| 目录 | 第1-7页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-42页 |
| ·伪狂犬病病毒gE基因及伪狂犬病鉴别诊断 | 第13-28页 |
| ·伪狂犬病毒及其基因组 | 第13-14页 |
| ·gE的结构 | 第14-17页 |
| ·gE基因的功能 | 第17-20页 |
| ·gE基因的结构与功能研究新进展 | 第20-26页 |
| ·gE在猪伪狂犬病的根除计划中的作用 | 第26-28页 |
| ·外源蛋白在嗜甲醇酵母巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第28-42页 |
| ·巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris) | 第29-31页 |
| ·表达菌株的构建 | 第31-36页 |
| ·分泌蛋白的翻译后修饰 | 第36-39页 |
| ·P.pastoris表达系统的应用 | 第39-42页 |
| 第2章 猪伪狂犬病gE鉴别诊断方法的建立和应用 | 第42-89页 |
| ·研究目的和意义 | 第42-43页 |
| ·材料与方法 | 第43-57页 |
| ·材料 | 第43-50页 |
| ·方法 | 第50-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-80页 |
| ·gE主要抗原区的人工改造 | 第57-61页 |
| ·MgE717各片段的拼接 | 第61-65页 |
| ·由合成的gE片段构建重组酵母表达载体 | 第65-67页 |
| ·gE主要抗原区PCR扩增及重组酵母表达载体的构建 | 第67-69页 |
| ·酵母重组子的筛选及鉴定 | 第69-73页 |
| ·最佳表达条件的确定 | 第73-75页 |
| ·表达产物的糖基化分析 | 第75-76页 |
| ·gE-ELISA最佳条件的确定 | 第76页 |
| ·gE-ELISA阴阳性界线的确定 | 第76-77页 |
| ·特异性试验 | 第77页 |
| ·包被抗原保存期的测定 | 第77页 |
| ·重复性试验 | 第77-78页 |
| ·gE-ELISA与Blocking-ELISA的比较试验 | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-88页 |
| ·基因的合成 | 第80-81页 |
| ·影响gE基因在P.pastoris中表达的因素 | 第81-84页 |
| ·表达菌株的筛选 | 第84-85页 |
| ·重组表达菌株的稳定性 | 第85页 |
| ·表达蛋白的不均一性及糖基化分析 | 第85-86页 |
| ·P.pastoris中表达的gE蛋白的抗原性 | 第86页 |
| ·两个P.pastoris表达载体的比较 | 第86-87页 |
| ·gE-ELISA与Blocking-ELISA试验结果的比较 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 第3章 伪狂犬病毒及gE蛋白单克隆抗体的制备 | 第89-106页 |
| ·研究目的意义 | 第89页 |
| ·材料与方法 | 第89-93页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-102页 |
| ·病毒的纯化 | 第93-94页 |
| ·细胞融合 | 第94页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第94-96页 |
| ·免疫荧光试验 | 第96-100页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数的检测 | 第100-101页 |
| ·小鼠腹水效价的测定 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| ·动物的免疫 | 第102页 |
| ·细胞融合 | 第102-103页 |
| ·维持与增殖 | 第103页 |
| ·筛选 | 第103页 |
| ·克隆 | 第103-104页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第104页 |
| ·污染和控制 | 第104页 |
| ·小结 | 第104-106页 |
| 第4章 抗氯霉素单克隆抗体的制备及鉴定 | 第106-112页 |
| ·研究目的和意义 | 第106-107页 |
| ·材料和方法 | 第107-109页 |
| ·材料 | 第107页 |
| ·方法 | 第107-109页 |
| ·结果与分析 | 第109-111页 |
| ·细胞融合与杂交瘤细胞的筛选 | 第109页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数 | 第109页 |
| ·McAb效价测定及纯化 | 第109页 |
| ·McAb亚类鉴定 | 第109页 |
| ·CAP 50％抑制浓度的测定结果 | 第109-110页 |
| ·交叉反应率的测定 | 第110-111页 |
| ·讨论 | 第111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
