转BT基因抗虫玉米植株的获得及其后代分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-27页 |
| ·玉米遗传转化技术研究进展 | 第12-17页 |
| ·玉米遗传转化受体研究进展 | 第12-14页 |
| ·原生质体 | 第12-13页 |
| ·愈伤组织 | 第13页 |
| ·悬浮细胞 | 第13-14页 |
| ·子房、花粉、萌发种子 | 第14页 |
| ·玉米遗传转化方法研究进展 | 第14-17页 |
| ·基因枪轰击法 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
| ·花粉管通道法 | 第16页 |
| ·电击法 | 第16页 |
| ·PEG介导法 | 第16-17页 |
| ·BT杀虫蛋白研究进展 | 第17-20页 |
| ·BT基因的分类 | 第17-18页 |
| ·BT蛋白的结构与功能 | 第18-19页 |
| ·BT蛋白的杀虫机理 | 第19-20页 |
| ·BT基因在BT中得分布 | 第20页 |
| ·外源基因在转基因植物中高效表达的研究进展 | 第20-22页 |
| ·启动子的选择 | 第20-21页 |
| ·外源基因的修饰和改造 | 第21页 |
| ·蛋白质的定向运输 | 第21-22页 |
| ·叶绿体转化 | 第22页 |
| ·昆虫对转BT基因植物的抗性和对策 | 第22-27页 |
| ·昆虫对BT蛋白抗性机制 | 第23-25页 |
| ·BT蛋白在昆虫肠道中的水解改变 | 第23-24页 |
| ·BT蛋白与昆虫肠道中受体结合的改变 | 第24-25页 |
| ·其他机制 | 第25页 |
| ·昆虫抗性的治理策略 | 第25-27页 |
| ·高剂量和庇护所 | 第25-26页 |
| ·转入含有两种或两种以上的抗虫基因 | 第26-27页 |
| 2 Cry1Ab基因的改造及在大肠杆菌中的表达 | 第27-41页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·Cry1Ab基因改造方法 | 第27页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第28页 |
| ·质粒DNA的Nde Ⅰ/HindⅢ双酶切 | 第28页 |
| ·酶切片段的胶回收 | 第28-29页 |
| ·目的基因与载体连接及重组子鉴定 | 第29页 |
| ·构建好的载体转化大肠杆菌DH5α | 第29-30页 |
| ·构建好的载体转化大肠杆菌BL21(DE3) | 第30页 |
| ·蛋白表达的诱导 | 第30页 |
| ·蛋白表达的检测 | 第30-31页 |
| ·诱导蛋白的可溶性检测 | 第31页 |
| ·原核表达虫试 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-41页 |
| ·基因改造 | 第32-37页 |
| ·原核表达载体pETAb的构建 | 第37-38页 |
| ·Cry1Ab蛋白在大肠杆菌中得表达 | 第38-40页 |
| ·原核表达虫试结果 | 第40-41页 |
| 3 Cry1Ab基因在转基因玉米中的表达 | 第41-52页 |
| ·材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·玉米材料 | 第41页 |
| ·菌株及质粒 | 第41页 |
| ·生化试剂及配法 | 第41-42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·植物表达载体构建 | 第42页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第42页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·基因枪轰击法转化玉米愈伤组织 | 第43-45页 |
| ·转基因植株的再生 | 第45页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第45-47页 |
| ·转基因玉米的室内抗虫测试 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-52页 |
| ·载体构建 | 第47-48页 |
| ·基因枪介导的玉米遗传转化 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第49-52页 |
| ·转基因玉米的PCR检测 | 第49-50页 |
| ·转基因的免疫试纸检测 | 第50-51页 |
| ·转基因玉米的室内抗虫结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论与结论 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录一 主要英文缩写词表 | 第60-61页 |
| 附录二 植物组织培养中培养基母液配方 | 第61-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |
| 在校期间发表论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
