| 摘要 | 第1-19页 |
| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-19页 |
| 第一部分 以一侧旋肩胛动脉皮支为蒂的肩胛皮瓣再造阴茎的临床应用研究 | 第19-59页 |
| 一、阴茎再造的历史回顾 | 第19-30页 |
| (一) 传统阴茎再造 | 第19-22页 |
| 1.腹部皮管阴茎再造 | 第19-20页 |
| 2.腹中部皮管阴茎再造 | 第20页 |
| 3.阴囊皮瓣阴茎再造 | 第20页 |
| 4.大腿斜行皮管阴茎再造 | 第20-21页 |
| 5.股薄肌皮瓣复合腹股沟皮管再造阴茎： | 第21页 |
| 6.双侧股薄肌复合皮瓣一次阴茎再造 | 第21页 |
| 7.下腹部正中皮瓣复合阴囊皮瓣阴茎再造 | 第21-22页 |
| (二) 现代阴茎再造 | 第22-30页 |
| 一) 带蒂轴型皮瓣、肌皮瓣阴茎再造 | 第22-25页 |
| 1.腹股沟皮瓣 | 第23页 |
| 2.腹部双血管蒂岛状皮瓣 | 第23页 |
| 3.腹壁下皮瓣 | 第23页 |
| 4.脐旁轴型皮瓣 | 第23-24页 |
| 5.胸脐岛状皮瓣 | 第24页 |
| 6.带腹壁浅动脉筋膜蒂的腹部皮瓣 | 第24-25页 |
| 7.腹直肌瓣皮瓣 | 第25页 |
| 二) 带蒂轴型骨皮瓣再造阴茎 | 第25-26页 |
| 1.髂骨皮瓣 | 第25-26页 |
| 2.耻骨骨膜瓣 | 第26页 |
| 三) 游离皮瓣、肌皮瓣、骨皮瓣再造阴茎 | 第26-30页 |
| 1.前臂皮瓣 | 第27-28页 |
| (1) 经典中国皮瓣 | 第27页 |
| (2) 感觉前臂皮瓣 | 第27页 |
| (3) 扩张前臂皮瓣 | 第27-28页 |
| (4) 复合前臂皮瓣 | 第28页 |
| (5) 前臂骨皮瓣 | 第28页 |
| (6) 桥接前臂皮瓣 | 第28页 |
| 2.前臂尺侧皮瓣 | 第28-29页 |
| 3.游离大网膜瓣 | 第29页 |
| 4.三角肌皮瓣 | 第29页 |
| 5.腓骨皮瓣 | 第29页 |
| 6.胸脐游离皮瓣 | 第29页 |
| 7.第二趾背动脉携带的复合骨皮瓣 | 第29-30页 |
| (三) 阴茎假体的应用及研究 | 第30页 |
| 二、阴茎再造的要求 | 第30-32页 |
| 1.阴茎再造患者的要求 | 第30页 |
| 2.实现患者要求的途径 | 第30-31页 |
| 3.理想的阴茎再造应该符合以下标准 | 第31-32页 |
| 三、一侧肩胛皮瓣游离移植再造阴茎的临床研究 | 第32-54页 |
| (一) 临床资料 | 第32页 |
| (二) 手术方法 | 第32-38页 |
| 一) 手术适应证 | 第32页 |
| 二) 解剖学基础 | 第32-34页 |
| 1.肩胛皮瓣 | 第32-33页 |
| 2.腹壁下血管 | 第33-34页 |
| 三) 术前准备 | 第34页 |
| 四) 麻醉及体位 | 第34页 |
| 五) 手术方法与步骤 | 第34-38页 |
| 1.导尿 | 第34-35页 |
| 2.体位 | 第35页 |
| 3.肩胛皮瓣设计 | 第35页 |
| 4.阴茎再造皮瓣的设计及阴茎体预制 | 第35-37页 |
| (1) 阴茎再造皮瓣的设计 | 第35-36页 |
| (2) 肩胛皮瓣的切取 | 第36页 |
| (3) 阴茎体预制 | 第36-37页 |
| 5.皮瓣受区准备 | 第37页 |
| 6.预制阴茎体移植阴茎再造 | 第37-38页 |
| 六) 术后处理 | 第38页 |
| (三) 结果 | 第38-46页 |
| 典型病历介绍 | 第39-44页 |
| 其他患者阴茎再造情况 | 第44-46页 |
| (四) 讨论 | 第46-53页 |
| 一) 阴茎再造供区的选择 | 第46页 |
| 二) 肩胛皮瓣解剖学研究的文献回顾 | 第46-48页 |
| 1.肩胛皮瓣的早期研究 | 第46页 |
| 2.肩胛皮瓣研究及应用的成熟期 | 第46-47页 |
| 3.肩胛皮瓣拓展应用的研究 | 第47-48页 |
| 三) 阴茎再造受区血管的选择 | 第48页 |
| 1.受区血管的选择 | 第48页 |
| 2.腹壁下血管的解剖学特点 | 第48页 |
| 四) 阴茎再造皮瓣的设计 | 第48-49页 |
| 五) 阴茎再造支架的选择 | 第49页 |
| 六) 尿道的再造与吻合 | 第49页 |
| 1.尿道再造的方法选择 | 第49页 |
| 2.尿道再造的皮瓣设计 | 第49页 |
| 3.再造尿道的吻合时机 | 第49页 |
| 七) 再造阴茎的感觉恢复 | 第49-51页 |
| 1.肩胛皮瓣的感觉神经 | 第50页 |
| 2.感觉神经缺损的修复模式 | 第50页 |
| (1) 桥梁性作用 | 第50页 |
| (2) 趋化性作用 | 第50页 |
| (3) 微环境作用 | 第50页 |
| 3.不吻和皮神经再造阴茎的感觉恢复机理 | 第50-51页 |
| 八) 并发症及其处理 | 第51页 |
| 1.早期并发症 | 第51页 |
| 2.中期并发症 | 第51页 |
| 3.晚期并发症 | 第51页 |
| 九) 使用肩胛游离皮瓣再造阴茎的优、缺点 | 第51-52页 |
| 1.优点 | 第51-52页 |
| 2.缺点 | 第52页 |
| 3.肩胛游离皮瓣再造阴茎与其他阴茎再造方法的比较 | 第52页 |
| 十) 使用肩胛皮瓣游离移植再造阴茎的意义和拓展 | 第52-53页 |
| 在感觉恢复方面 | 第53页 |
| 在假体的受力方面 | 第53页 |
| (五) 结论 | 第53页 |
| (六) 展望 | 第53-54页 |
| 第一部分参考文献 | 第54-59页 |
| 第二部分 尿道下裂发病相关基因突变的研究 | 第59-118页 |
| 一、文献综述 | 第59-81页 |
| (一) 发病率及发病趋势 | 第59-60页 |
| 1.发病率： | 第59-60页 |
| (1) 国外报道 | 第59页 |
| (2) 国内报道 | 第59-60页 |
| 2.发病趋势 | 第60页 |
| (1) 发病率增加的趋势 | 第60页 |
| (2) 发病率不变的报道 | 第60页 |
| (3) 发病率变化的分析 | 第60页 |
| (二) 尿道下裂的病因及遗传倾向 | 第60-62页 |
| 1.病因 | 第61页 |
| 2.遗传倾向 | 第61-62页 |
| (1) 尿道下裂的家族集中性 | 第61页 |
| (2) 尿道下裂患者家人的发病风险率 | 第61-62页 |
| (3) 尿道下裂的遗传方式 | 第62页 |
| (三) 尿道下裂发病相关的基因突变 | 第62-81页 |
| 一) 性决定基因的突变与尿道下裂 | 第63-68页 |
| 1.性决定基因(SRY) | 第64-66页 |
| (1) SRY的分子生物学特征 | 第64-65页 |
| 1) SRY基因的发现 | 第65页 |
| 2) SRY基因的作用特征 | 第65页 |
| 3) SRY基因的作用机制 | 第65页 |
| (2) SRY基因易位、缺失可能引起尿道下裂 | 第65-66页 |
| 1) 从Y染色体的缺失分析46,XX男性 | 第65-66页 |
| 2) 从SRY基因状态分析46.XX男性 | 第66页 |
| 2.SOX9基因 | 第66-67页 |
| (1) SOX9的分子生物学特征 | 第66页 |
| (2) SOX9的作用机 | 第66-67页 |
| (3) SOX9与性倒错 | 第67页 |
| 3.SF-1基因性 | 第67-68页 |
| 二) 分化、发育基因的突变与尿道下裂 | 第68-75页 |
| ·a-还原酶Ⅱ基因突变 | 第68-70页 |
| (1) 5a-还原酶Ⅱ基因的分子生物学特点 | 第68页 |
| (2) 5a-还原酶Ⅱ基因点突变 | 第68页 |
| (3) 5a-还原酶Ⅱ基因移码突变 | 第68-69页 |
| (4) 5a-还原酶Ⅱ基因小段删除 | 第69页 |
| (5) 5a-还原酶Ⅱ基因突变的发病方式及对生殖能力的影响 | 第69页 |
| (6) 国人对尿道下裂患者中5a-还原酶Ⅱ基因突变的研究进展 | 第69-70页 |
| 2.雄激素受体基因(AR)突变 | 第70-73页 |
| (1) 雄激素受体的分子生物学特点 | 第70-71页 |
| 1) 雄激素受体基因的发现 | 第70-71页 |
| 2) 雄激素受体的作用 | 第71页 |
| (2) 尿道下裂、雄激素不敏感症(AIS)与AR基因突变的关系 | 第71页 |
| (3) 家族性尿道下裂中AR基因突变及其遗传方式 | 第71-72页 |
| 1) AR受体基因的596和703位点突变 | 第72页 |
| 2) AR受体基因的840位点突变 | 第72页 |
| (4) AR基因突变与表型的关系 | 第72-73页 |
| (5) 尿道下裂患者群中AR基因突变的的筛查 | 第73页 |
| 3.睾酮生物合成途径关键酶的基因缺陷 | 第73页 |
| 4.芳香酶缺乏导致雌激素水平降低造成女性假两性畸形 | 第73-75页 |
| 5.抗苗勒氏管激素基因、3β羟类固醇脱氢酶基因 | 第75页 |
| (1) 抗苗勒氏管基因(AMH) | 第75页 |
| (2) 3β羟类固醇脱氢酶基因(3βHSD) | 第75页 |
| 三) 其他基因的突变与尿道下裂的关系 | 第75-81页 |
| 1.Wilms瘤基因突变 | 第75-77页 |
| (1) Wilms瘤与Wilms瘤基因 | 第75-76页 |
| 1) Wilms瘤 | 第75-76页 |
| 2) Wilms瘤发病相关基因的生物学特点 | 第76页 |
| (2) Wilms瘤基因与尿道下裂 | 第76页 |
| (3) WT1基因和Denys-Drash综合症 | 第76-77页 |
| (4) WT1基因与睾丸、肾脏功能的关系 | 第77页 |
| 2.尿道下裂与其他相关基因突变 | 第77-81页 |
| (1) 染色体16p13.3突变引起性分化异常 | 第77页 |
| (2).先天性肾上腺性征异常症 | 第77页 |
| (3) 垂体激素的影响 | 第77页 |
| (4) 表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR) | 第77-78页 |
| (5) Opitz GBBB综合症(OS) | 第78-79页 |
| (6) 接触基因综合症 | 第79页 |
| (7) Townes-Brocks综合症 | 第79页 |
| (8) Simpson-Golabi-Behmel综合症 | 第79-80页 |
| (9) 肌病 | 第80页 |
| (10) 其他因素 | 第80-81页 |
| 二、尿道下裂患者中雄激素受体(AR)基因、性决定基因(SRY)缺失、突变的研究 | 第81-111页 |
| (一) 研究目的 | 第81页 |
| (二) 研究背景 | 第81页 |
| (三) 研究材料 | 第81-82页 |
| 1.病例收集、分组、采血 | 第81-82页 |
| (1) 实验组 | 第81页 |
| (2) 对照组 | 第81-82页 |
| 2.采集血样保存 | 第82页 |
| (四) DNA的提取与定量 | 第82-86页 |
| 一) DAN的提取 | 第82-83页 |
| 1.DNA提取方法 | 第82页 |
| 2.DNA提取原理 | 第82页 |
| 3.DAN提取相关试剂和关键设备 | 第82页 |
| 4.DAN提取步骤 | 第82-83页 |
| (1) 采血： | 第82页 |
| (2) 去除血浆和红细胞 | 第82页 |
| (3) 消化蛋白质 | 第82页 |
| (4) 去除体系中的蛋白质 | 第82-83页 |
| (5) 沉淀DNA | 第83页 |
| (6) 收集DNA | 第83页 |
| 二) DNA的定量 | 第83-86页 |
| 1.哺乳类动物细胞中DNA的含量 | 第83-84页 |
| (1) DNA的分子量 | 第83页 |
| (2) DNA的含量 | 第83-84页 |
| 2.实验用DAN定量方法 | 第84-86页 |
| (1) 定量原理 | 第84页 |
| (2) 定量的仪器和试剂 | 第84页 |
| (3) DNA定量步骤 | 第84-86页 |
| 1) 8％琼脂糖凝胶的制备 | 第84页 |
| 2) 加样 | 第84页 |
| 3) 电泳 | 第84页 |
| 4) 凝胶成像 | 第84页 |
| 5) 定量换算 | 第84-85页 |
| 6) 定量稀释 | 第85-86页 |
| (五) 尿道下裂患者中雄激素受体基因外显子突变的研究 | 第86-96页 |
| 一) 实验目的 | 第86页 |
| 二) 实验原理 | 第86页 |
| 三) 实验试剂和关键设备 | 第86页 |
| 四) 雄激素外显子片段的选择性PCR扩增 | 第86-89页 |
| 1.PCR扩增的原理 | 第86页 |
| 2.PCR引物的设计 | 第86-87页 |
| 1) 引物设计 | 第86-87页 |
| 2) 设计引物的同源性比较 | 第87页 |
| 3) 引物的合成与稀释定量 | 第87页 |
| 3.PCR反应的实验步骤 | 第87页 |
| 4.PCR反应条件的优化 | 第87-88页 |
| 1) PCR反应条件优化的过程 | 第88页 |
| 2) AR基因外显子PCR反应条件优化结果 | 第88页 |
| 5.目的片段PCR扩增 | 第88-89页 |
| 五) PCR扩增产物的纯化 | 第89-91页 |
| ·孔板纯化法 | 第89-90页 |
| 1) 加样 | 第89页 |
| 2) 过滤 | 第89-90页 |
| 3) 溶解样本 | 第90页 |
| 4) 收获纯化样本 | 第90页 |
| 2.试剂盒纯化法 | 第90页 |
| 3.纯化结果的定量检测 | 第90-91页 |
| 六) 目的片段DNA测序 | 第91-96页 |
| 1.实验原理 | 第91-92页 |
| 2.测序过程 | 第92-93页 |
| (1) 测序PCR反应 | 第92-93页 |
| 1) 混合体系 | 第92页 |
| 2) 测序条件 | 第92-93页 |
| (2) 测序PCR产物的纯化 | 第93页 |
| (3) 测序 | 第93页 |
| 3.测序结果分析 | 第93-96页 |
| (六) 尿道下裂患者中性决定(SRY)基因突变的研究 | 第96-98页 |
| 一) 实验目的 | 第96页 |
| 二) 实验技术路线 | 第96页 |
| 三) 设计引物序列 | 第96页 |
| 四) PCR扩增反应条件优化结果 | 第96-97页 |
| 五) 目的片段的PCR扩增和纯化 | 第97页 |
| 六) 尿道下裂患者基因组DNA SRY基因测序及分析结果 | 第97-98页 |
| (七) 在尿道下裂患者中快速筛查SRY基因缺失的实验研究 | 第98-103页 |
| 一) 实验目的 | 第98页 |
| 二) 实验技术路线 | 第98页 |
| 三) 材料与方法 | 第98-103页 |
| 1.实验分组 | 第98页 |
| 2.PCR引物序列 | 第98页 |
| 3.PCR反应条件的优化 | 第98-99页 |
| 4.SRY核心片段的PCR扩增 | 第99-100页 |
| 5.实验结果 | 第100-102页 |
| 6.SRY基因缺失患者的临床资料 | 第102-103页 |
| (八) 讨论 | 第103-110页 |
| 一) 尿道下裂发病相关基因的筛选 | 第103页 |
| 1.性决定 | 第103页 |
| 2.性发育 | 第103页 |
| 二) 尿道下裂患者中SRY、AR基因结构变化研究方法的选择 | 第103-105页 |
| 1.P-PCR(任意引物PCR) | 第103页 |
| 2.Alu-PCR | 第103页 |
| 3.PCR-SSCP | 第103页 |
| 4.变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第103-104页 |
| 5.RNA酶的不匹配降解及相关技术 | 第104页 |
| 6.异源双分子的凝胶电泳 | 第104页 |
| 7.等位基因特异的寡聚核苷酸(ASO)杂交 | 第104页 |
| 8.等位基因特异PCR | 第104页 |
| 9.限制性片段长度多态性(RFLP) | 第104页 |
| 10.单链核苷酸碱基多态性(SNP) | 第104页 |
| 11.卫星DNA分析 | 第104页 |
| 12.基因测序 | 第104-105页 |
| 三) PCR产物直接DNA测序的特点 | 第105页 |
| 1.PCR产物直接DNA测序与克隆DNA片段测序法的主要区别 | 第105页 |
| 2.PCR过程产生的错误对直接DNA测序的影响 | 第105页 |
| 3.PCR产物直接DNA测序的技术特点 | 第105页 |
| 四) 引物设计的要点 | 第105-106页 |
| 五) PCR反应条件的优化和产物的纯化 | 第106-107页 |
| 1.PCR产物特异性的提高方法： | 第106页 |
| (1) Touch down PCR | 第106页 |
| (2) Tide PCR2.PCR产物的纯化 | 第106页 |
| 2.PCR产物的纯化 | 第106-107页 |
| 六) 测序结果的确认 | 第107页 |
| 七) 雄激素受体基因的结构特点,不同外显子突变对基因功能的影响 | 第107-108页 |
| 1.雄激素各个外显子的功能特点 | 第107-108页 |
| 1) 外显子1 | 第107页 |
| 2) 外显子2-3： | 第107页 |
| 3) 外显子4-8 | 第107-108页 |
| 2.AR调节靶基因表达的主要步骤 | 第108页 |
| 3.AR基因突变、表型与预后的关系 | 第108页 |
| 八) SRY基因的结构特点,外显子突变对基因功能的影响 | 第108-110页 |
| 1.SRY基因与尿道下裂患者的性别取向 | 第108-109页 |
| 2.SRY基因突变的表型及形成机制 | 第109页 |
| 3.SRY基因缺失、表型、治疗与预后 | 第109页 |
| 4.SRY基因缺失快速筛选的意义 | 第109-110页 |
| (九) 结论 | 第110-111页 |
| 第二部分参考文献 | 第111-118页 |
| 全文总结 | 第118-119页 |
| 附录 | 第119-136页 |
| 附录1 病例资料 | 第119-123页 |
| 附录2 实验试剂与设备 | 第123-126页 |
| 附录3 已报道的与尿道下裂相关的SRY、AR基因突变 | 第126-130页 |
| 附录4 AR、SRY基因的标准序列 | 第130-136页 |
| 致谢 | 第136-138页 |
| 个人简历 | 第138页 |
