| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 一、 研究概况 | 第9-25页 |
| 1． 植物转基因技术——遗传转化体系 | 第9-13页 |
| 2． 反义RNA技术 | 第13-15页 |
| 3． 植物花色的基因控制和调节 | 第15-20页 |
| 4． 蓝猪耳组织培养和遗传转化研究进展简介 | 第20-23页 |
| 5． 松叶牡丹简介 | 第23页 |
| 6． 研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 二、 材料与方法 | 第25-36页 |
| 1． 反义CHS基因植物表达载体的构建及工程菌种的制备 | 第25-30页 |
| 1．1 载体构建前期实验简介 | 第25-26页 |
| 1．2 实验材料 | 第26-27页 |
| 1．3 实验方法 | 第27-30页 |
| 1．3．1 质粒DNA的大量抽提及纯化 | 第27-28页 |
| 1．3．2 检测用PCP体系的条件 | 第28-29页 |
| 1．3．3 酶切体系 | 第29页 |
| 1．3．4 根癌农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第29-30页 |
| 1．3．5 冻融法转化农杆菌 | 第30页 |
| 1．3．6 转化子单菌的直接PCR鉴定 | 第30页 |
| 1．3．7 转化子质粒的酶切和PCR鉴定 | 第30页 |
| 2． 蓝猪耳离体再生体系和遗传转化体系的建立 | 第30-34页 |
| 2．1 蓝猪耳离体再生体系的建立 | 第30-32页 |
| 2．2 蓝猪耳遗传转化体系的建立 | 第32-34页 |
| 3． 松叶牡丹遗传转化体系的建立 | 第34-36页 |
| 三、 结果与分析 | 第36-60页 |
| 1． 反义CHS基因植物表达载体的构建及工程菌种的制备 | 第36-40页 |
| 1．1 中间载体质粒pLBC DNA（E．coli DH5a，pBI121）的抽提和PCR鉴定 | 第36页 |
| 1．2 中间载体质粒DNA（E．coli DH5a，pBI121）的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| 1．3 重组质粒（E．coli DH5a，pBI121）的CHS5'端测序鉴定 | 第37-39页 |
| 1．4 pLBC质粒克隆到根癌农杆菌LBA4404转化子的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 1．5 转化子质粒的酶切和PCR鉴定 | 第40页 |
| 2． 蓝猪耳离体再生体系和遗传转化体系的建立 | 第40-53页 |
| 2．1 蓝猪耳离体再生体系的建立 | 第40-47页 |
| 2．1．1 蓝猪耳愈伤组织的诱导 | 第40-42页 |
| 2．1．2 蓝猪耳愈伤组织增殖培养基的筛选 | 第42-43页 |
| 2．1．3 不同浓度的NAA和6-BA组合对不定芽诱导的影响 | 第43-46页 |
| 2．1．4 不同浓度的NAA和6-BA组合对蓝猪耳不定根诱导的效果 | 第46-47页 |
| 2．2 影响农杆菌介导的蓝猪耳遗传转化的主要因素的研究 | 第47-53页 |
| 2．2．1 抑菌抗生素种类和浓度对根癌农杆菌生长的影响 | 第47-48页 |
| 2．2．2 抑菌抗生素种类和浓度对蓝猪耳叶片诱导不定芽的影响 | 第48-49页 |
| 2．2．3 抑菌抗生素种类和浓度对蓝猪耳植株诱导不定根的影响 | 第49-50页 |
| 2．2．4 卡那霉素对叶片不定芽诱导的影响 | 第50页 |
| 2．2．5 超声波处理时间对蓝猪耳叶盘生长的影响 | 第50-51页 |
| 2．2．6 几种影响因子对蓝猪耳遗传转化效率的影响 | 第51-53页 |
| 2．2．7 乙酰丁香酮对GUS基因瞬时表达和抗性不定芽诱导的影响 | 第53页 |
| 3． 松叶牡丹遗传转化体系的建立 | 第53-60页 |
| 3．1 表面消毒时间的筛选 | 第53-54页 |
| 3．2 抑菌抗生素种类和浓度对叶片诱导愈伤组织及愈伤组织增殖的影响 | 第54-55页 |
| 3．3 卡那霉素对松叶牡丹愈伤组织诱导和增殖的影响 | 第55-56页 |
| 3．4 几种影响因子松叶牡丹实生苗叶片GUS基因瞬时表达和抗性愈伤组织诱导的影响 | 第56-58页 |
| 3．5 几种影响因子对松叶牡丹愈伤组织GUS瞬时表达和抗性愈伤组织形成的影响 | 第58-60页 |
| 四、 讨论 | 第60-65页 |
| 1． 反义CHS基因植物表达载体的构建及工程菌种的制备 | 第60页 |
| 2． 蓝猪耳离体再生体系的建立 | 第60-61页 |
| 3． 蓝猪耳和松叶牡丹遗传转化系统的建立 | 第61-63页 |
| 4． 关于遗传转化中的材料褐化问题 | 第63-65页 |
| 五、 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 图版 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
