |
| ·实验材料 | 第12页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第12-14页 |
| ·主要实验仪器 | 第14-16页 |
| 2.实验思路及技术路线图 | 第16-17页 |
| 3.实验方法 | 第17-25页 |
| ·pGEX-4T-3质粒的酶切鉴定 | 第17-18页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第19-21页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第21-22页 |
| ·目的蛋白的发酵表达及表达条件的动力学分析 | 第22-23页 |
| ·包涵体形式的目的蛋白的处理 | 第23页 |
| ·重组vasostatin片段融合蛋白的纯化和凝血酶裂解 | 第23-25页 |
| ·细胞活性检测 | 第25页 |
| 4 实验结果 | 第25-33页 |
| ·载体质粒pGEX-4T-3的酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第26页 |
| ·重组菌株的构建与鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组片段的诱导表达 | 第27页 |
| ·目的蛋白的发酵表达及表达条件动力学分析 | 第27-29页 |
| ·包涵体的溶解和复性 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的纯化和凝血酶切割 | 第30-31页 |
| ·Vasostatin片段对血管内皮细胞的抑制效应 | 第31-33页 |
| 5 实验讨论 | 第33-40页 |
| ·实验设计的理论根据 | 第33-34页 |
| ·表达系统的选择 | 第34页 |
| ·表达质粒的选择 | 第34-35页 |
| ·解决包涵体形成的策略初步探讨 | 第35-37页 |
| ·GST融合蛋白的亲和层析纯化 | 第37-38页 |
| ·MTT法检测目的片段对血管内皮细胞增殖的抑制作用 | 第38-39页 |
| ·工作展望 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-43页 |
| 参考文献表 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-54页 |
| 1.Vasostatin 120-180的基因序列及酶切位点 | 第48-50页 |
| 2.pGEX-4T-3/vasostatin-A测序图谱 | 第50-51页 |
| 3.pGEX-4T-3/vasostatin-A测序图谱 | 第51-52页 |
| 4.pGEX-4T-3/vasostatin-A测序图谱 | 第52-53页 |
| 5.pGEX-4T-3/vasostatin-A-C测序图谱 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
