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表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因的重组伪狂犬病病毒的免疫效力研究

第一部分 文献综述第1-27页
 综述一、伪狂犬病毒基因缺失及活载体疫苗研究进展第8-16页
  1 伪狂犬病基因缺失标记疫苗第8-11页
  2 伪狂犬病病毒载体疫苗第11-15页
  3 伪狂犬病的根除第15-16页
 综述二、猪流感病毒第16-27页
  1 猪流感病毒概况第16页
  2 血凝素(HA)第16-21页
  3 流感病毒的免疫机制第21页
  4 流感病毒的重组变异机制及其公共卫生学意义第21-24页
  5 猪流感病毒的疫苗研究进展第24-27页
第二部分 研究报告第27-51页
 试验一 表达 H3N2 亚型猪流感病毒 HA 基因重组伪狂犬病病毒的纯化及其生物学特性的分析第27-40页
  1 材料与方法第27-34页
   ·毒株、细胞、质粒及阳性血清第28页
   ·酶、试剂及主要仪器第28页
   ·病毒全基因组的提取第28-29页
   ·质粒的提取第29-30页
   ·PCR第30-31页
   ·转染第31页
   ·重组病毒的筛选和纯化第31-32页
   ·重组病毒DNA 的提取第32页
   ·western—blot第32-33页
   ·间接免疫荧光试验第33页
   ·重组质粒的转化及酶切鉴定第33-34页
   ·病毒毒价的测定第34页
  2 结果第34-37页
   ·PRV Bartha-K61 病毒基因组的提取和转移载体pLTK-HA 的鉴定第34-35页
   ·重组病毒的鉴定第35-36页
   ·HA 基因在重组病毒中的表达第36-37页
   ·rPRV-HA 与Bartha-K61 株在不同细胞上增殖及毒价的比较第37页
   ·重组病毒遗传稳定性第37页
  3 讨论第37-40页
 实验二 重组伪狂犬病病毒rPRV-HA 对鼠免疫效力的研究第40-51页
  1 材料与方法第41-44页
   ·细胞、病毒及血清第41页
   ·毒价的测定第41页
   ·小鼠的免疫和攻毒第41-42页
   ·病毒分离第42页
   ·冰冻切片的制备第42页
   ·病理学检察第42-43页
   ·荧光抗体试验第43页
   ·中和抗体试验第43页
   ·血凝和血凝抑制试验第43-44页
  2 结果第44-48页
   ·免疫后rPRV-HA 在小鼠体内复制和表达第44-45页
   ·免疫后小鼠的抗体变化第45-46页
   ·攻毒后免疫小鼠的病毒分布及分离结果第46-47页
   ·rPRV-HA 对小鼠的病理学保护第47-48页
  3 讨论第48-51页
结论第51-52页
参考文献第52-57页
附图第57-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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