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猪带绦虫六钩蚴cDNA表达文库的构建及免疫原基因的筛选、克隆与表达

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
引言第7-9页
研究内容部分第9-70页
 第一部分 猪带绦虫六钩蚴cDNA表达文库的构建第9-37页
  引言第10-11页
  1 材料与方法第11-28页
   ·材料第11-12页
     ·材料来源与保存第11页
     ·酶、载体及试剂第11页
     ·仪器和设备第11-12页
   ·实验方法第12-28页
     ·猪带绦虫六钩蚴的孵化与激活第12页
     ·六钩蚴总RNA的提取第12-14页
     ·六钩蚴mRNA的分离第14-17页
     ·六钩蚴cDNA表达文库的构建第17-25页
     ·六钩蚴cDNA表达文库的代表性鉴定第25-28页
  2 结果第28-32页
   ·六钩蚴的孵化与激活第28页
   ·RNA和mRNA的含量及纯度第28-29页
   ·cDNA含量测定第29-31页
   ·cDNA.文库的鉴定第31-32页
  3 讨论第32-37页
   ·六钩蚴的孵化与激活第33-34页
   ·总RNA和mRNA的含量和完整性第34页
   ·六钩蚴cDNA的全长性第34-35页
   ·cDNA的定向克隆性第35页
   ·六钩蚴cDNA表达文库的质量第35-37页
 第二部分 六钩蚴cDNA表达文库的免疫原基因的筛选与克隆第37-52页
  引言第38页
  1 材料与方法第38-46页
   ·材料第38-39页
     ·载体、酶和试剂第38页
     ·仪器和设备第38-39页
   ·方法第39-46页
     ·筛选菌落的准备第39页
     ·NC膜的处理第39-40页
     ·抗体筛选第40-41页
     ·阳性菌落的分离第41页
     ·免疫筛选阳性克隆的质粒提取第41-42页
     ·重组质粒的鉴定第42-44页
     ·目的片段与克隆载体的连接及鉴定第44-45页
     ·目的片段的测序与序列分析第45-46页
  2 结果第46-48页
   ·阳性克隆的筛选结果第46页
   ·阳性克隆的重组质粒鉴定结果第46-47页
   ·免疫原基因的克隆与鉴定结果第47-48页
   ·免疫原基因序列的分析结果第48页
  3 讨论第48-52页
   ·目的基因克隆策略的选择第48-51页
   ·免疫学筛选表达文库的要点第51-52页
 第三部分 免疫原基因Ts01的表达与功能分析第52-68页
  1 材料与方法第53-58页
   ·材料第53页
     ·载体、酶及试剂第53页
     ·仪器设备第53页
   ·方法第53-58页
     ·重组表达载体的构建第53-55页
     ·Ts01基因的诱导表达第55-56页
     ·Ts01基因表达产物的SDS-PAGE电泳检测第56-57页
     ·Ts01基因表达产物的Western-blot分析第57页
     ·Ts01基因表达产物的稳定性检测第57-58页
     ·Ts01基因及其编码蛋白的结构预测第58页
  2. 结果第58-63页
   ·重组表达质粒的鉴定结果第58-59页
   ·重组体的诱导表达结果第59页
   ·Ts01表达产物的免疫活性分析第59页
   ·Ts01融合蛋白的稳定性分析第59-60页
   ·Ts01基因编码蛋白结构的预测第60-63页
  3 讨论第63-68页
   ·大肠杆菌表达载体选择策略第64-65页
   ·外源蛋白质表达部位选择策略第65-66页
   ·外源蛋白质融合表达策略第66页
   ·生物信息学技术预测蛋白结构第66-67页
   ·外源蛋白融合表达特点第67-68页
 第四部分 结论第68-70页
文献综述部分第70-96页
参考文献第96-106页
附录第106-120页
致谢第120-121页
作者简历第121页

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