一 摘要 | 第1-6页 |
二 综述 | 第6-12页 |
三 前言 | 第12-14页 |
四 材料与方法 | 第14-27页 |
1 材料 | 第14页 |
2 方法 | 第14-27页 |
·BAC载体的制备 | 第14-21页 |
·质粒DNA的小量制备 | 第15-17页 |
·BAC载体的大量提取和纯化 | 第17-20页 |
·BAC载体的后期处理(酶切和去磷酸化) | 第20-21页 |
·高分子量DNA的制备 | 第21-23页 |
·大熊猫成纤维细胞的培养 | 第21-22页 |
·细胞凝胶包埋块的制备及处理 | 第22-23页 |
·高分子量DNA的不完全消化 | 第23页 |
·DNA大小合适片段的获得 | 第23-24页 |
·连接与转化 | 第24-25页 |
·克隆的挑取及保存 | 第25页 |
·文库的质量检测 | 第25-27页 |
·插入片段的酶切分析 | 第25-26页 |
·克隆的稳定性检测 | 第26-27页 |
五 结果与分析 | 第27-31页 |
1 BAC载体的制备 | 第27页 |
2 脉冲场电泳带的形成 | 第27-28页 |
3 电转化参数 | 第28页 |
4 文库构建的效率 | 第28-29页 |
5 BAC克隆的酶切结果 | 第29页 |
6 克隆稳定性的检测结果 | 第29-31页 |
六 讨论 | 第31-34页 |
七 参考文献 | 第34-40页 |
八 致谢 | 第40页 |