摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一部分 文献综述 | 第8-22页 |
1. 白藜芦醇的研究进展 | 第8-9页 |
1.1 白藜芦醇的存在 | 第8页 |
1.2 白藜芦醇的药理作用及作用机理 | 第8-9页 |
2. 白藜芦醇合酶(简称RS)的研究进展 | 第9-16页 |
2.1 芪合酶的研究进展 | 第9页 |
2.2 白藜芦醇合酶(Resveratrol Synthase,简称RS)的研究进展 | 第9-13页 |
2.3 白藜芦醇合酶基因的分子生物学研究 | 第13-16页 |
3. 白藜芦醇合酶基因转基因植物的研究 | 第16-18页 |
3.1 白藜芦醇合酶基因的转基因技术研究进展 | 第16-17页 |
3.2 白藜芦醇合酶基因在基因转导过程中的异常表达 | 第17页 |
3.3 花生RS基因的转基因植物研究 | 第17-18页 |
4. 酵母表达系统的研究进展” | 第18-21页 |
4.1 酵母表达系统的优点 | 第19-20页 |
4.2 影响酵母表达系统表达和应用的因素 | 第20-21页 |
5. 本研究的目的、意义和内容 | 第21-22页 |
第二部分 材料和方法 | 第22-40页 |
1. 主要试剂与仪器 | 第22-25页 |
1.1 基本试剂及生产厂家 | 第22页 |
1.2 质粒和菌株 | 第22-23页 |
1.3 主要试剂 | 第23页 |
1.4 主要仪器和厂家 | 第23页 |
1.5 试剂和培养基 | 第23-25页 |
2. 实验材料 | 第25页 |
3. 实验方法 | 第25-33页 |
3.1 白藜芦醇合酶cDNA的克隆 | 第25-28页 |
3.2 克隆载体PBS-TL的构建 | 第28-30页 |
3.3 植物表达载体PBI121-L的构建 | 第30-31页 |
3.4 根癌农杆菌的的转化 | 第31-32页 |
3.5 农杆菌质粒LBA4404-L阳性克隆的的鉴定 | 第32-33页 |
4. 转基因植物再生体系的建立及遗传转化的初步研究 | 第33-35页 |
4.1 花生的转化 | 第33-34页 |
4.2 胡萝卜转化 | 第34-35页 |
5. 酵母表达系统的建立和鉴定 | 第35-40页 |
5.1 目的基因的获得 | 第35-36页 |
5.2 表达载体的构建 | 第36页 |
5.3 酵母表达载体的线性化和纯化 | 第36-37页 |
5.4 电激转化 | 第37页 |
5.5 酵母重组子的鉴定 | 第37-40页 |
第三部分 结果与分析 | 第40-53页 |
1. 白藜芦醇合酶cDNA的克隆和测序 | 第40-45页 |
1.1 基因组DNA的提取 | 第40页 |
1.2 引物悬挂延伸PCR扩增白藜芦醇合酶cDNA | 第40-42页 |
1.3 基因片段的克隆 | 第42页 |
1.4 序列的测定 | 第42-45页 |
2. 植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
3. 冻融法转化农杆菌LBA4404 | 第46-47页 |
4. 转基因植物再生体系的初步建立 | 第47-49页 |
4.1 花生的转化 | 第47-48页 |
4.2 胡萝卜的转化 | 第48-49页 |
5. 酵母表达系统的构建和鉴定 | 第49-53页 |
5.1 酵母表达载体的酶切鉴定 | 第50页 |
5.2 酵母转化子的鉴定 | 第50-53页 |
第四部分 讨论 | 第53-55页 |
第五部分 小结 | 第55-56页 |
第六部分 参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62页 |