| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第9-22页 |
| 1 关于抗菌肽的研究 | 第9-19页 |
| 1．1 生物活性多肽的研究 | 第9页 |
| 1．2 抗菌肽的分类 | 第9-10页 |
| 1．3 抗菌肽的功能研究 | 第10-11页 |
| 1．4 抗菌肽的结构和作用机理研究 | 第11-14页 |
| 1．5 抗菌肽的设计理论与实践 | 第14-16页 |
| 1．6 抗菌肽基因表达的研究 | 第16-17页 |
| 1．7 关于抗菌肽目前研究的总结、存在的问题和研究的热点 | 第17-19页 |
| 2 关于在原核细胞中进行高效可溶性融合蛋白表达相关理论研究进展 | 第19-22页 |
| 2．1 在大肠杆菌中的高效融合蛋白表达 | 第19页 |
| 2．2 新生肽链的折叠和重组蛋白可溶性表达 | 第19-22页 |
| 本研究的内容和意义 | 第22-23页 |
| 技术路线 | 第23-24页 |
| 材料和方法 | 第24-37页 |
| 1 实验材料 | 第24-25页 |
| 1．1 质粒与菌种 | 第24页 |
| 1．2 试剂 | 第24页 |
| 1．3 培养基 | 第24-25页 |
| 1．4 仪器 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-37页 |
| 2．1 抗菌肽CMIV基因突变体的设计和合成 | 第25-29页 |
| 2．1．1 抗菌肽CMIV基因突变体Ⅰ的设计和合成 | 第25-26页 |
| 2．1．2 抗菌肽CMIV基因突变体Ⅱ的设计和合成 | 第26-28页 |
| 2．1．3 抗菌肽CMIV基因突变体Ⅰ和Ⅱ的PCR反应扩增 | 第28-29页 |
| 2．2 抗菌肽CMIV基因突变体Ⅰ和Ⅱ的克隆和测序 | 第29-33页 |
| 2．2．1 PCR产物的纯化、酶切和回收 | 第31页 |
| 2．2．2 PTXFUS质粒DNA的提取、酶切和回收 | 第31页 |
| 2．2．3 连接反应 | 第31-32页 |
| 2．2．4 感受态细胞的制备和转化 | 第32页 |
| 2．2．5 重组克隆的筛选鉴定和保存 | 第32页 |
| 2．2．6 重组质粒DNA的再改造、亚克隆 | 第32-33页 |
| 2．2．7 阳性克隆的测序 | 第33页 |
| 2．3 抗菌肽CMIV基因突变体在表达载体PTXFUS中的阳性克隆转化受体菌及发酵和表达产物的分析 | 第33-35页 |
| 2．3．1 转化、发酵和诱导 | 第33页 |
| 2．3．2 表达产物的总蛋白分析 | 第33-34页 |
| 2．3．3 表达产物的可溶性蛋白和不可溶性蛋白分析 | 第34页 |
| 2．3．4 对表达产物进行热稳定性分析 | 第34页 |
| 2．3．5 对表达产物进行纯化 | 第34-35页 |
| 2．4 重组蛋白切割和抑菌活性的检测 | 第35-36页 |
| 2．4．1 重组蛋白的切割 | 第35-36页 |
| 2．4．2 设计的抗菌肽CMIV基因突变体Ⅰ和Ⅱ的抑菌活性检测 | 第36页 |
| 2．5 利用计算机对设计的CMIV突变体Ⅱ的多肽分子的二级结构的分析 | 第36-37页 |
| 结果与分析 | 第37-56页 |
| 1 抗菌肽CMIV突变体基因的合成、克隆和测序 | 第37-46页 |
| 1．1 抗菌肽CMIV突变体Ⅰ基因的合成、克隆和测序 | 第37-40页 |
| 1．2 抗菌肽CMIV突变体Ⅱ基因的合成、克隆和测序 | 第40-45页 |
| 1．3 阳性克隆2和6的改良 | 第45-46页 |
| 2 抗菌肽CMIV突变体基因在表达载体PTXFUS中的阳性克性转化受体菌、发酵和表达产物分析 | 第46-48页 |
| 2．1 表达产物的总蛋白分析 | 第46-47页 |
| 2．2 表达产物的可溶性蛋白和不可溶性蛋白分析 | 第47-48页 |
| 2．3 表达产物的热稳定性检验 | 第48页 |
| 3． 表达产物的初步纯化、切割以及活性检测 | 第48-50页 |
| 3．1 表达融合蛋白的初步纯化 | 第48-49页 |
| 3．2 表达的融合蛋白的Enterokinase切割以及抗菌肽CMIV突变体Ⅰ、Ⅱ活性检测 | 第49-50页 |
| 4 利用计算机对设计的CMIV突变体Ⅱ的二级结构分析结果 | 第50-56页 |
| 4．1 CMIV突变体Ⅱ的水溶性预测 | 第50-51页 |
| 4．2 CMIV突变体Ⅱ的螺旋结构分析 | 第51-52页 |
| 4．3 CMIV突变体Ⅱ的转角结构分析 | 第52-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-61页 |
| 1 关于抗菌肽CMIV基因突变体的设计 | 第57-58页 |
| 2 关于抗菌肽CMIV基因突变体的表达、纯化和活性检测 | 第58-60页 |
| 3 本研究的意义 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
