第一部分 文献综述 | 第1-27页 |
综述一、伪狂犬病毒基因缺失及活载体疫苗研究进展 | 第8-16页 |
1 伪狂犬病基因缺失标记疫苗 | 第8-11页 |
2 伪狂犬病病毒载体疫苗 | 第11-15页 |
3 伪狂犬病的根除 | 第15-16页 |
综述二、猪流感病毒 | 第16-27页 |
1 猪流感病毒概况 | 第16页 |
2 血凝素(HA) | 第16-21页 |
3 流感病毒的免疫机制 | 第21页 |
4 流感病毒的重组变异机制及其公共卫生学意义 | 第21-24页 |
5 猪流感病毒的疫苗研究进展 | 第24-27页 |
第二部分 研究报告 | 第27-51页 |
试验一 表达 H3N2 亚型猪流感病毒 HA 基因重组伪狂犬病病毒的纯化及其生物学特性的分析 | 第27-40页 |
1 材料与方法 | 第27-34页 |
·毒株、细胞、质粒及阳性血清 | 第28页 |
·酶、试剂及主要仪器 | 第28页 |
·病毒全基因组的提取 | 第28-29页 |
·质粒的提取 | 第29-30页 |
·PCR | 第30-31页 |
·转染 | 第31页 |
·重组病毒的筛选和纯化 | 第31-32页 |
·重组病毒DNA 的提取 | 第32页 |
·western—blot | 第32-33页 |
·间接免疫荧光试验 | 第33页 |
·重组质粒的转化及酶切鉴定 | 第33-34页 |
·病毒毒价的测定 | 第34页 |
2 结果 | 第34-37页 |
·PRV Bartha-K61 病毒基因组的提取和转移载体pLTK-HA 的鉴定 | 第34-35页 |
·重组病毒的鉴定 | 第35-36页 |
·HA 基因在重组病毒中的表达 | 第36-37页 |
·rPRV-HA 与Bartha-K61 株在不同细胞上增殖及毒价的比较 | 第37页 |
·重组病毒遗传稳定性 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
实验二 重组伪狂犬病病毒rPRV-HA 对鼠免疫效力的研究 | 第40-51页 |
1 材料与方法 | 第41-44页 |
·细胞、病毒及血清 | 第41页 |
·毒价的测定 | 第41页 |
·小鼠的免疫和攻毒 | 第41-42页 |
·病毒分离 | 第42页 |
·冰冻切片的制备 | 第42页 |
·病理学检察 | 第42-43页 |
·荧光抗体试验 | 第43页 |
·中和抗体试验 | 第43页 |
·血凝和血凝抑制试验 | 第43-44页 |
2 结果 | 第44-48页 |
·免疫后rPRV-HA 在小鼠体内复制和表达 | 第44-45页 |
·免疫后小鼠的抗体变化 | 第45-46页 |
·攻毒后免疫小鼠的病毒分布及分离结果 | 第46-47页 |
·rPRV-HA 对小鼠的病理学保护 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附图 | 第57-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |