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血管内皮细胞乙酰胆碱靶标的药理学特征及其相关蛋白的研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-15页
前言第15-18页
第一部分 ETA不同于经典M受体的研究第18-34页
 材料与方法第18-24页
  1 人脐静脉离体血管功能实验第20-21页
  2 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的复苏与培养第21页
  3 RT-PCR第21-23页
  4 共聚焦测定[Ca2+]i第23-24页
 实验结果第24-33页
  1 人脐静脉离体血管环实验第24-27页
   ·5-HT对人脐静脉血管环的收缩第24页
   ·ACh及ATP介导的人脐静脉内皮依赖性舒应第24-25页
   ·L-NAME对人脐静脉内皮依赖性舒张反应的影响第25-27页
  2 RT-PCR确证HUVEC上表达m1-m5第27-33页
   ·人脐静脉内皮细胞提取RNA的含量及浓度测定第27页
   ·RT-PCR第27-29页
   ·m受体激动剂对HUVEC[Ca2+]i的影响第29-33页
 结语第33-34页
第二部分 乙酰胆碱作用于人冠状动脉内皮细胞前后差异蛋白的分析第34-52页
 材料与方法第35-41页
  1 细胞培养及鉴定第36页
  2 内皮细胞ETA功能鉴定第36页
  3 给药刺激及蛋白的提取第36-37页
  4 内皮细胞总蛋白质的IPG-PEGT双向电泳筛选差异蛋白第37-41页
   ·双向电泳第37-38页
   ·双向凝胶电泳图象扫描与分析第38-39页
   ·蛋白质的原位脱色、酶解及萃取第39页
   ·MALDI-TOF-MS肽质量指纹图第39页
   ·质谱数据的数据搜寻及蛋白的鉴定第39-41页
 实验结果第41-51页
  1 HUVEC形态学及功能学的鉴定第41-43页
   ·人冠状动脉内皮细胞的鉴定第41页
   ·激光共聚焦测定HCAEC[Ca2+]i第41-43页
  2 双向电泳及差异蛋白的鉴定第43-51页
   ·蛋白质的提取与定量第43页
   ·人冠状动脉内皮细胞系双向凝胶电泳图谱第43-44页
   ·HCAEC蛋白表达谱的分析第44-46页
   ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS质谱分析及鉴定第46-51页
 结语第51-52页
讨论第52-63页
研究总结第63-65页
参考文献第65-71页
附录第71-78页
个人简历第78-79页
致谢第79-80页
综述参考文献第80-90页

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