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水稻黄单胞Xanthomonas oryzae pv. oryzicola RS105 LPS合成基因簇的功能分析

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-17页
文献综述第17-81页
 第一章 植物病原细菌及水稻黄单胞致病相关基因的研究进展第17-39页
  ☆ Xanthimonas oryzae pv.oryzae无毒基因(avr gene)及其产物第18-22页
  ☆ Hrp基因第22-24页
  ☆ 鞭毛第24-28页
  ☆ 生物膜第28-32页
  ☆ 胞外多糖第32-34页
  ☆ 胞外酶第34-35页
  ☆ LPS在病害发生中的作用第35-39页
 第二章 脂多糖生物糖合成第39-64页
  ☆ 脂多糖引言第39-40页
  ☆ LPS结构第40-43页
  ☆ 核苷糖前体合成途径和O抗原组装基因第43-58页
  ☆ 糖基转移酶和O-单元形成第58-60页
  ☆ O-抗原加工、转运(processing)基因第60-62页
  ☆ O-抗原基因族的来源和维持第62-64页
 第三章 脂多糖的运输第64-81页
  ☆ 引言第64-66页
  ☆ 生物合成O-特异的多糖第66-78页
   △ 起始阶段第67-71页
   △ 延伸/转运/聚合第71-76页
   △ 连接反应第76-77页
   △ Und-PP的再循环第77-78页
  ☆ LPS的细胞表面定位第78-80页
  ☆ 未来研究工作的重点第80-81页
研究报告第81-192页
 第一章 恢复M12(RS105)EPS~-Path~-表型的阳性克隆P35亚克隆分析第81-122页
  1 材料与方法第85-99页
   ·供试菌株与质粒第85-87页
   ·培养条件和抗生素第87页
   ·生长曲线和毒性实验第87-88页
   ·DNA操作和功能互补第88-95页
   ·LPS分析第95-97页
   ·DNA序列测定和分析第97页
   ·菌落表型观察和游动性测定第97页
   ·Southern杂交第97-99页
  2 结果与分析第99-119页
   ·化学突变体的获得第99页
   ·阳性克隆的筛选第99-100页
   ·亚克隆分析第100-105页
   ·来源于RS105,PX099的其他同类突变体的序列分析第105-119页
   ·突变体脂多糖的检测第119页
  3 讨论第119-122页
 第二章 恢复M12功能的阳性克隆P80内orfs的序列分析第122-168页
  1 材料与方法第127-128页
   ·研究序列的来源第127页
   ·同源序列搜索第127页
   ·蛋白生化参数的分析第127-128页
   ·蛋白保守顺序和结构的预测第128页
  2 序列分析与结果第128-161页
   ·P80包含基因簇与Xanthomonaslps合成基因簇的比较第128-130页
   ·7个LPS合成相关蛋白的分子量,等电点,G+C含量的计算和亚细胞定位第130页
   ·7个蛋白可能存在的修饰位点的预测第130-132页
   ·蛋白功能相关预测第132-161页
  3 讨论第161-168页
   ·Xooc LPS合成基因高度变异,基因簇通过水平转移(Hor izontal Gene Transfer)获得,具非典型的G+C含量第161-163页
   ·WxoeA,WxocB和WxocC三个基因产物功能以鼠李糖为底物第163-164页
   ·Wzt是ABC-转运系统的ATP-结合蛋白,WxocE和WxocD是甲基转移酶.WxocF是乙酰基转移酶第164-167页
   ·组成Xooc的LPS结构的糖基有甲基和乙酰基修饰第167-168页
 第三章 恢复M12功能的阳性克隆P80内orfs的突变分析第168-192页
  1 材料和方法第171-175页
   ·供试菌株,培养条件与质粒第171-172页
   ·用于产生wxocB、wxocD、wxocE和wzt基因突变体的同源序列的PCR引物第172页
   ·PCR产物的回收克隆,序列验证,质粒提取,DNA提取参见第1章第172页
   ·突变转化单元的构建第172页
   ·水稻黄单胞感受态细胞的制备第172-173页
   ·电转化和标记交换第173页
   ·Southern杂交见第一章第173页
   ·LPS的提取第173-174页
   ·细菌游动性的测定第174页
   ·透射电镜负染观察鞭毛第174页
   ·生物膜的定性观察第174-175页
   ·生长曲线和致病性测定第175页
  2 结果与分析第175-182页
   ·变体转化单元的构建第175-179页
   ·WxocA、wxocB、wxocD、wxocE、wzt基因突变体LPS电泳分析第179-180页
   ·菌落形态,生物膜形成,游动性及鞭毛等细胞学特性的检测第180-181页
   ·突变体在水稻上的繁殖能力及致病性测定第181-182页
  3 讨论第182-192页
   ·基因敲除:以CoIE1为复制原点的质粒pBCSK(-)和R6K复制原点的载体pKNG101适用于Xooc的基因敲除第183页
   ·P80序列中的基因参与LPS核心和O-抗原的合成第183-184页
   ·Xooc O-抗原与毒性的关系第184-186页
   ·LPS和EPS合成的相互关系,Wzt基因与EPS合成相关是该基因功能的一个新发现第186-187页
   ·突变体改变的多种细胞学结构和功能的表达与致病性的关系第187-192页
参考文献第192-222页
附录:水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)无毒基因avrXa3和同源基因aB2.9对PXO99寄生适应性分析第222-246页
本文登录序列号第246-247页
缩略语和名词中英文对照第247-254页
发表和完成撰写的论文目录第254-255页
致谢第255页

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