中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 ETA不同于经典M受体的研究 | 第18-34页 |
材料与方法 | 第18-24页 |
1 人脐静脉离体血管功能实验 | 第20-21页 |
2 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的复苏与培养 | 第21页 |
3 RT-PCR | 第21-23页 |
4 共聚焦测定[Ca2+]i | 第23-24页 |
实验结果 | 第24-33页 |
1 人脐静脉离体血管环实验 | 第24-27页 |
·5-HT对人脐静脉血管环的收缩 | 第24页 |
·ACh及ATP介导的人脐静脉内皮依赖性舒应 | 第24-25页 |
·L-NAME对人脐静脉内皮依赖性舒张反应的影响 | 第25-27页 |
2 RT-PCR确证HUVEC上表达m1-m5 | 第27-33页 |
·人脐静脉内皮细胞提取RNA的含量及浓度测定 | 第27页 |
·RT-PCR | 第27-29页 |
·m受体激动剂对HUVEC[Ca2+]i的影响 | 第29-33页 |
结语 | 第33-34页 |
第二部分 乙酰胆碱作用于人冠状动脉内皮细胞前后差异蛋白的分析 | 第34-52页 |
材料与方法 | 第35-41页 |
1 细胞培养及鉴定 | 第36页 |
2 内皮细胞ETA功能鉴定 | 第36页 |
3 给药刺激及蛋白的提取 | 第36-37页 |
4 内皮细胞总蛋白质的IPG-PEGT双向电泳筛选差异蛋白 | 第37-41页 |
·双向电泳 | 第37-38页 |
·双向凝胶电泳图象扫描与分析 | 第38-39页 |
·蛋白质的原位脱色、酶解及萃取 | 第39页 |
·MALDI-TOF-MS肽质量指纹图 | 第39页 |
·质谱数据的数据搜寻及蛋白的鉴定 | 第39-41页 |
实验结果 | 第41-51页 |
1 HUVEC形态学及功能学的鉴定 | 第41-43页 |
·人冠状动脉内皮细胞的鉴定 | 第41页 |
·激光共聚焦测定HCAEC[Ca2+]i | 第41-43页 |
2 双向电泳及差异蛋白的鉴定 | 第43-51页 |
·蛋白质的提取与定量 | 第43页 |
·人冠状动脉内皮细胞系双向凝胶电泳图谱 | 第43-44页 |
·HCAEC蛋白表达谱的分析 | 第44-46页 |
·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS质谱分析及鉴定 | 第46-51页 |
结语 | 第51-52页 |
讨论 | 第52-63页 |
研究总结 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-78页 |
个人简历 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
综述参考文献 | 第80-90页 |